6. Bố cục của luận án
3.5.1. Sản phẩm cao chiết mật nhân
Hiện nay, trên thị trường có nhiều sản phẩm cao chiết từ thảo dược được bày bán tương đối phổ biến, công dụng của chúng cũng đã được nghiên cứu và chứng minh giá trị cao đối với sức khỏe con người. Quy trình công nghệ sản xuất cao chiết nhìn chung giống nhau về nguyên tắc, tuy nhiên, đối với mỗi loại nguyên liệu, mỗi vùng miền có những đặc trưng riêng nên trong quy trình chế biến có những điểm khác biệt.
Trong đề tài này, chúng tôi đã nghiên cứu và đề xuất quy trình sản xuất cao chiết rễ cây mật nhân từ vùng nguyên liệu lựa chọn và đánh giá chất lượng cao chiết mật nhân theo yêu cầu kỹ thuật của dược điển Việt Nam và phù hợp quy định hiện hành về an toàn thực phẩm [8].
a. Sơ đồ quy trình sản xuất
Quy trình sản xuất cao chiết mật nhân ở quy mô phòng thí nghiệm được trình bày theo sơ đồ hình 3.13.
Hình 3.13. Sơ đồ quy trình sản xuất cao mật nhân [8]
Rễ mật nhân Chiết (100 oC; 199,2 phút, tỷ lệ dung môi/nguyên liệu: 22,4/1 mL/g) Lọc Cô đặc (50 o C; Bx = 50 %) Gia nhiệt (80 oC) Rót chai, đóng nắp Thanh trùng (80 oC; 10 phút) Nước Bã Cao mật nhân
b. Mô tả
Bột rễ mật nhân được chiết trong nước cất trong hệ thống ống sinh hàn theo tỷ lệ dung môi/ nguyên liệu là 22,4/1 (mL/g) ở nhiệt độ 100 oC trong 199,2 phút điều kiện chiết đã được tối ưu
Dịch chiết thu được sau khi chiết được lọc chân không để loại bỏ bã, cô quay chân không ở nhiệt độ 50 oC đến khi dịch chiết đạt Bx khoảng 20 %. Sau đó, đun trên bếp cách thủy để tiếp tục cô đặc đến Bx khoảng 50 % thu được cao chiết.
Tiến hành gia nhiệt trên bếp điện đến nhiệt độ 80 oC để bài khí, hạn chế quá trình oxy hóa làm ảnh hưởng đến chất lượng của sản phẩm, giảm áp suất trong chai chuẩn bị cho quá trình rót chai và thanh tr ng, đồng thời hạn chế vi sinh vật hiếu khí tồn tại gây hỏng sản phẩm.
Sau khi gia nhiệt, rót ngay sản phẩm còn nóng vào lọ chứa rồi đóng nắp ngay nhằm tránh sự xâm nhập của vi sinh vật. Thanh trùng ở nhiệt độ 80 oC trong 10 phút nhằm tiêu diệt vi sinh vật có hại đối với sức khỏe con người, kéo dài thời gian bảo quản.
Sản phẩm cao chiết được thử nghiệm để đối sánh các chỉ tiêu chất lượng với tiêu chí của thảo dược, từ đó, đánh giá chất lượng sản phẩm [99].
3.5.1.1. Kết quả kiểm tra chất lượng sản phẩm cao chiết
Nội dung thực nghiệm được trình bày cụ thể tại phụ lục 7, kết quả kiểm tra các chỉ tiêu của cao chiết được trình bày cụ thể tại bảng 3.21.
Bảng 3.21. Kết quả các chỉ tiêu chất lƣợng cao chiết mật nhân
Mô tả Cao lỏng, sánh, đồng nhất. Màu nâu đậm. M i
nồng, đặc trưng của dược liệu. Vị đắng. Cắn không tan trong nước 1,18 ± 0,05 %
Hàm lượng ẩm 58,75 ± 0,04 %
Tro toàn phần 4,18 ± 0,03 %
pH 5,19
Tỷ trọng d2020 1,2138
Hàm lượng chất EL4 390 ± 7,07 mg/kg
Kết quả thực nghiệm được trình bày cụ thể tại phụ lục 8, so sánh với sản phẩm cao lỏng Hoắc hương chính khí, cao bổ phổi hiện đang lưu hành ở trên thị trường thì các kết quả trên khá tương thích và đáp ứng yêu cầu theo quy định của dược điển Việt Nam tập V.
Kết quả phân tích định tính một số hợp chất thiên nhiên trong cao chiết rễ mật nhân được thể hiện ở bảng 3.22.
Bảng 3.22. Kết quả định tính một số hợp chất thiên nhiên trong cao chiết mật nhân
TT Nhóm chất Thuốc thử Hiện tƣợng Kết quả Kết luận sơ bộ
1. Alkaloid Wagner Kết tủa nâu đỏ + Có
2. Phenolic Dung dịch FeCl3 1%
Dung dịch chuyển
sang màu xanh thẫm + Có
3. Steroid Phản ứng Salkowski Dung dịch chuyển sang màu đỏ đậm + Có Phản ứng Lieberman- Bourchard Dung dịch chuyển
sang màu cam +
Kết quả từ bảng 3.22 cho thấy, sự hiện diện của các hợp chất alkaloid, polyphenol, steroid trong cao mật nhân Đây đều là những chất đã được chứng minh là có nhiều hoạt tính sinh học. Theo Phan Quốc Kinh, alkaloid là những chất hữu cơ có trong thực vật có tác dụng ức chế hoặc kích thích thần kinh trung ương, điều trị bệnh tim, cao huyết áp, chống sốt rết, ung thư, [100]. Phenolic là những chất thơm chuyển hóa thứ cấp mang lại màu sắc, mùi vị và có những tác động đến sức khỏe như giảm nguy cơ mắc các bệnh về tim mạch [101]. Hơn nữa, kết quả nghiên cứ của nhóm Aliyu và cộng sự vào năm 2009 cho thấy, các hợp chất phenolic chiếm phần lớn chất chống oxy hóa trong thực vật [102]. Steroid là các hợp chất béo hữu cơ hòa tan có nguồn gốc tự nhiên hoặc tổng hợp Các steroid được bao gồm trong nhiều loại thuốc và thực phẩm chức năng quan trọng được d ng để điều trị các bệnh về xương khớp và thiểu năng tuyến sinh dục, điều trị vô sinh [100].
