0

phá tế bào bằng siêu âm trong đệm 50 mm tris cl ph 8 5 1 mm edta 100 mm nacl 0 1 mm dte 1 mm pmsf li tâm thu dịch nổi

Tách dòng và biểu hiện gen mã hóa cho l lactate oxidase của chủng lactococcus lactis subsp  lactis VLSH 12 trong escherichia coli

Tách dòng và biểu hiện gen mã hóa cho l lactate oxidase của chủng lactococcus lactis subsp lactis VLSH 12 trong escherichia coli

Thạc sĩ - Cao học

... coli tái tổ hợp tiến hành qua bước sau: - Ph tế bào siêu âm đệm ( 50 mM Tris/ Cl, pH 8. 5; mM EDTA; 10 0 mM NaCl; 0 .1 mM DTE; mM PMSF) , li tâm thu dịch - Kết tủa ph n đoạn protein ammonium sulphate ... với đệm D ( 10 0 mM potassium phosphate pH 7.4; 0 .1 mM DTE) - Làm qua cột lọc gel Superdex 75 column (GE Healthcare) thu ph n đoạn protein với đệm E ( 50 mM potassium phosphate pH 7.4; 0 .1 mM DTE) ... Tris/ Cl, pH 6 .8; 0. 4% SDS) 10 % APS H2O cất 30% Arcylamide/Bis TEMED 2 ,5 ml 50 µl Bổ sung đến 10 ml 1, 6 ml µl Các mẫu protein bước tinh biến tính 10 0 oC ph t trộn với đệm màu 2x (1 25 mM Tris/ Cl pH...
  • 58
  • 586
  • 2
Tách dòng gen 16s arn riboxom từ vi khuẩn phân hủy thuốc bảo vệ thực vật methyl parathion

Tách dòng gen 16s arn riboxom từ vi khuẩn phân hủy thuốc bảo vệ thực vật methyl parathion

Sinh học

... lạc số 10 có đoạn gen lớn kích thớc đoạn gen đợc thiết kế theo thuyết 50 9 0 bp 402 7 bp 3 05 4 bp 203 6 bp 16 36 bp 10 18 bp 50 6 bp ảnh Điện di đồ sản ph m cắt plasmid tái tổ hợp Marker 1kb; - ... 16 s ARN riboxom chủng 7 31 đợc nhân PCR với cặp mồi Kết điện di cho thấy đoạn gen đợc nhân lên đặc hiệu có kích thớc khoảng 0 ,5 kb theo tính toán thuyết (ảnh 2) 33 203 6 bp 16 36 bp 10 18 bp 50 6 ... chủng Từ 1 ,5 ml dịch vi khuẩn nuôi cấy qua đêm, ph ng ph p tách chiết mô tả trên, thu đợc 1, 08 g / l ADN tổng số Để kiểm tra mức độ nhiễm protein ADN nhận đợc, đo quang ph ADN dới bớc sóng 2 80 nm...
  • 6
  • 626
  • 0
tách dòng gen

tách dòng gen

Mẫu Slide - Template

... lớn (> 10 kb) VÉCTƠ PHAGE     Ph n lớn xuất ph t từ phage λ: ph n trung tâm hệ gen phage λ mang gen li n quan đến trình gây tan vật chủ bị thay ADN ngoại lai Kích thước khoảng 48, 5 kb Có ... mang đoạn ADN cài đến ~ 20 kb (virut đóng gói ADN đến 4 05 0 kb) Khả xâm nhập tế bào chủ nhanh Có thể tách dòng prokaryote eukaryote VÉCTƠ PHAGE Ưu điểm: - Khả xâm nhập tế bào chủ nhanh Có thể tách ... (vd gen dystrophin người có kích thước đến 200 0kb), nhà nghiên cứu ph t triển véctơ nhiễm sắc thể nấm men nhân tạo mang đoạn cài ADN dài từ 200 đến 50 0 kb Véctơ tạo từ nhiễm sắc thể nhỏ nấm men...
  • 44
  • 2,118
  • 6
Các phương pháp tách dòng gen Tách dòng gen potx

