NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC LOÀI SAO BIỂN ASTERINA BATHERI Goto, 1914 VÀ ASTROPECTEN POLYACANTHUS.TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN HĨA SINH BIỂN TRẦN THỊ HỒNG HẠNH NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC LỒI SAO BIỂN ASTERINA BATHERI Goto, 1914 VÀ ASTROPECTEN POLYACANTHUS Müller & Troschel, 1842 Chuyên ngành: Hóa Hữu Mã số : 62.44.01.14 TĨM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC Hà Nội - 2015 Cơng trình hồn thành tại: Viện Hóa sinh biển Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Người hướng dẫn khoa học: GS VS Châu Văn Minh TS Nguyễn Hồi Nam Viện Hóa sinh biển Phản biện 1: Phản biện 2: Phản biện 3: Luận án bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án cấp Viện họp tại: Viện Hóa sinh biển – Viện Hàn lâm Khoa học Cơng nghệ Việt Nam - Số 18 Hồng Quốc Việt – Cầu Giấy – Hà Nội vào hồi ngày tháng năm Có thể tìm hiểu Luận án thư viện……… I GIỚI THIỆU LUẬN ÁN Đặt vấn đề Trái đất hành tinh đại dương Với 70% diện tích bề mặt trái đất bao phủ nước mặn đại dương nơi chiếm đến 90% thể tích khu vực sinh sống trái đất hầu hết hoạt động sống có liên quan đến sống biển Vì khơng có đáng ngạc nhiên nói mơi trường biển nơi ẩn chứa đa dạng sinh học loài lớn Từ đầu năm 90 kỷ trước, nhà khoa học biển có mối quan tâm khám phá nguồn tài ngun sinh vật vơ phong phú đáy đại dương Tuy nhiên nghiên cứu thời điểm thường khơng đầy đủ, tản mát thiếu tính hệ thống Từ dẫn tới hàng loạt tranh cãi nhà khoa học, số lồi tính nhiều lần, chí hàng chục lần, khiến số thống kê trở nên khơng xác Những câu hỏi đa dạng loài, nơi sinh vật biển sinh sống mối quan hệ phức tạp loài sinh vật biển đưa đến yêu cầu mới, cấp thiết nghiên cứu cách có hệ thống tồn cầu Việt Nam nằm ven bờ biển Đông với 3260km chiều dài bờ biển chạy dọc từ Bắc tới Nam với hàng nghìn hịn đảo lớn nhỏ ven biển Điều kiện địa lý đem lại nhiều thuận lợi, tiềm nguồn tài nguyên thiên nhiên phong phú cho đất nước, tạo nên hệ sinh vật biển vô phong phú, dồi trữ lượng thành phần loài Ở Việt Nam, khoảng 30 năm trở lại đây, nguồ n tài nguyên phong phú này bắt đầu thu hút đươ ̣c sự quan tâm của các nhà khoa học Trong số các loài đô ̣ng thực vâ ̣t biể n đươ ̣c nghiên cứu , nhiề u hơ ̣p chấ t phân lập thể hoa ̣t tin h sinh ho cao đáng quý hoạt tính gây độc ̣c ́ tế bào, hoạt tính ức chế dịng tế bào ung thư thử nghiệm, hoạt tính chống oxy hóa, kháng viêm, kháng khuẩn Sao biển lồi sinh vật biển phổ biến vùng biển Việt nam Từ lâu biển nhân dân ta sử dụng loại thực phẩm bổ dưỡng giúp tăng cường sức khỏe Tuy nhiên nghiên cứu khoa học gần rằng, tác dụng làm thực phẩm bổ dưỡng, sản phẩm từ biển cịn có tác dụng ngăn ngừa điều trị bệnh Ở Việt nam, nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học lồi biển cịn hạn chế để sử dụng tối đa nguồn tài nguyên phong phú cần có nghiên cứu sâu để làm sở khoa học cho ứng dụng thực tiễn Điều định hướng cho tác giả lựa chọn nội dung nghiên cứu luận án: “Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học lồi biển Asterina batheri Goto, 1914 Astropecten polyacanthus Müller & Troschel, 1842” Đối tƣợng nghiên cứu nội dung luận án Đối tượng nghiên cứu luận án 02 loài biển Asterina batheri Astropecten polyacanthus Nội dung luận án là: Nghiên cứu phân lập hợp chất từ hai loài biển Việt nam: Asterina batheri Astropecten polyacanthus Xác định cấu trúc hợp chất phân lập Đánh giá hoạt tính sinh học hợp chất phân lập nhằm định hướng cho nghiên cứu ứng dụng Những đóng góp luận án 3.1 Lần phân lập hợp chất từ hai loài biển nghiên cứu Các hợp chất là: Astebatherioside A (AB1), Astebatherioside B (AB2), Astebatherioside C (AB3), Astebatherioside D (AB4), Astropectenol A (ASP1), Astropectenol B (ASP2), Astropectenol C (ASP3), Astropectenol D (ASP4) 3.2 Lần kết thử hoạt tính gây độc tế bào in vitro dịch chiết diclometan 07 hợp chất phân lập từ loài A polyacanthus đã phát hiê ̣n dịch chiết diclometan số hợp chất thể hoạt tính ức chế dòng tế bào ung thư với giá trị IC50 từ 2,7  82,95 M Trong hợp chất ASP7 dịch chiết phân đoạn diclometan thể hoạt tính ức chế mạnh dòng tế bào ung thư máu HL-60 3.3 Lần chế gây chết tế bào ung thư HL-60 cấp độ protein hợp chất ASP7 dịch chiết phân đoạn diclometan nghiên cứu Kết hợp chất ASP7 dịch chiết phân đoạn diclometan kích thích q trình tế bào chết theo chương trình (appotosis) 3.4 Lần đánh giá hoạt tính kháng viêm thơng qua việc ức chế sản sinh yếu tố tiền gây viêm IL-12, IL-6 TNF-α tế bào tua (đuôi gai) BMDC 12 hợp chất phân lập từ loài biển Kết cho thấy hợp chất phân lập từ lồi A polyacanthus thể hoạt tính ức chế ba yếu tố tiền gây viêm với giá trị IC50 từ 1,82  34,86 M hợp chất ASP1, ASP5 ASP7 thể hoạt tính mạnh Bố cục luận án Luận án gồm 115 trang với 18 bảng số liệu, 98 hình, 95 tài liệu tham khảo Bố cục luận án: Mở đầu (2 trang), Chương 1: Tổng quan tài liệu (28 trang), Chương 2: Đối tượng phương pháp nghiên cứu (6 trang), Chương 3: Thực nghiệm (7 trang), Chương 4: Kết thảo luận (61 trang), Kết luận Kiến nghị (3 trang), Các công trình cơng bố (1 trang), Tài liệu tham khảo (7 trang) Phụ lục phổ II NỘI DUNG LUẬN ÁN ĐẶT VẤN ĐỀ: Phần đặt vấn đề đề cập đến ý nghĩa khoa học, tính thực tiễn, đối tượng, mục tiêu nhiệm vụ nghiên cứu luận án CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU Phần tổng quan tài liệu tập hợp nghiên cứu nước quốc tế vấn đề: 1.1 Giới thiệu chung lớp biển (Asteroidea) 1.2 Tình nghiên cứu lồi biển giới 1.3 Tình nghiên cứu loài biển Việt Nam CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu Hai loài biển A batheri A polyacanthus thu thập Cát Bà, Hải Phòng, Việt Nam A batheri A polyacanthus 2.2 Phƣơng pháp phân lập hợp chất Phối hợp phương pháp sắc ký bao gồm: sắc ký lớp mỏng (TLC), sắc ký lớp mỏng điều chế sắc ký cột (CC), sắc ký lỏng trung áp (MPLC) cao áp (HPLC) 2.3 Phƣơng pháp xác định cấu trúc hoá học hợp chất Phương pháp chung để xác định cấu trúc hóa học hợp chất kết hợp thông số vật lý với phương pháp phổ đại bao gồm: phổ khối (ESI-MS) phổ khối phân giải cao (FT-ICR-MS), độ quay cực ([]D), phổ cộng hưởng từ nhân (1D, 2D-NMR) 2.4 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào in vitro Hoạt tính gây độc tế bào hoạt chất xác đ ịnh theo phương pháp MTT 2.5 Đánh giá hoạt tính kháng viêm Hoạt tính kháng viêm hợp chất đánh giá dựa khả ức chế sản xuất yếu tố tiền gây viêm IL-12, IL-6 TNF-α tế bào gai BMDC kích thích LPS CHƢƠNG THỰC NGHIỆM 3.1 Phân lập hợp chất Phần trình bày cụ thể cách thức phân lập hợp từ 02 mẫu biển A batheri A polyacanthus Việc phân tách chất nêu tóm tắt sơ đồ hình 3.1, 3.2, 3.3 Hình 3.1 Sơ đồ phân lập hợp chất từ lồi biển A batheri Hình 3.2 Sơ đồ phân lập hợp chất từ phân đoạn C1, C2 lồi biển A polyacanthus Hình 3.3 Sơ đồ phân lập hợp chất từ phân đoạn C3, C4 loài biển A.polyacanthus 3.2 Hằng số vật lý kiện phổ hợp chất 3.2.1 Hợp chất AB1: Astebatherioside A (chất mới) Chất bột màu trắng, [α]D25 + 5,0 (c, 0,25, MeOH); Phổ khối lượng phân giải cao FT-ICR-MS m/z 842,32887 [M + H]+ (tính tốn lý thuyết cho công thức C35H56O22N, 842,32940) H-NMR 13C-NMR (xem bảng 4.2.2 phần luận giải) 3.2.2 Hợp chất AB2: Astebatherioside B (chất mới) Chất bột màu trắng, [α]D25  2,3 (c, 0,25, MeOH); Phổ khối lượng phân giải cao FT-ICR-MS m/z 850,29569 [M + Na]+ (tính tốn lý thuyết cho công thức C34H53NO22Na, 850,29570) H-NMR (DMSO-d6, 500 MHz) H (ppm) Aglycon: 5,91 (br s, H-4), 6,85 (br s, H-5), 2,34 (s, H-2′), 11,15 (s, NH), Sugar: Qui I: 4,99 (d, J = 6,5 Hz, H-1′ʹ), 3,67 (H-2′′), 3,68 (H-3′′), 3,20 (H-4′′), 3,64 (H-5′′), 1,28 (d, J = 6,0 Hz, H-6′′) Qui II: 4,61 (d, J = 8,0 Hz, H-1′ʹ′), 2.96 (dd, J = 8,0, 9,0 Hz, H-2′ʹ′), 3,11 (H-3′ʹ′), 2,75 (t, J = 9,0 Hz, H-4′ʹ′), 3,10 (H-5′ʹ′), 1,05 (d, J = 6,0 Hz, H-6′ʹ′) Ara(p): 4,57 (d, J = 4,0 Hz, H-1′ʹ′′), 3,64 (H-2′ʹ′′), 3,66 (H-3′ʹ′′), 3,72 (br s, H-4′ʹ′′), 3,42 (dd, J = 4,0, 12,0 Hz, H-5′ʹ′′) Fuc: 4,31 (d, J = 6,5 Hz, H-1′ʹ′′′), 3,41 (H-2′ʹ′′′), 3,42 (H3′ʹ′′′), 3,55 (br s, H-4′ʹ′′′), 3,58 (H-5′ʹ′′′), 1,12 (d, J = 6,0 Hz, H-6′ʹ′′′) Ara(f): 5,03 (br s, H-1′ʹ′′′′), 3,90 (br s, H-2′ʹ′′′′), 3,65 (H-3′ʹ′′′′), 3,85 (H-4′ʹ′′′′), 3,44 3,51 (H5′ʹ′′′′) 13 C-NMR (DMSO-d6, 125 MHz) C (ppm) Aglycon: 118,1 (C-2), 150,3 (C-3), 97,1 (C-4), 123,1 (C-5), 185,2 (C-1), 27,7 (C-2).Sugar: Qui I: 99,3 (C-1), 80,0 (C-2), 74,5 (C-3), 82,5 (C-4), 70,5 (C-5), 17,7 (C-6′′) Qui II: 103,2 (C-1), 74,6 (C-2), 76,1 (C-3), 75,2 (C-4), 71,7 (C-5), 17,6 (C-6) Ara(p): 100,5 (C-1), 79,4 (C-2), 71,0 (C-3), 65,8 (C-4), 63,3 (C-5) Fuc: 104,7 (C1), 70,2 (C-2), 79,3 (C-3), 70,6 (C-4), 69,9 (C-5), 16,3 (C-6) Ara(f): 109,0 (C-1), 81,3 (C-2), 77,6 (C-3), 85,0 (C-4), 61,6 (C5) 3.2.3 Hợp chất AB3: Astebatherioside C (chất mới) Chất bột màu trắng, [α]D25 + 18,9 (c, 0,25, MeOH); Phổ khối lượng phân giải cao FT-ICR-MS m/z 418.17310 [M + H]+ (tính tốn lý thuyết cho công thức C18H28NO10, 418,17132) H-NMR (DMSO-d6, 500 MHz) H (ppm) Aglycon: 5,92 (t, J = 3,0 Hz, H-4), 6,85 (t, J = 3,0 Hz, H-5), 2,32 (s, H-2′), 11,14 (s, NH), Sugar: Qui I: 4,96 (d, J = 7,5 Hz, H-1′ʹ), 3,55 (dd, J = 7,5, 9,0 Hz, H-2′′), 3,50 (H-3′′), 2,98 (H-4′′), 3,49 (H5′′), 1,17 (d, J = 6,5 Hz, H-6′′) Qui II: 4,52 (d, J = 8,0 Hz, H-1′ʹ′), 3,00 (H-2′ʹ′), 3,08 (H-3′ʹ′), 2,75 (t, J = 9,0 Hz, H-4′ʹ′), 3,07 (H-5′ʹ′), 0,99 (d, J = 6,5 Hz, H-6′ʹ′) 13 C-NMR (DMSO-d6, 125 MHz) C (ppm) Aglycon: 118,1 (C-2), 150,6 (C-3), 97,1 (C-4), 123,4 (C-5), 185,3 (C-1), 27,8 (C-2) Sugar: Qui I: 99,5 (C-1), 81,5 (C-2), 76,3 (C-3), 74,6 (C-4), 71,7 (C-5), 17,7 (C-6′′) Qui II: 103,8 (C-1), 74,8 (C-2), 76,1 (C-3), 75,2 (C-4), 71,9 (C-5), 17,7 (C-6) 3.2.4 Hợp chất AB4: Astebatherioside D (chất mới) Chất bột màu trắng, [α]D25  1.0 (c, 0.25, MeOH); Phổ khối lượng phân giải cao FT-ICR-MS m/z 733,25355 [M + Na]+ (tính tốn lý thuyết cho cơng thức C30H46O19Na, 733,25310) H-NMR (DMSO-d6, 500 MHz) H (ppm) Aglycon: 6,71 (d, J = 2,0 Hz, H-4), 7,82 (d, J = 2,0 Hz, H-5), 2,34 (s, H-2′) Sugar: Qui I: 5,18 (d, J = 7,5 Hz, H-1′ʹ), 3,73 (H-2′′), 3,69 (H-3′′), 3,21 (t, J = 9,0 Hz, H-4′′), 3,72 (H-5′′), 1,34 (d, J = 6,5 Hz, H-6′′) Qui II: 4,58 (d, J = 8,0 Hz, H-1′ʹ′), 2.95 (dd, J = 8,0, 8,5 Hz, H-2′ʹ′), 3,10 (H-3′ʹ′), 2,75 (t, J = 8,5 Hz, H-4′ʹ′), 3,08 (H-5′ʹ′), 1,01 (d, J = 6,5 Hz, H-6′ʹ′) Fuc I: 4,42 (d, J = 7,0 Hz, H-1′ʹ′′), 3,56 (H-2′ʹ′′), 3,55 (H-3′ʹ′′), 3,48 (br s, H-4′ʹ′′), 3,70 (dd, J = 4,0, 12,0 Hz, H-5′ʹ′′), 1,15 (d, J = 6,0 Hz, H-6′′′′) Fuc II: 4,31 (d, J = 7,5 Hz, H-1′ʹ′′′), 3,32 (H-2′ʹ′′′), 3,32 (H-3′ʹ′′′), 3,40 (br s, H-4′ʹ′′′), 3,55 (H-5′ʹ′′′), 1,13 (d, J = 6,0 Hz, H-6′ʹ′′′) 13 C-NMR (DMSO-d6, 125 MHz) C (ppm) Aglycon: 136,9(C-2), 152,2 (C-3), 104,3 (C-4), 147,0 (C-5), 183,2 (C-1), 27,3 (C-2).Sugar: Qui I: 99,3 (C-1), 79,6 (C-2), 74,2 (C-3), 84,6 (C-4), 70,5 (C-5), 17,7 (C-6′′) Qui II: 103,0 (C1), 74,0 (C-2), 76,1 (C-3), 75,2 (C-4), 71,6 (C-5), 17,6 (C-6) Fuc I: 101,3 (C-1), 73,4 (C-2), 80,4 (C-3), 70,2 (C-4), 70,3 (C-5), 16,2 (C6′′′′) Fuc II: 105,2 (C-1), 71,9 (C-2), 73,2 (C-3), 70,9 (C-4), 70,3 (C5), 16,4 (C-6) 3.2.5 Hợp chất AB5: 3-[O- -D-fucopyranosyl-(13)- -D-fucopyranosyl(14)-[ -D-quinovopyranosyl-(12)]- -D-quinovopyranosyl]-2-acetylpyrrole Chất bột màu trắng, [α]D25 + (c, 0.25, MeOH); H-NMR (DMSO-d6, 500 MHz) H (ppm) Aglycon: 5,90 (br s, H-4), 6,85 (br s, H-5), 2,34 (s, H-2′), 11,15 (s, NH) Sugar: Qui I: 4,99 (d, J = 6,5 Hz, H-1′ʹ), 3,70 (H-2′′), 3,71 (H-3′′), 3,20 (t, J = 9,0 Hz, H-4′′), 3,65 (H-5′′), 1,33 (d, J = 5,5 Hz, H-6′′) Qui II: 4,61 (d, J = 7,5 Hz, H-1′ʹ′), 2.95 (dd, J = 7,5, 9,0 Hz, H-2′ʹ′), 3,11 (H-3′ʹ′), 2,75 (t, J = 9,0 Hz, H-4′ʹ′), 3,10 (H-5′ʹ′), 1,05 (d, J = 5,5 Hz, H-6′ʹ′) Fuc I: 4,42 (d, J = 7,0 Hz, H-1′ʹ′′), 3,57 (H-2′ʹ′′), 3,56 (H-3′ʹ′′), 3,48 (br s, H-4′ʹ′′), 3,70 (dd, J = 4,0, 12,0 Hz, H-5′ʹ′′), 1,15 (d, J = 6,5 Hz, H-6′′′′) Fuc II: 4,31 (d, J = 7,5 Hz, H-1′ʹ′′′), 3,34 (H-2′ʹ′′′), 3,33 (H-3′ʹ′′′), 3,39 (br s, H-4′ʹ′′′), 3,53 (H-5′ʹ′′′), 1,13 (d, J = 6,5 Hz, H-6′ʹ′′′) 13 C-NMR (DMSO-d6, 125 MHz) C (ppm) Aglycon: 118,2 (C-2), 150,3 (C-3), 97,1 (C-4), 123,2 (C-5), 185,2 (C-1), 27,7 (C-2) Sugar: Qui I: 99,3 (C-1), 79,7 (C-2), 78,9 (C-3), 84,8 (C-4), 70,3 (C-5), 17,7 (C-6′′) Qui II: 102,9 (C-1), 74,6 (C-2), 76,1 (C-3), 75,2 (C-4), 71,6 (C-5), 17,6 (C-6) Fuc I: 101,3 (C-1), 73,4 (C-2), 80,5 (C-3), 70,3 (C-4), 70,3 (C-5), 16,2 (C-6′′′′) Fuc II: 105,3 (C-1), 71,9 (C-2), 73,2 (C-3), 70,9 (C-4), 70,3 (C-5), 16,4 (C-6) 3.2.6 Hợp chất ASP1: Astropectenol A (chất mới) Chất bột màu trắng; [α]D25 + 2,6 (c, 0,25, MeOH); FT-ICR-MS m/z 441,33458 [M+Na]+ (tính tốn lý thuyết cho cơng thức C27H46O3Na, 441,33447); H-NMR 13C-NMR (xem bảng 4.2.3 phần luận giải) 3.2.7 Hợp chất ASP2: Astropectenol B (chất mới) Chất bột màu trắng; [α]D25 3,4 (c, 0,25, MeOH); FT-ICR-MS m/z 455,31369 [M+Na]+ (tính tốn lý thuyết cho cơng thức C27H44O4Na, 455,31373); H-NMR (DMSO-d6, 500 MHz) H (ppm): 1,05 (m, Ha-1)/1,60 (m, Hb-1), 1,18 (m, Ha-2)/1,65 (m, Hb-2), 3,37 (m, H-3), 1,17 (m, Ha-4)/1,53 (m, Hb-4), 1,32 (m, H-5), 1,15 (m, Ha-6)/1,44 (m, Hb-6), 4,35 (dd, J = 5,5, 11,0 Hz, H-7), 1,62 (m, H9), 1,22 (m, Ha-11)/1,57 (m, Hb-11), 1,06 (m, Ha-12)/1,82 (m, Hb-12), 1,60 (m, Ha16)/1,85 (m, Hb-16), 1,17 (m, H-17), 1,04 (s, H-18), 0,65 (s, H-19), 1,44 (m, H20), 0,87 (d, J = 6,5 Hz, H-21), 0,95 (m, Ha-22)/1,25 (m, Hb-22), 1,14 (m, Ha23)/1,25 (m, Hb-23), 1,10 (m, H-24), 1,50 (m, H-25), 0,84 (d, J = 6,5 Hz, H-26), 0,82 (d, J = 6,5 Hz, Hb-27), 4,54 (s, 3-OH), 6,35 (15-OH) 13 C-NMR (DMSO-d6, 125 MHz) C (ppm): 36,0 (C-1), 31,1 (C-2), 69,0 (C-3), 37,7 (C-4), 40,0 (C-5), 30,9 (C-6), 76,0 (C-7), 126,3 (C-8), 45,2 (C-9), 36,6 (C10), 19,3 (C-11), 38,2 (C-12), 42,0 (C-13), 139,3 (C-14), 101,6 (C-15), 40,2 (C16), 55,6 (C-17), 17,8 (C-18), 12,5 (C-19), 34,7 (C-20), 18,4 (C-21), 34,9 (C-22), 23,0 (C-23), 38,8 (C-24), 27,3 (C-25), 22,3 (C-26), 22,6 (C-27) 3.2.8 Hợp chất ASP3: Astropectenol C (chất mới) Chất bột màu trắng, [α]D25 + 4,2 (c, 0,25, MeOH); 12 Các hợp chất phân lập từ loài biển A batheri AB1: Astebatherioside A (chất mới) AB2: Astebatherioside B (chất mới) AB3: Astebatherioside C (chất mới) AB4: Astebatherioside D (chất mới) AB5: 3-[O--D-fucopyranosyl-(13)--D-fucopyranosyl-(14)-[-Dquinovopyranosyl-(12)]--D-quinovopyranosyl]-2-acetyl-pyrrole Các hợp chất phân lập từ loài biển A polyacanthus ASP1: Astropectenol A (chất mới) ASP2: Astropectenol B (chất mới) ASP3: Astroptectenol C (chất mới) ASP4: Astroptectenol D (chất mới) 13 ASP5: 5α-cholest-7-ene-3β,6α-diol ASP6: -cholest-8(14)-ene-3β,7α-diol ASP7: 5α-cholest-7,9(11)-diene-3β-ol 5α * Dưới trình bày chi tiết phương pháp xác định cấu trúc hợp chất  Hợp chất AB1 (Astebatherioside A) Hợp chất AB1 phân lập dạng chất bột màu trắng Cơng thức phân tử xác định C35H55O22N sở xuất píc ion phân tử m/z 842,32887 [M + H]+ (tính tốn lý thuyết cho công thức C35H56O22N, 842,32940) phổ khối lượng phân giải cao FT-ICR-MS Trên phổ 1H NMR xuất tín hiệu đặc trưng nhóm acetoxyl metyl [H 2,34 (3H, s, H2)], proton amin [H 11,15 (1H, s, NH)] hai proton olefinic [H 5,90 (H-4) 6,85 (H-5); tín hiệu 1H, br s] gợi ý cho có mặt aglycon dạng khung pyrrole có chứa nhóm acetyl Nhận định chứng minh xuất tín hiệu cacbon C 118,2 (C, C-2), 150,3 (C, C-3), 97,2 (CH, C4), 123,2 (CH, C-5), 185,2 (C, C-1), 27,7 (CH3, C-2) (Zhang et al., 2006) phân tích chi tiết tương tác phổ COSY HMBC (hình 4.2.2, 4.2.7 4.2.8) Hình 4.2.1: Cấu trúc hóa học AB1 Hình 4.2.2: Một số tương tác COSY MHBC AB1 14 Hình 4.2.4: Phổ 1H NMR hợp chất AB1 Hình 4.2.3: Phổ khối lượng phân giải cao hợp chất AB1 Hình 4.2.5: Phổ 13C NMR hợp chất AB1 Hình 4.2.6: Phổ HSQC hợp chất AB1 Hình 4.2.7: Phổ HMBC hợp chất AB1 Hình 4.2.8: Phổ COSY hợp chất AB1 Ngồi ra, năm tín hiệu cacbon anome xuất C 99,3 (C-1), 102,9 (C1), 101,3 (C-1), 105,1 (C-1) 109,0 (C-1), có tương tác với proton nome tương ứng H 4,98 (1H, d, J = 7,0 Hz, H-1), 4,61 (1H, d, J = 7,5 Hz, H-1), 4,41 (1H, d, J = 6,5 Hz, H-1), 4,38 (1H, d, J = 6,5 Hz, H-1) 5,02 (1H, br s, H-1) phổ HSQC, khẳng định cho có mặt đơn vị đường Trên phổ 1H NMR, bốn tín hiệu metyl gắn với CH (mỗi tín hiệu d, J = 6,0 Hz ) xuất H 1,33 (3H, H-6), 1,05 (3H, H-6), 1,14 (6H, H-6 H6) gợi ý cho xuất đơn vị đường quinovose và/hoặc fucose Số liệu phổ 1H 13C NMR hoàn toàn tương tự số liệu 3-[O--Dfucopyranosyl-(13)--D-fucopyranosyl-(14)-[-D-quinovopyranosyl(12)]--D-quinovopyranosyl]-2-acetyl-pyrrole (Zhang et al., 2006) ngoại trừ việc xuất thêm tín hiệu phân tử đường Số liệu phổ 