Các nghiên cứu trước đây khi tiến hành phân lập thành phần hóa học của mật nhân cũng đã xác định được sự có mặt của 3 hợp chất trên và chứng minh được nhiều hoạt tính sinh học của chúng. Nghiên cứu của Ping-Chung Kuo và công sự vào năm 2003 đã công bố rằng các alkaloid có trong rễ mật nhân có hoạt tính gây độc tính tế bào đáng kể chống lại các dòng tế bào ung thư phổi ở người (A-549 và ung thư vú ở người (MCF-7) [103]. Hoạt tính kháng viêm và khả năng chống sốt r t cũng được báo cáo bởi nhóm tác giả Phạm Bích Ngọc và cộng sự vào năm 2016 [104] và nhóm tác giả Leonadus B. S. Kardono và cộng sự vào năm 1991 [105]. Nhóm tác giả A.Oei–Koch và
cộng sự vào năm 1978 đã xác định được sự có mặt của các sterol thực vật là campesterol, stigmasterol và sitosterol trong rễ mật nhân và nhóm Ping-Chung Kuo và cộng sự vào năm 2003 đã chứng minh khả năng chống ung thư phổi của stigmasterol [103] [106].
Nhận xét: Các kết quả định tính nêu trên cho thấy sản phẩm cao mật nhân đã sản xuất này có chứa nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học có giá trị, kết quả cũng tương đối phù hợp với các nghiên cứu trước đây đối với những sản phẩm tương tự [103] [104] [105][106].
3.5.1.2. Kết quả kiểm tra an toàn vệ sinh thực phẩm của sản phẩm cao mật nhân
Tiêu chí về an toàn vệ sinh thực phẩm được thực hiện theo quy định hiện hành của cơ quan quản l nhà nước chuyên ngành tại QCVN 8-3:2011/BYT – Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia đối với giới hạn ô nhiễm vi sinh vật trong thực phẩm, QCVN 8- 2:2011/BYT – Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia đối với giới hạn ô nhiễm kim loại nặng trong thực phẩm. Nội dung kiểm tra được nêu tại phần d, mục 2 4 5 4, chương 2. Kết quả đánh giá các chỉ tiêu liên quan được trình bày ở bảng 3.23.
Bảng 3.23. Kết quả kiểm tra an toàn vệ sinh thực phẩm cao mật nhân
TT Tên chỉ tiêu Đơn vị
tính Tiêu chuẩn chất lƣợng Kết quả thử nghiệm Đánh giá
1. Tổng vi sinh vật hiếu khí CFU/mL <104 (*) 9 Đạt
2. Coliforms CFU/mL <10 (*) KPH Đạt
3. E. coli CFU/mL Không có
(*)
KPH Đạt
4. Tổng số nấm men và nấm mốc
CFU/mL 102 (*) KPH Đạt
5. Salmonella CFU/mL Không có
(*) Âm tính/25 mL Đạt 6. Pb mg/L <10 (**) 0,254 Đạt 7. Cd mg/L <0,3 (**) < 0,05 (MQL) Đạt
Chú thích: MQL: Giới hạn định lượng của phương pháp; KPH: Không phát hiện; (*): QCVN 8-3:2011/BYT – Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia đối với giới hạn ô nhiễm vi sinh vật trong thực phẩm; (**): QCVN 8-2:2011/BYT – Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia đối với giới hạn ô nhiễm kim loại nặng trong thực phẩm.
Nhận xét: Kết quả trên cho thấy mẫu cao chiết mật nhân đạt các chỉ tiêu an toàn vệ sinh thực phẩm theo QCVN 8-3:2011/BYT – Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia đối với giới hạn ô nhiễm vi sinh vật trong thực phẩm; QCVN 8-2:2011/BYT – Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia đối với giới hạn ô nhiễm kim loại nặng trong thực phẩm.
Kết luận: Đã xây dựng được quy trình sản xuất cao chiết với giá trị dược lý cao, các chỉ tiêu đáp ứng yêu cầu đối với sản phẩm cao dược liệu. Bên cạnh đó, sản phẩm cũng đáp ứng yêu cầu về an toàn vệ sinh thực phẩm theo quy định hiện hành của Bộ Y tế, nên đây là một sản phẩm chất lượng tốt. Do đó, sử dụng cao chiết mật nhân để nghiên cứu sản xuất trà thảo mộc mật nhân là sản phẩm thực phẩm bảo vệ sức khỏe từ nguồn nguyên liệu tại ở vùng núi huyện Ia-Grai, tỉnh Gia Lai.
3.5.1.3. Công bố chất lượng sản phẩm cao mật nhân
Bản công bố sản phẩm được xây dựng để trình cơ quan quản lý nhà nước chuyên ngành thẩm định và phê duyệt, cụ thể, trình Cục an toàn thực phẩm – Bộ Y tế. Nội dung bản dự thảo được trình bày cụ thể tại phụ lục 11.