Các phương pháp tách dòng gen Tách dòng gen potx

Điện - Điện tử

... thích hợp, mật độ tế bào đạt 1 08 - 10 9 tế bào/ 1ml li tâm thu sinh khối tế bào 1. 2 Tách dòng gen từ RNA thông tin (mRNA) Tách dòng gen từ mRNA trình ph c tạp, thực theo bước sau: Bước 1: Tách chiết ... vào tế bào chủ (host cell) ph ơng ph p khác nhau: Siêu âm, vi tiêm, bắn gen, sử dụng PEG (polyethylen glycol)… Với tế bào chủ vi khuẩn thường sử dụng ph ơng ph p biến nạp sốc nhiệt Ph ơng ph p ... kỹ thu t li tâm ph n đoạn tách mRNA khỏi bi từ để thu mRNA Có thể giữ mRNA nhiệt độ - 85 0C để tiếp tục nghiên cứu Bước 2: Tổng hợp cDNA mạch kép Sử dụng kỹ thu t PCR ngược có tham gia enzym phiên...
  • 8
  • 1,280
  • 28
tách dòng gen từ DNA

tách dòng gen từ DNA

Sinh học

... kế từ ph n DNA E.colivà plasmid) 1 -5 kb 15 - 25 kb 20 - 10 kb 30 - 50 kb 10 0- 300 kb TAC (thiết kế từ ph n đoạn vir gen Ti plasmid) 10 0- 300 kb BiBac (thiết kế từ ph n DNA gen Agrobacterium) 10 0 - 50 0 kb ... gen Agrobacterium) 10 0 - 50 0 kb PAC (bộ gen phage P1+plasmid) 10 0- 300 kb YAC (thiết kế từ ph n DNA gen nấm men) 200 0 2 .1- Plasmid - Plasmid đoạn DNA ngắn (2-5kb), dạng vòng, nằm nhiễm sắc thể, có ... tế bào vi khuẩn nhận plasmit tái tổ hợp -> việc lựa chọn chủng ý muốn không đơn giản Các ph ơng ph p xác định dòng cần tìm Ph ơng ph p lai axit nucleic Ph ơng ph p sử dụng kháng thể Ph ơng ph p...
  • 38
  • 617
  • 2
Phân lập, tuyển chọn và tách dòng gen mã hóa enzym xylanase từ nấm mốc

Phân lập, tuyển chọn và tách dòng gen mã hóa enzym xylanase từ nấm mốc

Sinh học

... pH (gi) Nhit (gi) / ph t / Nm mc Acrophialophora 22 7 ,0 55 - 60 (1) - 39 5, 5-6 55 - - 5, 7-6,7 1, 0 10 00 0 23 5, 0 50 - - 3,7 3333 26 4 ,0 45 - 50 - - 3,3-3 ,5 0, 09 455 34 56 4 ,0- 6,7 56 3,4 0, 97 10 91 ... 3,4 0, 97 10 91 4 ,8 54 4 ,5 50 9,4 7,6 2 6 50 35 7 ,5- 50 - - 6,3 5, 26 1 18 , 4 24 7 ,5- 50 - - 4,4 4 ,16 1 45, 2 Erwinia chrysanthemi 42 5, 5 55 4-7 35 8, 8 - - Penicillium 33 7 ,0 60 6 ,0- 7 ,5 40 (3) 8, 6 - - purpurogenum ... Strain SPS -0 99 6 ,0 75 - 70 (4) 0, 7 1 45 Bacillus sp W1 21 .5 65 4 ,5- 10 - 8, 5 4 ,5 - (JCM 288 8) 49 .5 7,9 70 4 ,5- 7 ,0 - 3,7 0, 95 - Streptomyces T-7 20. 64 4 ,5- 5 ,5 60 5, 0 (14 4) 37 (264) 7 ,8 10 7 600 Streptomyces...
  • 61
  • 1,102
  • 8
Tách dòng gen cry4A, cry4B mã hóa protein diệt côn trùng bộ hai cánh từ các chủng Baccillus thuringiensis phân lập từ một số mẫu đất thuộc thành phố Nha Trang

