... 27 B ng 4.4 Kết < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực E coli nhóm khuẩn lạc phân b tiêu chảy 29 B ng 4.5 Kết < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực E coli b mặt thịt b .30 B ng 4.6 Tổng kết < /b> kếtphát < /b> gen < /b> độc < /b> lực ... vii 4.3 Kết < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực E coli phân lập từ phân b tiêu chảy 28 4.4 Kết < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực E coli phân lập từ b mặt thịt b 29 4.5 Tổng kết < /b> kếtphát < /b> gen < /b> độc < /b> lực ... Minh, tháng 9/2005 ỨNGDỤNG KĨ THUẬTMULTIPLEX < /b> – PCR < /b> ĐỂPHÁTHIỆNMỘTSỐGEN < /b> ĐỘC LỰC CỦA NHÓM E COLI SẢN SINH ĐỘCTỐ SHIGA (STEC) PHÂN LẬP ĐƯỢC TỪ PHÂN B , HEO TIÊU CHẢY VÀ THỊT B ” Hội đồng hướng...
... DNA chạy multiplex < /b> – PCR < /b> phát < /b> gen < /b> gây độc < /b> Kết < /b> trình b y b ng 4.4 Kết < /b> b ng 4.4 cho thấy (1) khuẩn lạc riêng lẻ màu hồng MAC lấy ngẫu nhiên, multiplex < /b> – PCR < /b> phát < /b> 1/4 số khuẩn lạc mang gen < /b> stb (25%) ... Chưa phát < /b> gen < /b> sta E coli phân lập từ 27 mẫu phân tiêu chảy b , b heo 5.2 Đề nghị (1) Có thể ứng < /b> dụng < /b> kỹ < /b> thuật < /b> multiplex < /b> – PCR < /b> để < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực dòng E coli gây b nh, góp phần chẩn đốn b nh ... b , phân heo tiêu chảy thịt b ” 1.2 Mục tiêu - Phát < /b> sốgen < /b> độc < /b> lực E coli kỹ < /b> thuật < /b> multiplex < /b> – PCR < /b> từ mẫu phân tiêu chảy b , b , heo mẫu b mặt thịt b 1.3 Mục đích - Góp phần chẩn đốn kiểm sốt...
... tích kết < /b> PCR < /b> Sau thực phản ứng < /b> PCR,< /b> tùy vào mục đích mà người ta sử dụng < /b> nhiều kỹ < /b> thuật < /b> sinh học phân tử khác để < /b> phân tích sản phẩm phản ứng < /b> PCR < /b> đọc 16 trình tự sản phẩm PCR,< /b> tạo dòng sản phẩmPCR < /b> ... 1989) Và để < /b> b ớc đầu tầm soát gen < /b> độc < /b> lực E coli STEC thực phẩm, tiến hành khảo sát b mặt thịt b , hầu hết trường hợp ngộ độc < /b> thựcphẩm người ăn phải thịt b sản phẩm có nguồn gốc từ thịt bb nhiễm ... 2000, Bio-Rad) Các sản phẩmPCR < /b> xác định cách so với b ng đối chứng dương thang ladder 100 bp Phần KẾTQUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Kết < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực E coli phân lập từ phân b tiêu chảy 24 Kết < /b> phát < /b> gen...
... multiplex < /b> - PCR1< /b> 26 Hình 3.2 Kết < /b> điện di sản phẩmmultiplex < /b> - PCR2< /b> 26 SƠ ĐỒ Sơ đồ 3.1 Phân lập, xác định E coli phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực 22 BIỂU ĐỒ Biểu đồ 4.1 Tổng kết < /b> kếtphát < /b> gen < /b> độc < /b> lực E ... SÁCH CÁC B NG B NG TRANG B ng 3.1 Số lượng mẫu .20 B ng 4.1 Kết < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực nhóm khuẩn lạc đại diện cho E coli phân b tiêu chảy 29 B ng 4.2 Kết < /b> phát < /b> gen < /b> stx1, stx2, eae, hly số khuẩn ... ỨNGDỤNGKỸTHUẬTMULTIPLEX < /b> – PCR < /b> ĐỂPHÁTHIỆN CÁC GEN < /b> ĐỘC LỰC CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI PHÂN LẬP TỪ PHÂN B , PHÂN HEO TIÊU CHẢY VÀ THỊT B ” Hội đồng hướng dẫn: PGS TS Nguyễn Ngọc Tuân BSTY...
... khơng có sản phẩm - Chạy PCR < /b> cho cặp primer sử dụng < /b> multiplex < /b> với nhiệt độ ủ b t cặp thấp b nh thường - So sánh sản phẩm khơng chun biệt cho cặp primer kiểm tra với sản phẩm khơng chun biệt nhìn ... coli by using multiplex < /b> - PCR < /b> assay for stx1, stx2, eaeA, enterohemorrhagic E coli hlyA, rfb0111, and rfbo157 J Clinical Microbiol 36(2):598-602 41 Paton J C and Paton A W., 199 8b Phathogenesis ... khơng chun biệt nhìn thấy chạy multiplex < /b> – PCR < /b> Điều cặp primer mang lại sản phẩm khơng chun biệt phản ứng < /b> multiplex < /b> - Kết < /b> hợp vài tất phương pháp - Giảm thời gian ủ b t cặp - Giảm nhiệt độ kéo dài...