13C NMR đơn vị đường xuất thêm C 109,0 (CH, C-1), 81,3 (CH, C-2), 77,5 15 (CH, C-3), 85,2 (CH, C-4) 61,7 (CH2, C-5) giá trị số tương tác nhỏ (J ~ Hz) proton anome H-1 H 5,02 chứng minh có mặt đơn vị arabinofuranosyl liên kết đường có cấu hình α (Iorizzi et al., 1995b) Phân tích chi tiết tương tác phổ 1H–1H COSY cho phép gán toàn giá trị proton đơn vị đường Kết với tương tác HMBC H-1 (H 4,98) C-3 (C 150,3), H-1 (H 4,61) C-2 (C 78,9), H1 (H 4,41) C-4 (C 84,9) H-1 (H 4,38) C-3 (C 80,3) chứng minh hai đường quinovose hai đường fucose có vị trí liên kết chuỗi đường giống với hợp chất 3-[O--D-fucopyranosyl-(13)--Dfucopyranosyl-(14)-[-D-quinovopyranosyl-(12)]--D-quinovopyranosyl]-2acetyl-pyrrole (Zhang et al., 2006) Tín hiệu cacbon C-3 AB1 C 79,2 bị dịch chuyển mạnh phía vùng trường thấp so với 3-[O--D-fucopyranosyl(13)--D-fucopyranosyl-(14)-[-D-quinovopyranosyl-(12)]--Dquinovopyranosyl]-2-acetyl-pyrrole (Zhang et al., 2006) C 73,1 (C-3) gợi ý cho vị trí liên kết đơn vị đường arabinofuranose cacbon (De Marino et al., 2003) Dự đoán khẳng định tương tác HMBC H-1 (H 5,02) C-3 (C 79,2) Như vậy, cấu trúc hóa học AB1 xác định 3[O--L-arabinofuranosyl-(13)--D-fucopyranosyl-(13)--D-fucopyranosyl(14)-[-D-quinovopyranosyl-(12)]--D-quinovopyranosyl]-2-acetyl-pyrrole Đây hợp chất pyrrole oligoglycosit đặt tên astebatherioside A Bảng 4.2.2 Số liệu phổ NMR hợp chất AB1 C Aglycon 1' 2' NH Qui I 1'' 2'' Hb,d, dạng píc (J = Hz) C Cb,c 118,0 150,3 97,1 123,1 185,2 27,9 118,2 150,3 97,2 123,2 185,2 27,7 5,90 br s 6,85 br s 2,34 s 11,15 s 99,3 74,6 99,3 78,9 4,98 d (7,0) 3,70 a HMBC (H  C) 2, 2, 3, 2, 1' 2, 3, 16 3'' 4'' 5'' 6'' Qui II 1''' 2''' 3''' 4''' 5''' 6''' Fuc I 1'''' 2'''' 3'''' 4'''' 5'''' 6'''' Fuc II 1''''' 2''''' 3''''' 4''''' 5''''' 6''''' Ara(f) 1'''''' 2'''''' 3'''''' 4'''''' 5'''''' 78,8 85,0 70,2 17,7 74,6 84,9 70,3 17,7 3,70 3,20 t (9,0) 3,65 1,33 d (6,0) 102,9 74,6 76,0 75,1 71,6 17,7 102,9 74,7 76,1 75,2 71,6 17,6 4,61 d (7,5) 2'' 2,95 dd (7,5, 9,0) 3,11 2,76 t (9,0) 3,10 1,05 d (6,0) 4''', 5''' 101,4 73,3 80,5 70,3 70,3 16,3 101,3 73,4 80,3 70,4 70,3 16,2 4,41 d (6,5) 3,56 3,56 3,65 3,70 1,14 d (6,0) 4'' 105,4 71,9 73,1 70,9 70,2 16,5 105,1 71,0 79,2 70,6 70,1 16,3 4,38 d (6,5) 3,43 3,43 3,48 3,56 1,14 d (6,0) 3'''' 109,0 81,3 77,5 85,2 61,7 5,02 br s 3''''' 3,91 br s 3,65 3,86 dd (5,0, 9,0) 3,43/3,51 4'', 5'' 4'''', 5'''' 4''''', 5''''' C of 3-[O--D-fucopyranosyl-(13)--D-fucopyranosyl-(14)-[-D-quinovopyranosyl-(12)]- -Dquinovopyranosyl]-2-acetyl-pyrrole(Zhang et al., 2006), bđo DMSO-d 6, c125 MHz, d500 MHz a  Hợp chất ASP1 Hợp chất ASP1 phân lập dạng chất bột màu trắng Công thức phân tử xác định C27H46O3, sở xuất pic ion phân tử m/z 441,33458 [M+Na]+ phổ khối lượng phân giải cao (Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrum: FT-ICR-MS) Các phổ 1H- 13C-NMR hợp chất đặc trưng cho hợp chất thuộc dạng khung steroid, lớp chất phổ biến cơng bố từ lồi biển Sự xuất nhóm 17 oxymetin nhóm aldehit xác định tương ứng tín hiệu proton cộng hưởng H 3,70 (1H, m, H-3) 9,81 (1H, d, J = 3,0 Hz, H-6) phổ 1HNMR đo CDCl3 Ngồi ra, hai nhóm metyl gắn với cacbon không mang hydro [H 0,84 (H-18) 0,73 (H-19), tín hiệu 3H, s] ba nhóm metyl gắn với CH [H 0,87 (H-21), 0,84 (H-26) 0,82 (H-27), tín hiệu 3H, d, J = 6,5 Hz] xác định phổ 1H-NMR gợi ý cho có mặt hợp chất sterol dạng khung cholestan Hình 4.2.10: Một số tương tác COSY Hình 4.2.9: Cấu trúc hóa học ASP1 MHBC ASP1 Hình 4.2.11: Phổ khối lượng phân giải cao Hình 4.2.12: Phổ H NMR hợp chất ASP1 hợp chất ASP1 Hình 4.2.14: Phổ HSQC hợp chất ASP1 Hình 4.2.13: Phổ 13C NMR hợp chất ASP1 Hình 4.2.15: Phổ HMBC hợp chất ASP1 Hình 4.2.16: Phổ COSY hợp chất ASP1 18 Hình 4.2.17: Phổ ROESY hợp chất ASP1 Hình 4.2.18 Các tương tác ROESY hợp chất ASP1 13 Trên phổ C-NMR (CDCl3) xuất 27 tín hiệu cacbon bao gồm nhóm oxymetin [C 71,8 (CH, C-3)], aldehyde [C 206,3 (CH, C-6)] cacbon bậc bốn mang ôxi [C 87,4 (C, C-8)] Tất số liệu phổ 13C-NMR gán với số liệu phổ 1H-NMR tương ứng sở phân tích phổ HSQC (Bảng 4.2.3) Số liệu phổ 1H 13C-NMR ASP1 tương tự số liệu tương