6. Thời gian và địa điểm nghiên cứu
2.1.4. Các MT nghiên cứu đã sử dụng
MT nuôi cấy, giữ giống, bảo quản NS nghiên cứu
MT1 - (Môi trường YEA): Cao nấm men 4 g; glucose 20 g; agar 20 g; nước cất 1000 ml; pH = 5.5 – 6.0 [3].
MT2 - (Czapek – Dox cải tiến): NaNO3 3,5 g; KH2PO4 1,5 g; MgSO4.7H2O 0,5 g; KCl 0,5 g; FeSO4.7H2O 0,01 g (vết); glucose 20 g; agar 20 g; nước cất 1000 ml; pH = 6.5 [23].
MT nuôi cấy, giữ giống NS gây bệnh
MT3 - (Môi trường PDA): Khoai tây 300 g; glucose 50 g; agar 20 g, nước cất 1000 ml [14].
Cách chế dịch khoai tây: Khoai tây gọt vỏ, rửa sạch. Cân 300 g, thái nhỏ, thêm 1000 ml nước, đun sôi, nhỏ lửa trong 30 phút, lọc lấy dịch trong [14].
MT4 - (MT carrot ): Carrot 200 g; glucose 20 g; agar 20 g; 1 ít CaCO3; nước cất 1000 ml [14].
Cách thực hiện: Carrot gọt vỏ, rửa sạch. Cân 200 g, cắt nhỏ, say nhuyễn, thêm 1000 ml nước cất, đun sôi trong 30 phút, sau đó cho 1 ít CaCO3vào .Lọc lấy dịch trong, cho thêm glucose, agar, nước cất cho đủ 1000 ml.
MT5 - (môi trường CYA): NaNO3 3 g; K2HPO4 1 g; MgSO4.7H2O 0,5 g; KCl 0,5 g; FeSO4.7H2O 0,01 g (vết); succrose 30 g; agar 20 g; nước cất 1000 ml; pH = 6.5 [13].
MT cảm ứng NS sinh enzyme chitinase
MT6 - Dùng [MT2] để thử hoạt tính enzyme ngoại bào với cơ chất tương ứng chitin thay đường glucose với hàm lượng tương đương [3].
Môi trường bán rắn khảo sát khả năng sinh tổng hợp hệ enzyme thủy phân chitinase từ các chủng NS
MT7: Trấu 50 g; cám 40 g; MgSO4.7H20 0,2 g; K2HPO4 1 g; KCl 0,2 g; NH4NO3 1,0 g; FeSO4.7H2O 0,002 g; MnSO4 0,002 g; bột chitin 10 g; pH = 5 – 6, nước cất 50 - 60% [36].
MT8: Trấu 50 g; cám 40 g; pepton 1 g; urea 0,3 g; KH2PO4 0,2 g; CaCl2 0,3 g; Tween 80 1,2 g; (NH4)2SO4 0,4 g; MgSO4.7H20 0,3 g; bột chitin 10 g; pH = 5 – 6; nước cất 50 - 60% [45].
MT9: Trấu 50 g; cám 40 g; pepton 0,5 g, cao nấm men 0,5 g; glucose 1 g; KH2PO4 0,3 g; K2HPO4 0,7 g; MgSO4.7H20 0,5 g; FeSO4.7H20 0,5 g; ZnSO4 0,001 g; bột chitin 10 g; pH = 5 – 6; nước cất 50 - 60% [40].