- Mẫu được thu thập vào 2 ngày có thời tiết khác nhau, ngày mưa ẩm và ngày nắng, khô.
- Mẫu không khí, mẫu bụi bề mặt và mẫu ngoáy mũi nhân viên y tếđược lấy vào 2 thời điểm trong ngày: buổi sáng, trước giờ làm việc và buổi chiều cuối giờ làm việc. Riêng mẫu nước thải lấy ở vị trí trước và sau xử lý.
2.2.3.Phương pháp thu thập số liệu
2.2.3.1.Mẫu môi trường:
Để thu được 100% vi khuẩn có trong mẫu, giấy lọc gelatin được dùng trong thiết bị thu mẫu không khí và các tâm bông lấy mẫu quệt cũng được phủ gelatin trong điều kiện vô khuẩn.
- Thu mẫu không khí: 46 mẫu không khí được lấy tại các vị trí: + Khu vực phòng khám: 7 mẫu
+ Khu vực chụp X-quang: 7 mẫu + Khu vực xét nghiệm: 13 mẫu
+ Khu vực bệnh phòng (có BN lao phổi AFB dương tính): 7 mẫu + Khu vực hành chính: 4 mẫu
+ Khu vực sân chơi, vườn: 4 mẫu + Khu vực cổng bệnh viện: 4 mẫu
Thiết bị thu mẫu không khí Airport MD8 là thiết bị dùng để kiểm soát phòng sạch trong bệnh viện và các phòng thí nghiệm…, sử dụng màng lọc gelatin có giá đỡ Cyrolit, đường lọc 80mm, cỡ lỗ 03 μm, lưu tốc khí cài đặt trong quá trình lấy mẫu là 50m3/phút, thể tích 1000 m3. Như vậy, để lấy một mẫu không khí cần 20 phút. Ưu điểm của gelatin là có thể hoà tan hoàn toàn trong nước và môi trường nuôi cấy vì vậy vi khuẩn thu được là 100%.
- Thu mẫu bụi bề mặt: gồm 68 mẫu quệt bề mặt các đồ vật, dụng cụ tại các vị trí: + Khu vực bệnh phòng: 22 mẫu + Khu vực chụp X-quang: 17 mẫu + Khu vực xét nghiệm: 15 mẫu + Phòng khám: 11 mẫu + Chống nhiễm khuẩn: 1 mẫu + Khoa điều trị: 2 mẫu
Kỹ thuật thu mẫu: dùng tăm bông đã được phủ gelatin trong môi trường vô khuẩn quệt lên bề mặt đồ vật nhằm thu được toàn bộ vi khuẩn khi hòa tan trong trong dung dịch đệm.
- Mẫu quệt trong mũi nhân viên y tế: gồm 96 mẫu quệt trong mũi nhân viên y tế tại các khoa, phòng: + Phòng xét nghiêm: 9 mẫu + Phòng khám: 6 mẫu + Phòng X-quang: 2 mẫu + Bệnh phòng: 38 mẫu + Phòng hành chính: 12 mẫu
Dùng tăm bông đã được phủ gelatin trong môi trường vô khuẩn, đưa sâu vào trong mũi, quệt theo chiều từ trong ra ngoài.
- Mẫu nước thải: 2000ml nước thải, bao gồm 1000ml trước xử lý và 1000ml sau xử lý. Nước thải được lọc qua màng 1,2 μm. Sau khi lọc, cắt nhỏ màng, trộn với nước cất, ly tâm hút bỏ nước nổi để thu cặn, thêm vào cặn 01 ml nước siêu sạch.
Bảo quản và vận chuyển mẫu:
- Mẫu sau khi thu thập, được bảo quản trong các dụng cụ vô khuẩn, đựng trong bình tích lạnh, nhiệt độ 00C.
- Mỗi loại mẫu được chia làm 2 phần bằng nhau: một phần tiến hành xác định vi khuẩn lao bằng phương pháp soi trực tiếp và nuôi cấy sau khi xử lý tại Khoa vi sinh - Bệnh viện Phổi trung ương (trước đây là BV Lao và Bệnh phổi Trung ương). Phần còn lại bảo quản ở - 700C để xác định vi khuẩn lao bằng kỹ thuật PCR tại Phòng miễn dịch, Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương.