Phần 3 Nội dung và phƣơng pháp nghiên cứu
3.4. Phƣơng pháp nghiên cứu
3.4.3. Các chỉ tiêu theo dõi
3.4.3.1. Theo dõi sinh trưởng phát triển của nấm Địa sâm trong giai đoạn nhân giống dịch thể
- Khuẩn lạc cầu (pellets): Là một dạng của sản phẩm lên men hệ sợi nấm trong môi trƣờng dịch thể. Là kết quả của sự xoắn cuộn, liên kết hệ sợi lại với nhau tạo thành hạt có dạng hình cầu (Nguyễn Thị bích Thùy, 2014).
- Mật độ khuẩn lạc cầu: Là số khuẩn lạc cầu (KLC) có trong 10 ml dịch giống (Nguyễn Thị bích Thùy, 2014) và đƣợc xếp hạng nhƣ sau:
+: Số lượng KLC từ 10 – 30 KLC/10ml ++: Số lượng KLC từ 31 – 60 KLC/10ml +++: Số lượng KLC từ 61 – 90 KLC/10ml ++++: Số lượng KLC từ 91 – 120 KLC/10ml
- Đƣờng kính khuẩn lạc cầu: Sử dụng kính hiển vi Optika để xác định đƣờng kính khuẩn lạc cầu. Đơn vị tính: mm
- Sinh khối sợi: Xác định sinh khối theo phƣơng pháp của Park et al. (2001), mẫu đƣợc ly tâm ở 12000v trong 15 phút, lọc bằng màng milipore 0,45µm. Mẫu đƣợc rửa 4 lần với ethanol bão hòa, bảo quản qua đêm ở 40
C. Khối lƣợng sợi khô đƣợc xác định sau khi rửa khuẩn lạc cầu với nƣớc cất và sấy ở 700C qua đêm đến khối lƣợng không đổi. Kết thúc quá trình nuôi sợi, ly tâm dịch giống, cân khối lƣợng hệ sợi thu đƣợc. Đơn vị tính: g/l dịch giống.
3.4.3.2. Theo dõi sinh trưởng phát triển của nâm Địa sâm trong giai đoạn nuôi trồng
Tốc độ phát triển hệ sợi: Là số đơn vị chiều dài hệ sợi nấm phát triển trên giá thể nuôi trồng. Đơn vị: mm/ngày
Đặc điểm hệ sợi: Quan sát đặc điểm hệ sợi của mỗi công thức nghiên cứu và đánh giá độ dày hệ sợi bằng phƣơng pháp của Karidi et al., (1998) gồm các mức:
+) mật độ hệ sợi rất thƣa 4+) mật độ hệ sợi dày 2+) mật độ hệ sợi thƣa 5+) mật độ hệ sợi dày đặc 3+) mật độ hệ sợi trung bình
Thời gian hệ sợi phát triển kín giá thể: Là thời gian đƣợc tính từ khi cấy giống đến khi hệ sợi nấm phát triển kín bịch giá thể. Đơn vị tính: Ngày
Thời gian hình thành quả thể nấm: Là thời gian đƣợc tính từ khi bắt đầu cấy giống đến khi hệ sợi nấm bắt đầu hình thành mầm quả thể. Đơn vị tính: Ngày
Thời gian quả thể trƣởng thành: Là thời gian đƣợc tính từ khi bắt đầu cấy giống. Đơn vị tính: Ngày
Khối lƣợng quả thể nấm: g/quả
Tốc độ phát triển hệ sợi (mm/ngày) =
Tỷ lệ nhiễm (%) =
Tỷ lệ mầm hữu hiệu (%) =
Hiệu suất sử dụng cơ chất(%) =