+ Nguyên lý tách dựa vào kích thước và tỷ trọng tế bào sử dụng dòng ly tâm liên tục để tạo ra cặp đối lực (lực ly tâm và lực dòng chảy) tác động lên tế bào tại cùng một thời điểm. Khi thay đổi các yếu tố trên: tăng tốc độ dòng bơm vào hoặc giảm lực ly tâm, các tế bào sẽ bị phân lập và được thu thập và đếm. Những tế bào có tỷ trọng thấp sẽđược phân lập trước.
+ Hiện nay, kỹ thuật này chủ yếu được sử dụng để tách lympho T, nhưng cũng sử dụng để tách tế bào có CD34.
1.4.1.2. Xử lý loại bỏ tế bào ung thư sử dụng cho ghép tự thân.
Là quá trình làm sạch hay loại bỏ những tế bào ung thư bị lẫn khi tiến hành ghép tự thân. Mặc dù tỷ lệ nhiễm tế bào ung thư trong chế phẩm tế bào gốc tách từ máu ngoại vi là rất thấp, thấp hơn nhiều so với tế bào gốc thu gom từ tuỷ xương, tuy vậy vẫn có thể lẫn nhiều tế bào ung thư. Một số nghiên cứu cho thấy có thể tế bào ung thư cũng được huy động từ tuỷ ra máu trong quá trình huy động tế bào gốc [86], [130].
tăng tỷ lệ chết do suy tuỷ kéo dài. Có nhiều kỹ thuật hiện nay được áp dụng để loại bỏ, phá huỷ dòng tế bào ung thư, đồng thời bảo tồn tế bào định hướng tạo máu sử dụng cho ghép.
9 Kỹ thuật dược lý học (Pharmacologic techniques): Tác dụng của hoá trị liệu chủ yếu tác động trên tế bào ung thư, vì những tế bào này nhạy cảm với hoá chất hơn tế bào bình thường. Trong thực nghiệm, kỹ thuật này cũng sử dụng nguyên lý đó, với liều hoá chất cao hơn mà không lo ngại sẽ ảnh hưởng đến các cơ quan khác, đồng thời liều hoá chất sử dụng cũng không gây độc khi truyền lại chế phẩm sau khi xử lý vào cơ thể người bệnh. Mafosfamid (oxazaphosphorine hoạt hoá) và một số thuốc khác hiện đang được thử nghiệm nhưng chưa công bố kết quả.
9 Kỹ thuật vật lý (Physical techniques): Là kỹ thuật tách dựa vào kích thước và tỷ trọng của tế bào. Kỹ thuật này cũng không đủ hiệu quả để tách tế bào ung thư, tuy nhiên sử dụng kết hợp cùng với kỹ thuật miễn dịch học sẽđem lại hiệu quả cao hơn.
9 Kỹ thuật miễn dịch học (Immunologic techniques): Kỹ thuật này sử dụng để tách các tế bào ung thư bằng phức hợp kháng thểđơn dòng đặc hiệu với kháng nguyên khối u kết hợp bổ thể có gắn tác nhân gây độc hoặc gắn hạt từ.
1.4.1.3. Xử lý loại bỏ tế bào T lympho
Việc xử lý loại bỏ T lympho nhằm làm giảm biến chứng GVHD do các T lympho từ người cho phản ứng chống lại cơ thể người bệnh. Tuy nhiên ở những bệnh nhân có hiện tượng ghép chống chủ thì tỷ lệ tái phát thấp hơn. Qua hiện tượng đó, các tác giả đã nghiên cứu và chứng minh tác dụng ghép chống leukemia (GVL). Với mục đích hạn chế bệnh ghép chống chủ, đồng
1.4.1.4. Vấn đề không hòa hợp nhóm máu hệ ABO và loại hồng cầu
Kết quả mọc ghép không bị ảnh hưởng bởi sự hoà hợp hệ kháng nguyên ABO, do các tế bào gốc định hướng đa tiềm năng và giai đoạn sớm không thể hiện kháng nguyên ABH. Tuy nhiên, hiện tượng chậm mọc ghép với dòng hồng cầu có thể xảy ra ở những trường hợp ghép không hoà hợp kháng nguyên hệ ABO chủ yếu và xảy ra tan máu muộn sau khi ghép không hoà hợp kháng nguyên hệ ABO thứ yếu và người cho có kháng thể chống lại tế bào người nhận.
a. Không hoà hợp kháng nguyên ABO chủ yếu: Sự bất đồng này xảy ra khi người nhận có kháng thể hệ ABO hoặc hệ khác, như anti-D hoặc anti-Kell, chống lại hồng cầu người cho. Trong trường hợp này cần xử lý chế phẩm tế bào gốc để loại hồng cầu trưởng thành khi dự tính thể tích khối hồng cầu sẽ được truyền vào cơ thể người nhận vượt quá 15ml.
b. Không hoà hợp kháng nguyên ABO thứ yếu: Hiện tượng này xảy ra khi người cho có kháng thể chống lại kháng nguyên hồng cầu người nhận. Biểu hiện đặc trưng của sự bất đồng này là tan máu miễn dịch, xuất hiện vào khoảng từ bảy đến mười ngày sau ghép, thậm chí hai tuần. Huyết tương không hoà hợp có thể dễ dàng loại bỏ bằng cách ly tâm.
c. Không hoà hợp kháng nguyên ABO hỗn hợp: Kết hợp cả hai loại trên.
1.4.2. Bảo quản tế bào gốc tạo máu
1.4.2.1. Quá trình làm lạnh và bảo quản tế bào