- Đầu tiên phải thăm khám trực tràng để định vị, đánh giá mật độ của tuyến.
bấtkìT bấtkìN,Ml
Bảng 6: tổng kết đặc điểm các dạng phân tửPSA (33))
Dạng phân tử của PSA
Tên viết tắt Tỉ lệ(%) Một số đặc điểm của từng loại
PSA toàn phần tPSA 1 0 0 Bao gồm tất cả các dạng PSA trong huyết thanh, chủ yếu là fPSA và ACl-PSA
PSA tự do fPSA 10-40 là dạng không kết hợp vói bất kì chất nào khác, nó có thể có hoạt tính hoặc không có hoạt tính trong tinh dịch, trong huyết thanh nó ở dạng không có hoạt tính.TLPT=34000 PSA kết hợp PSA kết hợp vói a l- antichymotrypsin
ACr-PSA 60-90 dạng PSA liên kết đồng hoá trị vói
al-antichymotrypsin, dạng này chiếm ưu thế và phát hiện được bằng phản ứng đáp ứng miễn dịch.TLPT~ 95000
PSA kết hợp vói a l- antitrypsin
AT-PSA < 1 dạng PSA liên kết đồng hoá trị vói a l- antitrypsin, dạng này có rất ít trong huyết thanh
PSA kết hợp với a2
macroglobulin
MG-PSA A2M-PSA
<0 , 1 dạng PSA liên kết đồng hoá trị với
a2 macroglobulin, phân tử a2
macroglobulin che khuất phần mang tính kháng nguyên của PSA cho nên dạng này không phát hiện được bằng phản ứng đáp ứng miễn dich.TLPT- 750 000
PSA kết hợp với chất ức chế inter- alphatiypsin
IT-PSA <0 , 1 dạng PSA liên kết đồng hoá trị với chất ức chế inter-alphatrypsin, dạng này có trong huyết thanh với lượng rất nhỏ
PSA kết hợp với chất ức chế protein-
c
PCI-PSA 0 liên kết đồng hoá trị vói chất ức chế protein-C, không có trong huyết thanh chỉ có trong tinh dịch
2.3.1. Mốt số kĩ thuât xác đinh hàm lương PSA huvết thanh đang đươc sử dung
trẽn lâm sàng(15.33)
• Phương pháp miễn dịch enzym -EIA(enzym Immunoassay)(33)
Có nhiều kĩ thuật miễn dịch enzym tuỳ thuộc vào các loại kit của các hãng, một kĩ thuật đang được sử dụng là kĩ thuật MEIA (Micro particle enzym immunoassay) trên thiết bị IMX của hãng ABBOTT Hoa Kỳ. Các bước tiến hành :
1. Các hạt nhỏ có gắn kháng thể PSA được cho vào giếng ủ, sau đó cho mẫu thử vào giếng(mẫu thử là huyết thanh hoặc nước tiểu có chứa PSA). Kháng thể kháng PSA và PSA sẽ kết hợp vói nhau tạo phức hợp KN-KT trên các hạt nhỏ. 2. Hỗn hợp phản ứng trên được chuyển tới một màng sợi thuỷ tinh, các hạt nhỏ đã
gắn KN-KT sẽ được gắn chặt vào màng sợi thuỷ tinh. Rửa màng được để loại bỏ toàn bộ tạp chất không gắn.
3. Cho vào màng kháng thể kháng PSA thứ 2 , kháng thể này có gắn enzym phosphatase kiềm. KT2 kết hợp với KN là PSA tạo phức hợp mới là KTl-PSA- KT2-phosphatase kiềm. Rửa lại màng lần 2 để loại bỏ các tạp chất không gắn. 4. Cho tiếp cơ chất của phosphatase kiềm là 4-methylumbelliferyl phosphate. Phản
ứng xảy ra và cho sản phẩm có màu, đo màu trên máy quang kế ta xác định được hàm lượng của PSA.
• Phương pháp ELISA vói kỉt thử của hãng Bohnringer: Các bước tiến hành:
1. Cho huyết thanh có chứa PSA vào tube có gắn Streptavidin. Sau đó cho tiếp dung dịch ủ gồm có KT kháng PSA thứ 1 gắn biotin 0,8mg/ml trong môi trường