NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC LOÀI SAO BIỂN ASTERINA BATHERI Goto, 1914 VÀ ASTROPECTEN POLYACANTHUS Müller & Troschel, 1842

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN HĨA SINH BIỂN - TRẦN THỊ HỒNG HẠNH NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC LỒI SAO BIỂN ASTERINA BATHERI Goto, 1914 VÀ ASTROPECTEN POLYACANTHUS Müller & Troschel, 1842 LUẬN ÁN TIẾN SĨ HĨA HỌC Hµ Néi -2015 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN HĨA SINH BIỂN - TRẦN THỊ HỒNG HẠNH NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC LỒI SAO BIỂN ASTERINA BATHERI Goto, 1914 VÀ ASTROPECTEN POLYACANTHUS Müller & Troschel, 1842 LUẬN ÁN TIẾN SĨ HĨA HỌC Chun ngành: Hóa Hữu Mã số: 62.44.01.14 Hướng dẫn khoa học 1: GS VS Châu Văn Minh Hướng dẫn khoa học 2: TS Nguyễn Hoài Nam Hµ Néi -2015 LỜI CẢM ƠN Luận án hồn thành Viện Hố sinh biển, Viện Hàn lâm Khoa học Cơng nghệ Việt Nam Với lòng biết ơn sâu sắc, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn tới GS VS Châu Văn Minh, TS Nguyễn Hoài Nam người thầy tận tình hướng dẫn, hết lòng bảo tạo điều kiện giúp đỡ thời gian làm luận án Tôi xin chân thành cảm ơn quan tâm giúp đỡ tập thể cán Viện Hóa sinh biển đặc biệt GS TS Nguyễn Văn Hùng - Chủ tịch Hội đồng khoa học Viện, người có ý kiến góp ý quan trọng việc định hướng đề tài Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn tới Lãnh đạo Viện Hóa sinh biển tạo điều kiện cho học tập sử dụng thiết bị tiên tiến Viện để hoàn thành tốt mục tiêu đề luận án Tôi xin chân thành cảm ơn TS Nguyễn Xuân Cường tập thể cán Phòng Dược liệu biển, Viện Hóa sinh biển giúp đỡ tơi nhiệt tình suốt thời gian thực luận án Tôi xin chân thành cảm ơn GS Young Ho Kim, Trường Đại học Chungnam, Hàn Quốc nhiệt tình giúp đỡ tơi thực nghiên cứu hoạt tính sinh học Tơi xin trân thành cảm ơn PGS TS Đỗ Công Thung giúp đỡ thu thập mẫu giám định tên khoa học Luận án hỗ trợ kinh phí thực khuôn khổ đề tài Nghiên cứu định hướng ứng dụng giai đoạn 2011-2014, TS Nguyễn Xuân Cường làm chủ nhiệm LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan: Đây cơng trình nghiên cứu riêng hướng dẫn GS VS Châu Văn Minh TS Nguyễn Hoài Nam Các số liệu kết luận án hoàn tồn trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tác giả luận án Trần Thị Hồng Hạnh i MỤC LỤC MỤC LỤC i DANH MỤC HÌNH iv DANH MỤC BẢNG viii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT ix ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU I.1 Giới thiệu chung lớp biển (Asteroidea) I.2 Tình hình nghiên cứu lồi biển giới I.2.1 Các nghiên cứu thành phần hóa học loài biển .4 I.2.1.1 Các hợp chất steroid I.2.1.2 Các hợp chất steroid glycoside I.2.1.2.1 Glycoside polyhydroxysteroid 10 I.2.1.2.2 Các hợp chất asterosaponin 14 I.2.1.2.3 Cyclic steroid glycoside 17 I.2.1.3 Các hợp chất glycosphingolipid .18 I.2.1.4 Các hợp chất khác 20 I.2.2 Các nghiên cứu hoạt tính sinh học 20 I.2.2.1 Hoạt tính gây độc tế bào 20 I.2.2.2 Hoạt tính