Tách dòng gen cry4A, cry4B mã hóa protein diệt côn trùng bộ hai cánh từ các chủng Baccillus thuringiensis phân lập từ một số mẫu đất thuộc thành phố Nha Trang

Y dược - Sinh học

... tâm thu tủa 600 0 vòng/ ph t 41 - Hòa lại tủa 25 ml CaCl2 10 0mM, ủ mẫu đá 60 ph t - Ủ xong ly tâm 600 0 vòng /ph t 10 ph t 0C Hòa tế bào 0 ,5 ml CaCl2 10 0mM, bổ xung 15 % glycerol Hút 10 μl dịch tế ... 50 X 10 ml Nước cất 490ml Bromophenol Blue 1% ml Glycerol 87 % 3, 45 ml H 20 khử ion 5, 55 ml Tris (0, 1M; pH 7 ,5) 0, 15 ml NaOH 1M 0, 022 ml H2O khử ion  EDTA (0 ,5 M; pH 8) 10 0 l CH3COOH  RNAse 10 ... OD 600 đạt 0 ,5 – 0, 6 lấy mẫu đặt đá 1h Sau từ bước thao tác ph i thực 40C - Mẫu sau đặt đá 1h đem ly tâm 600 0 vòng /ph t 10 ph t, loại dịch Hòa tế bào thu 50 ml CaCl2 10 0mM vô trùng, ủ 15 ph t ly tâm...
  • 82
  • 418
  • 0
Tìm vùng bảo thủ, thiết kế mồi tách dòng gen sinh PEROXIDASE từ củ cải trắng

Tìm vùng bảo thủ, thiết kế mồi tách dòng gen sinh PEROXIDASE từ củ cải trắng

Sinh học

... trúc tương đồng chọn để dự đoán kết  Z229 20 .1 : 10 0%  XM _00 35 6 81 25. 1: 62%  D14997 .1: 54 %  EU7 254 69 .1: 34%  NM _0 01 15 3 4 70 .1: 36%  NM _0 01 15 6 283 .1: 30% Cơ sở lựa chọn dãy  Các kết đặc tính gen ... Oryza  Sativa  japonica Kết đặc tính gen chọn  EU7 254 69 .1 Kết đặc tính gen chọn  NM _0 01 15 3 4 70 .1 Kết đặc tính gen chọn  NM _0 01 15 6 283 .1 Kết luận  Đoạn gen cần xác định hoạt tính sinh học, ... thường công bố ph n nhỏ gen cung cấp Kết đặc tính gen chọn  Z229 20 .1 hoạt tính  peroxidase, được công bố là mRNA của chủng  S.polyrrhiza  XM _00 35 6 81 25. 1 Kết đặc tính gen chọn  D14997 .1  Được công...
  • 38
  • 682
  • 4
Tách dòng và thiết kế vector chuyển gen của gen mã hoá protein vỏ (coat protein) từ virus gây bệnh đốm vòng cây đu đủ (PRSV) ở việt nam

Tách dòng và thiết kế vector chuyển gen của gen mã hoá protein vỏ (coat protein) từ virus gây bệnh đốm vòng cây đu đủ (PRSV) ở việt nam