ứng hợp chất 8-hydroxy-B-norconicasta-6α-aldehyde (Zhang et al., 2010) gợi ý cho vị trí nhóm aldehyde C-6 hai nhóm OH C-3 C-8 Để xác định xác cấu trúc hóa học ASP1, phổ cộng hưởng từ hạt nhân chiều hai chiều đo lại dung môi DMSO-d6 Phân tích tương tác phổ 1H-1H COSY (DMSO-d6) cho phép ghép nối mảnh cấu trúc H2-1/H2-2/H-3/H2-4/H2-5/H-7/H-6, H-9/H2-11/H2-12, H-14/H2-15/H2-16/H17/H-20/H3-21, H-20/H2-22/H2-23/H2-24/H-25/H3-26 H-25/H3-27 Kết này, với tương tác HMBC (đo DMSO-d6) H-18 (H 0,77) C-12 (C 35,6)/C-13 (C 44,1)/C-14 (C 57,3)/C-17 (C 55,0), H-19 (H 0,63) C1 (C 36,6)/C-5 (C 44,0)/C-9 (C 60,7)/C-10 (C 41,2), H-7 (H 2,02)/C-8 (C 85,2) 8-OH (H 4,46) C-8 (C 85,2)/C-9 (C 60,7)/C-14 (C 57,3), cho phép xác định xác cấu trúc phẳng ASP1 19 Bảng 4.2.3 Số liệu phổ NMR ASP1 C 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 8-OH δC δC b,c δC c,e 51,9 205,0 60,1 87,2 62,9 44,6 19,7 36,4 44,8 58,1 22,0 29,6 56,9 22,0 37,3 31,3 71,8 33,0 46,0 206,3 63,6 87,4 63,3 42,0 19,7 37,0 45,2 58,2 22,7 30,1 57,3 22,5 36,6 30,7 69,8 32,3 44,0 205,5 63,2 85,2 60,7 41,2 18,9 35,6 44,1 57,3 21,5 29,3 55,0 21,7 δH d,e dạng pic (J = Hz) 1,20 m/1,59 m 1,20 m/1,65 m 3,43 m 1,12 m/1,54 m 2,00 m 9,64 d (3,0) 2,02 dd (11,0, 3,0) 1,62 m 1,22 m/1,40 m 1,50 m/1,57 m 1,45 m 1,52 m/1,58 m 1,20 m/1,75 m 1,60 m 0,77 s 14,6 35,3 19,1 36,9 24,5 39,9 28,5 23,0 23,3 13,9 34,1 18,6 36,1 23,4 39,7 27,4 22,3 22,6 - 0,63 s 1,32 m 0,86 d (6,5) 0,98 m/1,31 m 1,15 m/1,30 m 1,10 m 1,50 m 0,84 d (6,5) 0,82 d (6,5) 4,46 s a 14,9 35,0 18,6 HMBC (H  C) 12, 13, 14, 17 1, 5, 9, 10 17, 20, 22 24, 25, 27 24, 25, 26 8, 9, 14 δC 8β-hydroxy-B-norconicasta-6α-aldehyde (Zhang et al., 2010), bđo CDCl3, c125 MHz, d500 MHz, a đo DMSO-d6 e Giá trị độ dịch chuyển hóa học 13C-NMR C-3 (đo CDCl3) C 71,8 đặc trưng cho cấu hình  nhóm OH C-3 (Miyaoka et al., 1997) Cấu hình tương đối C-7 C-8 ASP1 xác định giống với hợp chất 8hydroxy-B-norconicasta-6α-aldehyde (Zhang et al., 2010) phù hợp số 20 liệu phổ 1H 13C-NMR hai hợp chất khẳng định thêm kết phổ cộng hưởng từ hạt nhân hai chiều tương tác không gian ROESY (rotatingframe overhauser spectroscopy) đo DMSO-d6 Các tương tác ROESY (Hình 4.2.17) H-19 (H 0,63) H-7 (H 2,02), 8-OH (H 4,46) H-7 (H 2,02)/H18 (H 0,77) xác định cho cấu hình  H-7 8-OH Ngoài ra, proton H-5 (H 2,00) có tương tác ROESY với H-3 (H 3,43) H-6 (H 9,64) cho phép xác định H-3, H-5 H-6 có cấu hình α Từ phân tích nêu, cấu trúc hóa học hợp chất ASP1 xác định 3β,8β-dihydroxy-B-norcholest-7αcarboxaldehyde Đây hợp chất đặt tên astropectenol A *Bằng phương pháp tương tự trên, phối hợp kết phép đo phổ (1H-NMR, 13C-NMR, HSQC, HMBC, 1H-1H COSY, ROESY, FT-ICR-MS) xác định đầy đủ cấu trúc hóa học 12 hợp chất phân lập từ loài 02 loài biển A batheri A polyacanthus 4.3 Kết thử hoạt 4.3.1 Hoạt tính gây độc tế bào in vitro Kế t quả đánh giá hoa ̣t tin ́ h gây đô ̣c tế bào dịch chiết CH2Cl2 hợp chất phân lập từ lồi biển Astropecten polyacanthus dịng tế bào ung thư máu (HL-60), ung thư tuyến tiền liệt (PC-3) ung thư ruột kết (SNUC5) Kết thu (bảng 4.3.1) cho thấy, với dịng SNU-C5, có hợp chất ASP1 ASP4 có biểu hoạt tính Các hợp chất ASP1, ASP3-ASP5, ASP7 phân đoạn diclorometan ASP-C thể hoạt tính hai dịng tế bào HL60 PC-3 Trong đó, hợp chất ASP7 dịch chiết ASP-C thể hoạt tính tốt dòng tế bào ung thư máu HL-60 với giá trị IC50 tương ứng 2,70 µM 8,29 µg/ml, hoạt tính cao chất chuẩn dương sử dụng mitoxantrone (IC50 = 6,80 µM) Với hoạt tính mạnh chọn lọc dòng tế bào ung thư HL-60, hợp chất ASP7 phân đoạn ASP-C lựa chọn để đánh giá khả kích thích q trình tế bào chết theo chương trình (apoptosis) Bảng 4.3.1 Kết đánh giá hoạt tính diệt tế bào ung thư hợp chất dòng tế bào 21 Bảng 4.3.1 Kết thử hoạt tính dịng tế bào Hợp chất ASP1 ASP2 (-) (-) (-) ASP3 39,12 ± 3,11 64,10 ± 0,41 (-) ASP4 27,85 ± 1,70 41,19 ± 2,64 74.45 ± 3.15 ASP5 28,99 ± 1,19 82,95 ± 5,02 (-) ASP6 (-) (-) (-) 2,70 ± 0,05 27,28 ± 1,57 (-) b ASP-C 8,29 ± 0,20 25,42 ± 0,84 (-) Mitoxantronea 6,80 ± 0,90 5,17 ± 0,34 17.96 ± 4.40 ASP7 a IC50 dòng tế bào (µM) PC-3 (tuyến tiền SNU-C5 (ruột HL-60 (máu) liệt) kết) 27,91 ± 1,37 31,29 ± 0,75 45.49 ± 7.40 Chất chuẩn dương, bphân đoạn diclometan số liệu biểu thị đơn vị µg/ml 4.3.2 Kết đánh giá khả kích thích q trình tế bào chết theo chƣơng trình (apoptosis) Các đặc điểm đặc trưng trình apoptosis đánh giá sau tế bào HL-60 xử lý với phân đoạn ASP-C (1 10 µg/mL) hợp chất ASP-5 (1 10 µM) 24 Phân tích tế bào (flow cytometric analysis) cho thấy phần trăm tế bào tăng lên giai đoạn sub-G1 17,21 43,42% (hình 4.2.2a) xử lý tương ứng với phân đoạn ASP-C (10 µg/mL) hợp chất ASP7 (10 µM) Điều cho thấy phân đoạn ASP-C hợp chất ASP7 kích thích q trình apoptosis tế bào HL-60 xác nhận thêm gia tăng thể apoptosis tế bào xử lý nhuộm với thuốc nhuộm Hoechst 33342 Để xác định chế kích thích apoptosis, chúng tơi đánh giá biểu prototein liên quan đến apoptosis Bcl-2, Bax, caspase-3, caspase-9 poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) tế bào HL-60 xử lý với phân đoạn ASP-C (1 10 µg/ml) hợp chất ASP7 (1 10 µM) Sự gia tăng mức độ biểu Bax l, suy giảm mức độ biểu protein Bcl-2, caspase-9, caspase-3, PARP đồng thời gia tăng protein hoạt hóa: caspase-9, caspase-3, PARP phụ thuộc nồng độ phát 22 Ngồi ra, hoạt hóa đường ERK 1/2 đóng góp cho việc làm bền hóa Cmyc, protetin có khả gây ung thư Tế bào HL-60 sử lý với phân đoạn ASP-C hợp chất ASP7 làm giảm mức độ biểu phosphoERK1/2 C-myc Như phân đoạn ASP-C hợp chất ASP7 thúc đẩy q trình apoptosis thơng qua việc điều tiết giảm đường ERK 1/2 C-myc tế bào HL-60 Các kết cho thấy phân đoạn ASP-C hợp chất ASP7 kích thích q trình apoptosis thơng qua làm thay đổi mức độ biểu protein liên quan đến trình apoptosis 4.3.3 Kết đánh giá hoạt tính kháng viêm Hoạt tính kháng viêm đánh giá dựa khả ức chế sản sinh cytokine tiền viêm (IL-12 (Interleukin-12) p40, IL-6 (interleukin-6) yếu tố hoại tử khối u TNF-α (tumor necrosis factor α) ) tế bào gai (tế bào tua) có nguồn gốc tủy xương BMDCs kích thích LPS hợp chất phân lập từ loài biển Asterina batheri Astropecten polyacanthus Kết đánh giá (bảng 4.3.3) cho thấy hợp chất ASP4 phân đoạn diclometan thể khả ức chế mạnh sản sinh L-12 p40; Hai hợp chất ASP1 ASP7 ức chế mạnh sản sinh IL-12 p40 IL-6; ASP5 ức chế mạnh sản sinh IL-12 p40 TNF-α Các hợp chất cịn lại thể hoạt tính trung bình khơng có biểu hoạt tính ức chế sản sinh cytokine tiền viêm nghiên cứu 23 Bảng 4.3.3 Kết thử hoạt tính kháng viêm hợp chất Giá trị IC50 (μM) Hợp chất IL-12 p40 IL-6 TNF-α ASP1 3,96 ± 0,12 4,07 ± 0,13 (-) ASP2 34,86 ± 1,31 (-) (-) ASP3 6,55 ± 0,18 (-) 22,80 ± 0,21 ASP4 5,06 ± 0,16 16,73 ± 0,25 (-) ASP5 1,82 ± 0,11 5,76 ± 0,14 4,94 ± 0,12 ASP6 79.05 ± 2.05 (-) (-) 3,90 ± 0,14 2,61 ± 0,10 7,00 ± 0,16 1,27 ± 0.11 8.82 ± 0018 11.48 ± 0.16 11.47 ± 0.16 20.28 ± 0.22 36.99 ± 0.24 AB2 36,4 ± 0,25 (-) (-) AB3 31,1 ± 0,18 (-) (-) AB4 22,8 ± 0,15 (-) (-) SB203580 a 5,00 ± 0,16 3,50 ± 0,12 7,20 ± 0,13 ASP7 b ASP-C ASP-M a b Chất chuẩn dương, bsố liệu biểu thị đơn vị µg/ml KẾT LUẬN Về nghiên cứu hóa học Đã phân lập tổng cộng 12 hợp chất từ hai lồi biển, hợp chất từ loài biển A batheri hợp chất từ loài biển A polyacanthus Dựa vào phương pháp phổ đại, cấu trúc hóa học chúng xác định sau:  Astebatherioside A (AB1)  Astebatherioside B (AB2)  Astebatherioside C (AB3)  Astebatherioside D (AB4)  3-[O--D-fucopyranosyl-(13)--D-fucopyranosyl-(14)-[-Dquinovopyranosyl-(12)]--D-quinovopyranosyl]-2-acetyl-pyrrole (AB5)  Astropectenol A (ASP1) 24  Astropectenol B (ASP2)  Astropectenol C (ASP3)  Astropectenol D (ASP4)  5α-cholest-7-ene-3β,6α-diol (ASP5)  5α-cholest-8(14)-ene-3β,7α-diol (ASP6)  5α-cholest-7,9(11)-diene-3β-ol (ASP7) Trong có hợp chất AB1-AB4 ASP1-ASP4 Các hợp chất thu từ loài A polyacanthus sterol, lớp chất phổ biến loài biển Trong hợp chất thu có hợp chất mới, hợp chất steroid nhiên có biến đổi số vị trí khung tạo nên khác biệt so với sterol phân lập trước đây: chuyển vị vòng B từ vòng thành vòng (ASP1), nối cầu peroxit vị trí C-7/C-15 (ASP2), xuất cầu epoxy C-8/C-9 nhóm keton C-7 (ASP3) xuất nhóm hydroxyl vị trí C-9 (ASP4) Cấu trúc hợp chất việc chứng minh phương pháp phổ (NMR, FT-HR-MS) cịn giải thích