2.2.3.1. Phương pháp thụ tinh trong ống nghiệm.
- Các bệnh nhân được kích thích nang noãn, siêu âm theo dõi sự phát triển của nang noãn theo phác đồ chuẩn của Trung tâm Đào tạo, Nghiên cứu Công nghệ Phôi. Khi siêu âm có ≥ 3 nang noãn kích thước trên 18mm thì cho thuốc kích thích phóng noãn hCG (Pregnyl 5000UI). Sau 34-36 giờ tiêm thuốc sẽ tiến hành chọc hút noãn.
- Tinh trùng của người chồng được lấy trước khi lấy noãn (bệnh nhân phải kiêng giao hợp 3-5 ngày), hoặc làm kỹ thuật PESA, MESA cùng thời gian chọc hút noãn. Sau đó tinh trùng được đánh giá mật độ, độ di động theo WHO (2000) [70] và được lọc rửa. Tùy theo chất lượng tinh trùng mà thực hiện kỹ thuật IVF hoặc ICSI.
Noãn được đánh giá thụ tinh sau khoảng thời gian 16 - 18 giờ đối với IVF đơn thuần, hoặc 14 - 16 giờ đối với ICSI. Các phôi tạo thành được nuôi cấy tiếp đến ngày thứ 3 bằng môi trường G1 và G2 (Vitrolife). Trong số các phôi được tạo ra, chọn 2 - 3 phôi tốt ở ngày thứ 3 để chuyển vào tử cung, còn lại những phôi đạt yêu cầu thì đem lưu trữ hoặc nếu bệnh nhân có trên 3 phôi tốt để lưu trữ thì có thể nuôi cấy phôi đến ngày thứ 5 và lưu trữ phôi ngày 5. Đối với những trường hợp bị quá kích buồng trứng, niêm mạc tử cung không tốt không chuyển được phôi tươi thì cũng chỉ chọn những phôi tốt (phôi độ III, IV) để lưu trữ..
2.2.3.2.Phương pháp đông phôi
Sử dụng môi trường đông phôi của hãng Kitazato, Nhật Quy trình đông lạnh nhanh theo Kuwayama, Nhật, 2005.
* Quy trình đông lạnh phôi bằng kỹ thuật thủy tinh hóa
Đông lạnh phôi thường quy đối với bệnh nhân làm thụ tinh trong ống nghiệm tại Trung tâm Đào tạo, nghiên cứu Công nghệ Phôi, đều sử dụng bộ kít
41
đông lạnh của hãng Kitazato, Nhật Bản sản xuất. Áp dụng quy trình đông lạnh thủy tinh hóa của Masashige Kuwayama (2005), sử dụng cryotop [57].
Hình 2.1. Bộ môi trường và dụng cụ lưu trữ phôi
1. Môi trường đông lạnh; 2. Cryotop; 3. Đĩa repro.
Hình 2.2. Bộ môi trường và dụng cụ rã đông phôi
1. Môi trường rã đông; 2. Đĩa repro; 3. Đĩa petri.