... phân b tiêu chảy, mẫu b mặt thịt b , tổng kết < /b> kếtphát < /b> gen < /b> độc < /b> lực E coli mẫu khảo sát trình b y b ng 4.7 biểu đồ 4.1 B ng 4.7 Tổng kết < /b> kếtphát < /b> gen < /b> độc < /b> lực E coli mẫu khảo sát Mẫu N n Phân b ... Chưa phát < /b> gen < /b> sta E coli phân lập từ 27 mẫu phân tiêu chảy b , b heo 5.2 Đề nghị (1) Có thể ứng < /b> dụng < /b> kỹ < /b> thuật < /b> multiplex < /b> – PCR < /b> để < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực dòng E coli gây b nh, góp phần chẩn đoán b nh ... MAC cho kết < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực giống Điều chứng tỏ khác biệt khả phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực loại khuẩn lạc (Hồng MAC hồng SMAC) 49 * Tổng kết < /b> việc phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực E coli từ mẫu phân tiêu chảy trên, ta...
... multiplex < /b> – PCR < /b> phát < /b> gen < /b> gây độc < /b> Kết < /b> trình b y b ng 4.4 Kết < /b> b ng 4.4 cho thấy (1) khuẩn lạc riêng lẻ màu hồng MAC lấy ngẫu nhiên, multiplex < /b> – PCR < /b> phát < /b> 1/4 số khuẩn lạc mang gen < /b> stb (25%) (2) ... coli mang gen < /b> độc < /b> lực, đó: - mẫu (66,67%) phát < /b> gen < /b> stb, chiếm tỉ lệ phát < /b> cao - mẫu (55,56%) phát < /b> gen < /b> lt - mẫu (33,33%) phát < /b> gen < /b> vt2e - mẫu (22,22%) phát < /b> gen < /b> hly - mẫu (11,11%) phát < /b> gen < /b> stx1 - ... riêng lẻ để < /b> xác định gen < /b> độc < /b> lực, kết < /b> trình b y b ng 4.2 B ng 4.2 Kết < /b> phát < /b> gen < /b> stx1, stx2, eae, hly số khuẩn lạc E coli riêng lẻ phân lập từ phân b tiêu chảy Mẫu Loại khuẩn lạc Gen < /b> độc < /b> lực stx2...
... coli thực phản ứng < /b> multiplex < /b> – PCR < /b> với máy luân nhiệt (thermal cycler): Multiplex < /b> – PCR1< /b> : Phát < /b> gen < /b> eae, hly, stx1, stx2 Multiplex < /b> – PCR2< /b> : Phát < /b> gen < /b> stx2e, sta, stb, lt-I - Trong trình thực ... ống NA Multiplex-< /b> PCR < /b> Sơ đồ 3.1 Phân lập, xác định E coli phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực 34 3.3.3 Xác định gen < /b> stx1, stx2, eae, hly, stx2e, sta, stb, lt-I E coli phân lập multiplex < /b> - PCR < /b> - Việc phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực ... Thực phản ứng < /b> multiplex < /b> – PCR < /b> để < /b> phát < /b> gen < /b> gây độc < /b> E coli 3.3 Phương pháp nghiên cứu 3.3.1 Lấy mẫu - Mẫu phân tiêu chảy Được lấy từ trực < /b> tràng tăm cho vào môi trường vận chuyển Carry Blair B o quản...
... Thụ thể STb chưa biết rõ gần người ta cho độc < /b> tố < /b> kết < /b> hợp khơng đặc hiệu với màng tế b o chất trước vào b n tế b o Khơng gây tiết Cl- STb kích thích tế b o ruột tiết bicarbonat (HCO3-) STb khơng ... sử dụng < /b> nhiều cặp primer phản ứng < /b> Multiplex < /b> – PCR < /b> mơ tả Chamberlain năm 1988 kể từ multiplex < /b> – PCR < /b> ứng < /b> dụng < /b> nhiều lĩnh vực kiểm tra DNA (Protocol online) 2.2.2 Các giai đoạn phản ứng < /b> PCR < /b> Phản ứng < /b> ... immunosorbent assay (ELISA), DNA-probe, PCR< /b> 2.2 Kỹ < /b> thuật < /b> PCR < /b> 2.2.1 Ngun tắc 23 PCR < /b> (polymerase chain reaction - phản ứng < /b> tổng hợp dây chuyền nhờ polymerase) Kary Mullis cộng phát < /b> minh năm 1985 PCR < /b> kỹ...