kháng vi sinh vật .23 I.2.2.3 Hoạt tính ức chế thụ tinh .24 I.2.2.4 Hoạt tính chống đơng máu .25 I.3 Tình hình nghiên cứu lồi biển Việt nam .26 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 31 II.1 Đối tượng nghiên cứu 31 II.2 Phương pháp nghiên cứu .31 II.2.1.Phương pháp phân lập hợp chất 31 II.2.2 Phương pháp xác định cấu trúc hoá học hợp chất .32 ii II.2.3 Phương pháp đánh giá hoạt tính sinh học 33 II.2.3.1 Phương pháp đánh giá hoạt tính gây độc tế bào .33 II.2.3.2 Phương pháp đánh giá hoạt tính kháng viêm 35 CHƯƠNG THỰC NGHIỆM 37 III.1 Phân lập hợp chất 37 III.1.1 Phân lập hợp chất từ loài biển Asterina batheri 37 III.1.2 Phân lập hợp chất từ loài biển Astropecten polyacanthus 38 III.2 Hằng số vật lý kiện phổ hợp chất phân lập 40 III.2.1 Hợp chất (AB1): Astebatherioside A (chất mới) 40 III.2.2 Hợp chất (AB2): Astebatherioside B (chất mới) 40 III 2.3 Hợp chất (AB3): Astebatherioside C (chất mới) 41 III.2.4 Hợp chất (AB4): Astebatherioside D (chất mới) 41 III.2.5 Hợp chất (AB5): 3-[O--D-fucopyranosyl-(13)--D-fucopyranosyl(14)-[-D-quinovopyranosyl-(12)]--D-quinovopyranosyl]-2-acetyl-pyrrole .41 III.2.6 Hợp chất (ASP1): Astropectenol A (chất mới) .41 III.2.7 Hợp chất (ASP2): Astropectenol B (chất mới) 41 III.2.8 Hợp chất (ASP3): Astropectenol C (chất mới) 42 III.2.9 Hợp chất (ASP4): Astropectenol D (chất mới) .42 III.2.10 Hợp chất 10 (ASP5): 5α-cholest-7-ene-3β,6α-diol 42 III.2.11 Hợp chất 11 (ASP6): 5α-cholest-8(14)-ene-3β,7α-diol 42 III.2.12 Hợp chất 12 (ASP7): 5α-cholest-7,9(11)-diene-3β-ol 42 III.3 Hoạt tính sinh học hợp chất phân lập 43 III.3.1 Hoạt tính gây độc tế bào 43 III.3.2 Hoạt tính kháng viêm 43 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 44 IV.1 Xác định cấu trúc hợp chất 44 IV.1.1 Hợp chất (AB1): Astebatherioside A (chất mới) 44 IV.1.2 Hợp chất AB2: Astebatherioside B 49 IV.1.3 Hợp chất AB3: Astebatherioside C 54 iii IV.1.4 Hợp chất AB4: Astebatherioside D 58 IV.1.5 Hợp chất AB5: 3-[O--D-fucopyranosyl-(13)--D-fucopyranosyl(14)-[-D-quinovopyranosyl-(12)]--D-quinovopyranosyl]-2-acetyl-pyrrole .62 IV.1.6 Hợp chất ASP1: Astropectenol A (chất mới) 65 IV.1.7 Hợp chất ASP2: Astropectenol B (chất mới) 72 IV.1.8 Hợp chất ASP3: Astropectenol C (chất mới) 77 IV.1.9 Hợp chất ASP4: Astropectenol D (chất mới) 81 IV.1.10 Hợp chất ASP5: 5α-cholest-7-ene-3β,6α-diol 85 IV.1.11 Hợp chất ASP6: 5α-cholest-8(14)-ene-3β,7α-diol 87 IV.1.12 Hợp chất ASP7: 5α-cholest-7,9(11)-diene-3β-ol 90 IV.2 Kết thử hoạt tính sinh học .96 IV.2.1 Hoạt tính gây độc tế bào 96 IV.2.2 Kết đánh giá khả kích thích q trình tế bào chết theo chương trình (apoptosis) 97 IV.2.3 Hoạt tính kháng viêm .100 IV.3 Nhận xét .104 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .105 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ CỦA LUẬN ÁN 108 TÀI LIỆU THAM KHẢO .109 PHỤ LỤC 116 iv DANH MỤC HÌNH Hình 3.1.1 Sơ đồ phân lập hợp chất từ biển A batheri 37 Hình 3.1.2a Sơ đồ phân lập hợp chất từ phân đoạn