Thạc sĩ - Cao học

... Taq litoralis DNA polumerase tái tổ hợp Pfu 92kDa > 60 76kDa >12 0 Độ bền với nhiệt độ 97 , 50 C 9 50 C 92 , 50 C [MgCl2]opt [KCl]opt 10 ' 40' 13 0' 1, 5mM 5 0mM 13 0' 13 0' 2, 0mM 1 0mM 20' 1, 5mM 8 0mM > 2h >3h 1 ,5- 2mM ... số li u không đợc xác định Tổng sản lợng năm ( x 100 0 tấn) 1 987 19 90 247 6 85 16 97 206 .5 65 349.6 84 . 28 - 19 93 282 723 17 38 286 6 363 64 .8 422.4 19 95 754 18 7 2 32 08 342.9 66 58 . 1 100 714 .1 1 .1. 3 Ph n ... 35. 0 - 59 cal 88 .4 - 90. 7 g 1. 0 - 1 .5 g 0 .1 g 7 .1 - 13 .5 g 0 .1 g 11 .0 - 31. 0 mg 7 .0 - 17 mg 0. 6 - 0. 7 mg 2 .0 - 3 .0 mg 39 - 337 mg 1. 16 - 2.43 mg 0. 03 - 0. 08 mg 0. 7 - 0. 15 mg 0 .1 mg 69.3 - 71. 0...
  • 54
  • 1,611
  • 25
Đánh giá tính đa dạng của các virus gây bệnh xoan lá cà chua ở Việt Nam thong qua tách dòng, xác định và so sánh trình tự đoạn gen mã hóa cho protein vỏ

Đánh giá tính đa dạng của các virus gây bệnh xoan lá cà chua ở Việt Nam thong qua tách dòng, xác định và so sánh trình tự đoạn gen mã hóa cho protein vỏ

Nông - Lâm - Ngư

... quốc tế đợc sử dụng nghiên cứu STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 Mã số NCBI AY59 417 4 U 382 39 Z 4 81 82 AJ8 653 37 AF1 05 9 75 AJ22 3 50 5 AF0247 15 U 886 92 AJ132 711 X 15 6 56 AF1 95 782 AF 414 287 K0 202 9 AY04 41 38 ... 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 AB 116 6 30 AB 116 6 31 AB1929 65 AB192966 AB 05 0 5 97 AY134494 AJ 519 4 41 X 61 15 3 NC 00 456 9 AY 514 6 30 AJ49 58 1 2 AY 514 632 AY 514 6 31 NC 00 08 6 9 AJ5 58 1 25 ... hoà tan 10 0 àl TE (có bổ sung RNase) Extraction bufer: 10 0 mM Tris HCL, pH= 8 ; 50 mM EDTA; 50 0 mM NaCl; 1% SDS; 10 mM -mercaptoethanol, axit xitric 10 mM 2.2.2 Nhân gen đặc hiệu ph ng ph p PCR...
  • 42
  • 1,532
  • 7
Tách dòng, xác định và so sánh trình tự gen mã hoá Nuclear Inclusion Body protein (NIb) của một số dòng virus gây bệnh đốm vòng trên cây đu đủ (Papaya Ringspot virus-PRSV) ở Việt Nam

Tách dòng, xác định và so sánh trình tự gen mã hoá Nuclear Inclusion Body protein (NIb) của một số dòng virus gây bệnh đốm vòng trên cây đu đủ (Papaya Ringspot virus-PRSV) ở Việt Nam

Nông - Lâm - Ngư

... 404 59 1 59 9 59 9 + Nam Mỹ 12 63 202 9 209 0 21 05 + châu 1 15 6 16 10 15 18 15 2 0 - Indonexia 342 59 7 50 0 50 0 - ấn Độ 399 4 90 50 0 50 0 - Trung Quốc 94 14 2 14 3 14 3 - Thái Lan 10 0 12 0 1 15 1 15 - Việt Nam 54 ... Vitamin C 10 0g chín 35 59 cal 88 , 40 90, 70 g 1, 00 1 , 50 g 0 , 10 g 7 , 10 13 , 50 g 11 31 mg 17 mg 0, 60 0, 70 mg mg 39 337 mg 1, 16 2,43 mg 0, 03 0, 08 mg 0, 70 0, 15 mg 0 , 10 mg 69, 30 71, 00 mg Đặc ... khoảng 1 ,5 đến tỉ đôla Mỹ [34] Bảng Sản lợng đu đủ hàng năm số nớc [12 ] Nớc sản xuất Thế giới Tổng sản lợng năm ( x 100 0 tấn) 1 989 -19 91 19 95 19 96 36 25 50 9 1 50 1 1 1997 50 2 4 + châu Phi 786 7 80 786 7 80 ...
  • 33
  • 1,406
  • 5
tách dòng và thiết kế vector chuyển gen mã hóa protein vỏ từ virus gây bệnh đốm vòng cây đu đủ ở Việt Nam

