sợi nấm Địa sâm giai đoạn nhân giống cấp 2 trung gian dạng dịch thể 2000ml
Tỉ lệ giống cấy vào môi trƣờng dịch thể là một trong những yếu tố quan trọng ảnh hƣởng đến tốc độ tăng trƣởng của giống, tới mật độ kích thƣớc của KLC nấm Địa sâm. Trong nghiên cứu theo dõi ảnh hƣởng của tỷ lệ giống cấy đến sinh trƣởng và phát triển của giống nấm Địa sâm chúng tôi sử dụng nguồn giống cấp 2 dịch thể 200ml. Công thức môi trƣờng dịch thể tối ƣu nhất ở thí nghiệm 1 đƣợc sử dụng làm môi trƣờng nhân giống trung gian dạng dịch thể 2000ml. Bố trí các tỉ lệ giống cấy là 3%, 5%, 7%, 10% và 15% lƣợng giống so với môi trƣờng. Các công thức sau khi đƣợc cấy giống sẽ đƣợc đƣa sang phòng ƣơm nhiệt độ 250
C nuôi trong 4 ngày với lƣu lƣợng sục khí 0,7V/V/M.
Chúng tôi tiến hành theo dõi sự sinh trƣởng và phát triển hệ sợi nấm trong suốt quá trình nuôi, kết quả thí nghiệm đƣợc trình bày ở bảng 4.2.
Bảng 4.2. Ảnh hƣởng của lƣợng giống cấy đến sinh trƣởng hệ sợi nấm Địa sâm 2000ml
Công thức Kích thƣớc KLC
(mm) Mật độ KLC Sinh khối sợi (g/l)
CT1 (3%) 1,6 ++ 25,9 CT2 (5%) 1,3 ++ 27,8 CT3 (7%) 1,2 +++ 31,4 CT4 (10%) 1,1 ++++ 35,6 CT5 (15%) 1,0 ++++ 34,5 LSD0,05 0,6 1,2 CV% 2,6 2,1 Ghi chú: +: Số lƣợng KLC từ 10 – 30 KLC/10ml ++: Số lƣợng KLC từ 31 – 60 KLC/10ml +++: Số lƣợng KLC từ 61 – 90 KLC/10ml ++++: Số lƣợng KLC từ 91 – 120 KLC/10ml
Dựa vào bảng số liệu chúng tôi thấy tỉ lệ giống cấy ảnh hƣởng nhiều đến mật độ khuẩn lạc cầu (KLC) và sinh khối (SK) sợi nấm Địa sâm. Cấy giống mẹ với tỉ lệ nhỏ 3% giống so với môi trƣờng (60ml) thu đƣợc giống nấm có mật độ KLC thấp, kích thƣớc KLC to (1,6mm) và SK sợi nhỏ (26,8g/l). Khi tăng tỉ lệ giống cấy lên 7% giống so với môi trƣờng nuôi (140ml)thì kích thƣớc KLC có xu hƣớng giảm xuống 1,3mm tuy nhiên mật độ KLC và SK sợi lại có xu hƣớng tăng lên đạt 27,8 g/l.
Khi sử dụng giống mẹ với tỉ lệ 10% giống so với môi trƣờng nuôi thì thu đƣợc giống nấm có mật độ KLC cao, kích thƣớc KLC (1,1mm) đặc biệt SK sợi cao nhất so với các mức cấy giống khác (35,6g/l).
Tiếp tục tăng mức giống mẹ lên 15% giống so với môi trƣờng nuôi thì kích thƣớc KLC giảm chỉ còn 1,0mm, các KLC có hiện tƣợng vị vón lại nhau và SK sợi có sự thụt giảm nhẹ (34,5g/l).
Nghiên cứu của Nguyễn Thị Bích Thùy (2014) trên nấm Sò vua và Vân chi cũng cho thấy khi mật độ cấy tăng lên thì SK sợi giảm, với lƣợng giống cấy 7% và 10% ống gốc thì SK sợi của nấm Sò vua và Vân chi là 33,7g/l và 35,6g/l. Tuy nhiên lƣợng giống cấy tăng lên 15% ống gốc thì dịch nuôi cấy dạng huyền phù, khí lƣu thông khó khăn, các KLC có kích thƣớc nhỏ, thƣờng kết vón với nhau, SK sợi của cả hai giống không tăng mà có xu hƣớng giảm.
Sự lƣu thông dòng chảy trong môi trƣờng dịch thể bị ảnh hƣởng mạnh bởi SK sợi nấm (Hwang et al., 2004) khi cấy mật độ quá lớn dẫn đến sự gia tăng lớn về độ nhớt của môi trƣờng, gây ra khó khăn cho việc hấp thụ dinh dƣỡng và trao đổi oxy. Các nghiên cứu trƣớc đều phù hợp với kết quả nghiên cứu của tác giả, nhƣ vậy khi cấy lƣợng giống quá lớn tới 15% giống so với môi trƣờng thì kích thƣớc KLC có xu hƣớng giảm, dịch thƣờng có dạng huyền phù cao, khó khăn cho sự lƣu thông của sợi nấm trong môi trƣờng dịch thể.
Nhƣ vậy công thức tốt nhất ở thí nghiệm 2 là công thức 4 (10% giống so với môi trƣờng nhân nuôi) là thích hợp nhất cho sự sinh trƣởng, phát triển và sinh khối sợi nấm Địa sâm và đƣợc sử dụng để tiến hành các thí nghiệm tiếp theo.