... tài: Ứngdụng < /b> kỹ < /b> thuật < /b> multiplex < /b> – PCR < /b> để < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực vi khuẩn Escherichia coli phân lập từ phân b , phân heo tiêu chảy thịt b ” 1.2 Mục tiêu - Phát < /b> sốgen < /b> độc < /b> lực E coli kỹ < /b> thuật < /b> multiplex < /b> ... SÁCH CÁC B NG B NG TRANG B ng 3.1 Số lượng mẫu 20 B ng 4.1 Kết < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực nhóm khuẩn lạc đại diện cho E coli phân b tiêu chảy 29 B ng 4.2 Kết < /b> phát < /b> gen < /b> stx1, stx2, eae, hly số khuẩn ... 35 B ng 4.5 Kết < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực nhóm khuẩn lạc đại diện cho E coli phân b tiêu chảy 36 B ng 4.6 Kết < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực nhóm khuẩn lạc đại diện cho E coli mẫu b mặt thịt b 38 B ng 4.7...
... Kết < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực E coli phân lập từ phân b tiêu chảy 28 4.3 Kết < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực E coli phân lập từ phân heo tiêu chảy 32 4.4 Kết < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực E coli phân lập từ phân b ... Những ứng < /b> dụng < /b> PCR < /b> 15 2.2.5.1 PCR < /b> sử dụng < /b> để < /b> nghiên cứu lượng DNA nhỏ 15 2.2.5.2 PCR < /b> sử dụng < /b> chẩn đoán lâm sàng 16 2.2.5.3 PCR < /b> dùngđể < /b> khuếch đại RNA .16 2.2.5.4 PCR < /b> sử dụng < /b> để < /b> ... thời gian thực tập Chân thành cảm ơn Đoàn Thị Tuyết Lê TÓM TẮT ĐOÀN THỊ TUYẾT LÊ, Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh, Tháng 8/2005 ỨNGDỤNGKỸTHUẬTMULTIPLEX < /b> – PCR < /b> ĐỂPHÁTHIỆN CÁC GEN < /b> ĐỘC LỰC CỦA...
... tài: Ứngdụng < /b> kỹ < /b> thuật < /b> multiplex < /b> – PCR < /b> để < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực vi khuẩn Escherichia coli phân lập từ phân b , phân heo tiêu chảy thịt b ” 1.2 Mục tiêu - Phát < /b> sốgen < /b> độc < /b> lực E coli kỹ < /b> thuật < /b> multiplex < /b> ... DNA chạy multiplex < /b> – PCR < /b> phát < /b> gen < /b> gây độc < /b> Kết < /b> trình b y b ng 4.4 Kết < /b> b ng 4.4 cho thấy (1) khuẩn lạc riêng lẻ màu hồng MAC lấy ngẫu nhiên, multiplex < /b> – PCR < /b> phát < /b> 1/4 số khuẩn lạc mang gen < /b> stb (25%) ... (stb) 4HM (stb) 4HS (stb) 4TS (lt, stb) 6TS (lt, stb) 6HS (stb, vt2e, lt) 5HS (lt, stb, vt2e) 8HM (lt, stb) chọn 47 4.4 Kết < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực E coli phân lập từ phân b tiêu chảy B ng 4.5 Kết < /b> phát...
... Chưa phát < /b> gen < /b> sta E coli phân lập từ 27 mẫu phân tiêu chảy b , b heo 5.2 Đề nghị (1) Có thể ứng < /b> dụng < /b> kỹ < /b> thuật < /b> multiplex < /b> – PCR < /b> để < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực dòng E coli gây b nh, góp phần chẩn đốn b nh ... cycler): Multiplex < /b> – PCR1< /b> : Phát < /b> gen < /b> eae, hly, stx1, stx2 Multiplex < /b> – PCR2< /b> : Phát < /b> gen < /b> stx2e, sta, stb, lt-I - Trong q trình thực phản ứng < /b> multiplex < /b> – PCR,< /b> mẫu đối chứng dương (EDL933 H44) thực đồng ... BSTY B i Thị Thu Trang, chúng tơi thựcđề tài: Ứngdụng < /b> kỹ < /b> thuật < /b> multiplex < /b> – PCR < /b> để < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực vi khuẩn Escherichia coli phân lập từ phân b , phân heo tiêu chảy thịt b ” 1.2 Mục tiêu - Phát...
... 4.2.2 Kt qu RT - PCR < /b> theo quy trỡnh dựng Taq ABGENE trờn cỏc mu ly trớch t dch nuụi cy t bo c ly trớch theo b kit C 23 24 25 34 43 24 400 bp 400 bp Hỡnh 4.4: Sn phm RT -PCR < /b> dựng Taq ABgene trờn mu ... thay i Taq Beat Hot start bng Taq polymerase ca cụng ty BioRad v ca cụng ty ABgene (qui trỡnh ó c mụ t b n trờn) Kt qu ca th nghim ny c th hin hỡnh 4.2 Lad 500bp 400bp Hỡnh 4.2: Sn phm RT -PCR < /b> trờn ... 4.1.2 RT -PCR < /b> vi Taq polymerase ca Biorad v ABgene Ngoi th nghim kh nng ca mt s loi Taq khỏc k thut RTPCR mt bc phỏt hin virus gõy bnh PRRS, chỳng tụi ó thc hin quy trỡnh RT -PCR < /b> mụt bc ging nh...