tách dòng và thiết kế vector chuyển gen mã hóa protein vỏ từ virus gây bệnh đốm vòng cây đu đủ ở Việt Nam

Nông - Lâm - Ngư

... Taq litoralis DNA polumerase tái tổ hợp Pfu 92kDa > 60 76kDa >12 0 Độ bền với nhiệt độ 97 , 50 C 9 50 C 92 , 50 C [MgCl2]opt [KCl]opt 10 ' 40' 13 0' 1, 5mM 5 0mM 13 0' 13 0' 2, 0mM 1 0mM 20' 1, 5mM 8 0mM > 2h >3h 1 ,5- 2mM ... số li u không đợc xác định Tổng sản lợng năm ( x 100 0 tấn) 1 987 19 90 247 6 85 16 97 206 .5 65 349.6 84 . 28 - 19 93 282 723 17 38 286 6 363 64 .8 422.4 19 95 754 18 7 2 32 08 342.9 66 58 . 1 100 714 .1 1 .1. 3 Ph n ... 35. 0 - 59 cal 88 .4 - 90. 7 g 1. 0 - 1 .5 g 0 .1 g 7 .1 - 13 .5 g 0 .1 g 11 .0 - 31. 0 mg 7 .0 - 17 mg 0. 6 - 0. 7 mg 2 .0 - 3 .0 mg 39 - 337 mg 1. 16 - 2.43 mg 0. 03 - 0. 08 mg 0. 7 - 0. 15 mg 0 .1 mg 69.3 - 71. 0...
  • 54
  • 993
  • 1
Đánh giá tính đa dạng của các virus gây bệnh xoan lá cà chua ở Việt Nam thong qua tách dòng, xác định và so sánh trình tự đoạn gen mã hóa cho protein vỏ

Đánh giá tính đa dạng của các virus gây bệnh xoan lá cà chua ở Việt Nam thong qua tách dòng, xác định và so sánh trình tự đoạn gen mã hóa cho protein vỏ

Nông - Lâm - Ngư

... quốc tế đợc sử dụng nghiên cứu STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 Mã số NCBI AY59 417 4 U 382 39 Z 4 81 82 AJ8 653 37 AF1 05 9 75 AJ22 3 50 5 AF0247 15 U 886 92 AJ132 711 X 15 6 56 AF1 95 782 AF 414 287 K0 202 9 AY04 41 38 ... 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 AB 116 6 30 AB 116 6 31 AB1929 65 AB192966 AB 05 0 5 97 AY134494 AJ 519 4 41 X 61 15 3 NC 00 456 9 AY 514 6 30 AJ49 58 1 2 AY 514 632 AY 514 6 31 NC 00 08 6 9 AJ5 58 1 25 ... hoà tan 10 0 àl TE (có bổ sung RNase) Extraction bufer: 10 0 mM Tris HCL, pH= 8 ; 50 mM EDTA; 50 0 mM NaCl; 1% SDS; 10 mM -mercaptoethanol, axit xitric 10 mM 2.2.2 Nhân gen đặc hiệu ph ng ph p PCR...
  • 43
  • 1,281
  • 2
Tài liệu Tách dòng phân tử và xây dựng thư viện hệ gen pdf