dựa đường sinh tổng hợp lý thuyết hợp chất sterol phân lập từ loài biển A polyacanthus Về nghiên cứu hoạt tính sinh học 2.1 Đã khảo sát hoạt tính gây độc tế bào in vitro phân đoạn CH2Cl2 hợp chất từ loài biển A polyacanthus khả kích thích q trình chết tế bào theo chu trình (apoptosis) Kết cho thấy: - Hợp chất ASP1 ASP4 thể hoạt tính yếu dịng tế bào SNU-C5 Các hợp chất ASP1, ASP3-ASP5, ASP7 phân đoạn diclorometan ASP-C thể hoạt tính hai dịng tế bào HL-60 PC-3, hợp chất ASP7 dịch chiết ASP-C thể hoạt tính tốt dịng tế bào ung thư máu HL-60 với giá trị IC50 tương ứng 2,70 µM 8,29 µg/ml, hoạt tính cao chất chuẩn dương sử dụng mitoxantrone (IC 50 = 6,80 µM) - Ở nồng độ 10 µM (đối với ASP7) nồng độ 10 µg/ml (đối với ASP-C) q trình apoptosis thúc đẩy giai đoạn sub-G1 thông qua mức độ biểu protein liên quan như: gia tăng mức độ biểu Bax l, suy giảm mức độ biểu protein Bcl-2, phân cắt 25 caspase-9, phân cắt caspase-3, phân cắt PARP việc điều tiết giảm đường ERK ½ C-myc tế bào HL-60 2.2 Đánh giá hoạt tính kháng viêm dựa ảnh hưởng ức chế sản sinh cytokine tiền viêm 12 hợp chất tế bào tua (đuôi gai) BMDCs kích thích LPS Kết cho thấyhợp chất ASP4 thể khả ức chế mạnh sản sinh L-12 p40; Hai hợp chất ASP1 ASP7 ức chế mạnh sản sinh IL-12 p40 IL-6; ASP5 ức chế mạnh sản sinh IL-12 p40 TNF-α Các hợp chất cịn lại thể hoạt tính trung bình khơng có biểu hoạt tính ức chế sản sinh cytokine tiền viêm nghiên cứu KIẾN NGHỊ Đây cơng trình nghiên cứu hai loài biển Việt nam A batheri A polyacanthus Các steroid phân lập từ loài A polyacanthus thể hoạt tính gây độc tế bào hoạt tính kháng viêm thú vị Bên cạnh hợp chất phân lập từ loài A batheri pyrrole furan oligoglycoside gặp từ lồi biển Do vậy, từ cơng trình nghiên cứu tác giả có số kiến nghị sau: - Đối với lồi biển A polyacanthus: cần có nghiên cứu sâu thành phần hóa học để từ phát triển thành sản phẩm phục vụ cho việc bồi bổ, nâng cao sức khỏe phòng ngừa, hỗ trợ điều trị bệnh ung thư, viêm nhiễm… - Đối với loài biển A batheri: cần có nghiên cứu thành phần hóa học lồi biển để tìm yếu tố đặc trưng phát sinh loài mặt sinh thái học 26 Các cơng trình cơng bố có liên quan đến luận án Nguyen Phuong Thao, Nguyen Xuan Cuong, Bui Thi Thuy Luyen, Nguyen Hoai Nam, Pham Van Cuong, Nguyen Van Thanh, Nguyen Xuan Nhiem, Tran Thi Hong Hanh, Eun-Ji Kim, Hee-Kyoung Kang, Phan Van Kiem, Chau Van Minh, and Young Ho Kim Steroidal constituents from the starfish Astropecthen polyacanthus and their anticancer effects Chem Pharm Bull 61(10) 1044-1051 (2013) Nguyen Phuong Thao, Nguyen Xuan Cuong, Bui Thi Thuy Luyen, Tran Hong Quang, Tran Thi Hong Hanh, Sohyun Kim, Young-Sang Koh, Nguyen Hoai Nam, Phan Van Kiem, Chau Van Minh, and Young Ho Kim Anti-inflammatory components of the starfish Astropecthen polyacanthus Mar Drugs 2013, 11, 2917-2926 Nguyen Phuong Thao, Le Duc Dat, Ninh Thi Ngoc, Vu Anh Tu, Tran Thi Hong Hanh, Phan Thi Thanh Huong, Nguyen Xuan Nhiem, Bui Huu Tai, Nguyen Xuan Cuong, Nguyen Hoai Nam, Pham Van Cuong, Seo Young Yang, Sohyun Kim, Doobyeong Chae, Young-Sang Koh, , Phan Van Kiem, Chau Van Minh, and Young Ho Kim Pyrrole and furan oligoglycosides from the starfish Asterina batheri and their inhibitory effect on the production of pro-inflammatory cytokine in lipopolysaccharide-stimulated bone marrow-derived dendritic cell Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 23 (2013) 1823-1827 Trần Thị Hồng Hạnh, Nguyễn Phương Thảo, Lê Đức Đạt, Ninh Thị Ngọc, Phan Thị Thanh Hương, Vũ Anh Tú, Châu Ngọc Điệp, Nguyễn Tiến Đạt, Nguyễn Xuân Cường, Nguyễn Hoài Nam, Phan Văn Kiệm, Young Ho Kim, Châu Văn Minh Các hợp chất steroid phân lập từ lồi biển Astropecthen polyacanthus Tạp chí Hóa học, Tập 51 (6ABC) 10-13, 2013 Tran Thi Hong Hanh, Ninh Thi Ngoc, Le Đuc Đat, Phan Thi Thanh Huong, Nguyen Phuong Thao, Nguyen Tien Đat, Do Thi Thao, Nguyen Xuan Cuong, Nguyen Hoai Nam, Đo Cong Thung, Phan Van Kiem, Chau Van Minh An anti-imflammatory pyrrole oligoglycoside from the starfish Asterina batheri living in Vietnamese seas Journal of medicinal materials Vol.19, No.5, 279-283, 2014