Phần 4 Kết quả và thảo luận
4.1. Nghiên cứu đặc điểm sinh học của sợi nấm địa sâm (Coprinus comatus)
4.1.3. Nghiên cứu ảnh hƣởng của lƣu lƣợng sục khí đến sự sinh trƣởng hệ sợi nấm
nấm Địa sâm trong giai đoạn nhân giống cấp 2 trung gian dạng dịch thể 2000ml
Môi trƣờng trung gian chúng tôi sử dụng trong thí nghiệm này là môi trƣờng dịch thể tƣơng tự nhƣ môi trƣờng tối ƣu trong nhân giống cấp 2 (200ml). Lƣợng oxy cung cấp trong quá trình nuôi cấy nấm dịch lỏng là điều kiện không thể thiếu trong quá trình lên men. Trong quá trình lên men, các vi sinh vật và sợi nấm không ngừng tiêu thụ oxy, làm cho nồng độ oxy hòa tan luôn có xu hƣớng giảm xuống, chế độ cấp khí thích hợp sẽ cung cấp đầy đủ oxy, nâng cao mức độ tiếp xúc của sợi nấm với oxy vì vậy sợi nấm sinh trƣởng khỏe hơn, tạo nhiều sinh khối hơn.
Theo Nguyễn Thị Bích Thùy (2014), tốc độ sục khí ảnh hƣởng nhiều đến sự sinh trƣởng của sợi nấm. Thông thƣờng thì trong giới hạn cho phép, chế độ cấp khí càng cao thì mật độ KLC càng nhiều, SK sợi càng tăng. Tuy nhiên nếu chế độ sục khí quá mạnh thì SK sợi lại giảm, do tốc độ cao tạo lực cắt lớn làm sợi nấm bị tổn thƣơng, giảm sự tăng trƣởng của sợi nấm.
Giống nấm đƣợc lên men chìm trong môi trƣờng nhân giống, có bổ sung oxy bằng máy bơm sục khí có màng lọc midisard 0,02µm. Lƣu lƣợng cấp khí bơm vào trong môi trƣờng ở các mức khác nhau, mật độ KLC ở các mức sục khí: 0,4; 0,5; 0,6; 0,7 và 0,8 lít không khí/ phút (V/V/M) đƣợc ghi nhận ở bảng 4.3.
Bảng 4.3. Ảnh hƣởng của lƣu lƣợng sục khí đến sinh trƣởng sợi nấm Địa sâm
Lƣu lƣợng sục khí (V/V/M)
Kích thƣớc KLC
(mm) Mật độ KLC
Sinh khối sợi (g/l) CT1(0,4) 1,5 + 21,1 CT2(0,5) 1,3 ++ 28,3 CT3(0,6) 1,3 ++++ 32,5 CT4(0,7) 1,1 ++++ 35,7 CT5(0,8) 0,9 ++++ 33,6 LSD0.05 0,4 0,8 CV% 1,6 1,5 Ghi chú: +: Số lƣợng KLC từ 10 – 30 KLC/10ml ++: Số lƣợng KLC từ 31 – 60 KLC/10ml +++: Số lƣợng KLC từ 61 – 90 KLC/10ml ++++: Số lƣợng KLC từ 91 – 120 KLC/10ml
Qua bảng số liệu chúng tôi nhận thấy khi mức cấp khí là 0,4 V/V/M (CT1) thì kích thƣớc các KLC lớn nhất (1,5mm) nhƣng mật độ KC và sinh khối sợi nấm thấp nhất chỉ đạt 21,1 g/l. Các KLC to có tua dài và dịch nuôi trong.
Khi tăng dần mức cấp khí lên 0,5 và 0,6 V/V/M thì kích thƣớc KLC có xu hƣớng giảm tuy nhiên mật độ KLC và sinh khối sợi nấm lại tăng lên rõ rệt đạt 28,3
g/l và 32,5 g/l. Các sợi nấm liên kết chặt hơn KLC tròn có tua sợi và kích thƣớc đồng đều.
Khi tăng lƣu lƣợng cấp khi lên 0,7 V/V/M tác giả nhận thấy kích thƣớc KLC tiếp tục giảm, KLC tƣơng đối đồng đều, một số KLC bị phân tách tạo thành các dải sợi nấm có kích thƣớc nhỏ và không đồng nhất. Sinh khối sợi nấm tiếp tục tăng đạt 35,7 g/l.
Tiếp tục tăng lƣu lƣợng cấp khí lên 0,8 V/V/M thì kích thƣớc KLC có sự khác biệt rõ rệt với các công thức trên và đạt nhỏ nhất là 0,9 mm, mật độ KLC dày tuy nhiên kích thƣớc lại không đồng đều, rất nhiều KLC bị phân tách tạo thành các dải sợi nấm nhỏ hơn và không đồng nhất, dịch nuôi cấy hơi nhớt.
Nhƣ vậy khi tăng dần lƣu lƣợng cấp khí thì kích thƣớc KLC có xu hƣớng giảm, các KLC từ những viên có kích thƣớc to tròn sẽ bị phân cắt tạo thành các KLC hoặc dải sợi nấm nhỏ hơn do sự cấp khí tăng lên.
Kết quả thí nghiệm cũng cho thấy sự khác biệt giữa hình dạng KLC khi nuôi trên bình lắc và bình sục khí, KLC nuôi trong bình sục khí có tua sợi dài hơn so với trong bình lắc.
Theo Bum và cs (2008) thì cƣờng độ sục khí có ảnh hƣởng rõ rệt đến hình thái KLC, nuôi trong điều kiện sục khí là 0,5 V/V/M thì KLC có hình viên tròn hơi có lông tua. Nuôi trong điều kiện sục khí là 1,16 V/V/M thì KLC có tua dài.
Dựa vào các số liệu thu thập đƣợc chúng tôi nhận thấy CT4 (0,7V/V/M) thu đƣợc sinh khối sợi cao nhất và hình thái khuẩn lạc đẹp nhất và đƣợc sử dụng cho các thí nghiệm tiếp theo.