Tài liệu Tách dòng phân tử và xây dựng thư viện hệ gen pdf

Điện - Điện tử

... tính: 1) Chúng ph i chứa trình tự khởi đầu chép (tái bản), cho ph p chúng tự chép độc lập với nhiễm sắc thể tế bào chủ 2) Chúng ph i mang dấu chuẩn chọn lọc cho ph p dễ dàng xác định ph n lập tế bào ... giúp hầu hết tế bào mang véctơ tái tổ hợp thường tiếp nhận plasmid Thu c tính giúp cho tế bào biến nạp dòng tế bào chúng sinh (do ph n chia trực ph n) mang véctơ ADN tái tổ hợp cho ph p nhà nghiên ... viện hệ gen, tế bào E coli tiến hành biến nạp với tất ph n đoạn thư viện Mỗi tế bào biến nạp thường mang véctơ mang đoạn cài ADN Vì vậy, tế bào nhân lên sau chúng sẽ tạo nhiều dòng tế bào, dòng...
  • 23
  • 432
  • 2
Tách dòng , giải trình tự và thiết kế vector biểu hiện gen novs tham gia tổng hợp đường noviose trong cấu trúc của kháng sinh novobiocin

Tách dòng , giải trình tự và thiết kế vector biểu hiện gen novs tham gia tổng hợp đường noviose trong cấu trúc của kháng sinh novobiocin

Kỹ thuật

... Thực ph n ứng PCR: Hỗn hợp ph n ứng gồm: 1. 0 µl ADN khuôn ( 10 0 ng/µl) 2 .5 µl mồi, 1. 25 µl cho mồi ( 10 0 ng/µl) 1. 0 µl Taq ADN Polymerase 1. 0 µl nucleotide 5. 0 µl đệm 89 .5 µl H2O Tổng thể tích 10 0 ... novobiocin biosynthetic gene cluster of Streptomyces spheroides NCIB 1 18 9 1" Antimicrob Agents Chemother 44 (5) : 12 14–22 doi : 10 .11 28/ AAC.44 .5. 12 1 412 22. 200 0 PMID 10 7 70 754 PMC 89 847 http://aac.asm.org/cgi/pmidlookup?view=long&pmid = 10 7 70 754 ... acI 11 71- 2 2 50 Điểm khổi đầu pBR322 3 684 Ph m Văn Ph lớp 06 -04 14 Khoa Công Nghệ Sinh Học Khóa Luận Tốt Nghiệp K13 Viện Đại Học Mở Hà Nội Trình tự coding bla 44 45- 5 302 Điểm khởi đầu f1 54 34- 58 8 9...
  • 30
  • 785
  • 0
Tách dòng và thiết kế vector biểu hiện gen mã hóa cho thụ thể neurokinin 1 ở người việt nam

Tách dòng và thiết kế vector biểu hiện gen mã hóa cho thụ thể neurokinin 1 ở người việt nam

Thạc sĩ - Cao học

... hexamer ( 10 0 µM) 1 .5 dNTPs ( 10 mM) 2 .5 Đệm 5x 5. 0 Ủ 700 5 để biến tính - Gắn mồi: 2 50 10 ph t AMV RTase Tổng - Kéo dài: 3 70 90 ph t - Bất hoạt enzyme: 85 0 ph t 3 .0 25. 0 Sản ph m cDNA bảo quản ... tính đầu tiên: Đệm 10 x (MgCl2 20 mM) 1 .5 94oC, ph t dNTPs (2 mM) 1. 0 NK1 R1 (2 µM) 0 .5 pJET R (2 µM) 0 .5 Pfu polymerase (1 u/µl) 0 .1 p5’-NK1-2 1. 0 +Tổng hợp: 720C, 12 0 giây Tổng 15 . 0 - Thời gian ... tiên: Đệm 10 x 1 .5 dNTPs (2 mM) 1. 0 NK1 F1 (2 µM) 0 .5 NK1 R (2 µM) 0 .5 Taq DNA polymerase (1 u/µl) 0 .5 DNA khuôn 1. 0 +Tổng hợp: 720C, 15 0 giây Tổng 15 . 0 - Thời gian tổng hợp sau cùng: 94oC, ph t...
  • 23
  • 592
  • 0

Xem thêm