VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.1. Nội dung nghiên cứu
3.1.1. điều tra hiện trạng sử dụng kháng sinh tại các trang trại chăn nuôi lợn khu vực phắa bắc, chọn ựịa ựiểm lấy mẫu, dự kiến tại các trang trại chăn nuôi công nghiệp (quy mô 50 - 200 lợn) thuộc các tỉnh Hà Nội, Hải Dương, Hải Phòng, Bắc Ninh và Vĩnh Phúc.
3.1.2. Phân lập các chủng vi khuẩn Salmonella và E.coli gây bệnh từ các mẫu thu thập ở trang trại chăn nuôi (mẫu lau hậu môn, mẫu nền chuồng nuôi, mẫu dụng cụ chăn nuôi, mẫu thức ăn, nước uống, mẫu nước thải khu chuồng nuôi). 3.1.3. Phân lập các chủng vi khuẩn Salmonella và E.coli từ các mẫu thu thập tại lò mổ Ờ có nguồn gốc từ các trang trại ựã lấy mẫu (các mẫu bao gồm: mẫu lau thân thịt, mẫu manh tràng, mẫu nước dùng trong giết mổ, mẫu lau nền chuồng, mẫu lau hậu môn lợn trước giết mổ, mẫu lau sàn giết mổ).
3.1.4. Xác ựịnh ựộc lực của các chủng vi khuẩn Salmonella và E.coli phân lập ựược ở cả trang trại và lò mổ trên chuột nhắt trắng.
3.1.5. Xác ựịnh tắnh kháng kháng sinh của các chủng vi khuẩn Salmonella và
E.coli phân lập ựược ở trang trại và lò mổ.
3.2. Nguyên vật liệu
3.2.1. Các mẫu từ các trang trại chăn nuôi lợn: lau hậu môn, nền chuồng nuôi, dụng cụ chăn nuôi, thức ăn, nước uống, nước thải khu chuồng nuôi.
3.2.2. Các mẫu lấy từ lò mổ: mẫu lau thân thịt, mẫu manh tràng, mẫu nước dùng trong giết mổ, mẫu lau nền chuồng, mẫu lau hậu môn lợn trước giết mổ, mẫu lau sàn giết mổ.
3.2.3. Các loại môi trường:
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ 34
Pepton WaterẦ
- Các môi trường chuyên dụng ựể phân lập và giám ựịnh vi khuẩn:
Vi khuẩn E.coli: môi trường Brilliant Green, MacConkey, thuốc thử Kovac,Ầ
Vi khuẩn Salmonella: môi trường Mueller Kauffmann, XLT4, Kligler, Simon Citrate, Ure, Lysine,Ầ
- Môi trường dùng ựể kiểm tra tắnh kháng kháng sinh: Mueller Hinton Agar
3.2.4. Các thiết bị dùng làm thắ nghiệm: Tủ ấm, tủ lạnh, tủ sấy, nồi hấp, buồng cấy vô trùng, cân, máy dập mẫu Stomacher,Ầ
3.2.5. Các dụng cụ khác: pipet, ống ependoff, ống nghiệm, chai lọ các loại,Ầvà các hoá chất trong phòng thắ nghiệm.
3.2.6. Giấy tẩm kháng sinh bao gồm các loại: Ampicillin, Ciprofloxacin, Ceftazidime, Gentamycin, Nalidixic Acid, Nitrofurantoin, Norfloxacin, Streptomycin, Trimethoprim, Tetracycline.
3.2.7. Chuột thắ nghiệm khoẻ mạnh có trọng lượng 18 Ờ 20 gam.
3.3. Phương pháp nghiên cứu
3.3.1. Phương pháp ựiều tra
Tiến hành ựiều tra hiện trạng sử dụng thuốc kháng sinh tại các trang trại chăn nuôi lợn bằng hình thức phỏng vấn trực tiếp chủ trại.
3.3.2. Phương pháp thu thập mẫu
Tiến hành thu thập mẫu ở các trang trại chăn nuôi và lò mổ một cách ngẫu nhiên. Lấy mẫu theo TCVN 4833-2002 cũng như tham khảo một số phương pháp lấy mẫu của các nước trong khu vực và quốc tế.
- Thức ăn
Mở túi vô trùng ra, dùng thìa lấy thức ăn của lợn vào túi buộc lại, ghi nhãn rồi ựể vào hộp bảo quản mẫu.