C1, C2 loài biển A polyacanthus 39 Hình 3.1.2b Sơ đồ phân lập hợp chất từ phân đoạn C3, C4 loài biển A polyacanthus 40 Hình 4.1.1a Phổ FT-ICR-MS AB1 44 Hình 4.1.1b Cấu trúc hóa học AB1 44 Hình 4.1.1c Phổ 1H-NMR AB1 45 Hình 4.1.1d Phổ 13C-NMR AB1 45 Hình 4.1.1e Phổ HSQC AB1 47 Hình 4.1.1f Phổ HMBC AB1 48 Hình 4.1.1g Phổ COSY AB1 48 Hình 4.1.1h Các tương tác COSY (▬) HMBC () AB1 .48 Hình 4.1.2a Phổ FT-ICR-MS AB2 50 Hình 4.1.2b Phổ 1H-NMR AB2 50 Hình 4.1.2c Cấu trúc hóa học AB2 50 Hình 4.1.2d Phổ 13C-NMR AB2 51 Hình 4.1.2e Phổ HSQC AB2 51 Hình 4.1.2f Phổ HMBC AB2 53 Hình 4.1.2g Phổ COSY AB2 53 Hình 4.1.2h Các tương tác COSY (▬) HMBC () AB2 .53 Hình 4.1.3a Phổ HR-ESI-MS AB3 54 Hình 4.1.3b Phổ 1H-NMR AB3 55 Hình 4.1.3c Cấu trúc hóa học AB3 55 Hình 4.1.3d Phổ 13C-NMR AB3 55 Hình 4.1.3e Phổ HSQC AB3 56 Hình 4.1.3f Phổ HMBC AB3 57 Hình 4.1.3g Phổ COSY AB3 57 v Hình 4.1.3h Các tương tác COSY (▬) HMBC () AB3 .57 Hình 4.1.4a Phổ HR-ESI-MS AB4 58 Hình 4.1.4b Phổ 1H-NMR AB4 59 Hình 4.1.4c Cấu trúc hóa học AB4 59 Hình 4.1.4d Phổ 13C-NMR AB4 59 Hình 4.1.4e Phổ HSQC AB4 60 Hình 4.1.4f Phổ HMBC AB4 61 Hình 4.1.4g Phổ COSY AB4 61 Hình 4.1.4h Các tương tác COSY (▬) HMBC () AB4 .62 Hình 4.1.5a Phổ 1H-NMR AB5 62 Hình 4.1.5b Cấu trúc hóa học AB5 63 Hình 4.1.5c Phổ 13C-NMR AB5 .63 Hình 4.1.5d Phổ HSQC AB5 63 Hình 4.1.5e Phổ HMBC AB5 65 Hình 4.1.5f Các tương tác HMBC AB5 .65 Hình 4.1.6a Phổ FT-ICR-MS ASP1 .66 Hình 4.1.6b Phổ 1H-NMR ASP1 đo CDCl3 (trên) DMSO-d6 (dưới) 67 Hình 4.1.6c Cấu trúc hóa học ASP1 67 Hình 4.1.6d Phổ 13 C-NMR ASP1 đo CDCl3 (trên) DMSO-d6 (dưới) 68 Hình 4.1.6e Phổ HSQC ASP1 đo DMSO-d6 68 Hình 4.1.6f Phổ HMBC ASP1 đo DMSO-d6 .68 Hình 4.1.6g Phổ COSY ASP1 đo DMSO-d6 70 Hình 4.1.6h Các tương tác COSY (▬) HMBC () 70 Hình 4.1.6i Phổ ROESY ASP1 đo DMSO-d6 71 Hình 4.1.6j Các tương tác ROESY ASP1 đo DMSO-d6 71 Hình 4.1.7a Phổ FT-ICR-MS ASP2 .72 vi Hình 4.1.7b Phổ 1H NMR ASP2 CDCl3 (trên) DMSO-d6 (dưới) 73 Hình 4.1.7c Cấu trúc hóa học ASP2 73 Hình 4.1.7d Phổ 13C-NMR ASP2 đo CDCl3 (trên) DMSO-d6 (dưới) 74 Hình 4.1.7e Phổ HSQC ASP2 đo DMSO-d6 75 Hình 4.1.7f Phổ HMBC ASP2 đo DMSO-d6 .76 Hình 4.1.7g Các tương tác HMBC ASP2 đo DMSO-d6 .76 Hình 4.1.7h Phổ ROESY ASP2 đo DMSO-d6 .76 Hình 4.1.7i Các tương tác ROESY ASP2 đo DMSO-d6 77 Hình 4.1.8a Phổ FT-ICR-MS ASP3 .78 Hình 4.1.8b Cấu trúc hóa học ASP3 78 Hình 4.1.8c Phổ 1H-NMR ASP3 78 Hình 4.1.8d Phổ 13C-NMR ASP3 79 Hình 4.1.8e Phổ HMQC ASP3 80 Hình 4.1.8f Phổ HMBC ASP3 .80 Hình 4.1.8g Các tương tác HMBC ASP3 80 Hình 4.1.9a Phổ FT-ICR-MS ASP4 .81 Hình 4.1.9b Cấu trúc hóa học ASP4 81 Hình 4.1.9d Phổ 13C-NMR ASP4 82 Hình 4.1.9e Phổ HSQC ASP4 83 Hình 4.1.9f Phổ HMBC ASP4 .84 Hình 4.1.9g Các tương tác HMBC ASP4 84 Hình 4.1.11a Phổ 1H-NMR ASP5 85 Hình 4.1.11b Cấu trúc hóa học ASP5 85 Hình 4.1.11c Phổ 13C-NMR ASP5 85 Hình 4.1.11d Phổ HMQC ASP5 86 Hình 4.1.11e Phổ HMBC ASP5 .87 Hình 4.1.11f Các tương tác HMBC ASP5 87 101 tế bào lympho, tiểu cầu, tế bào nội mạc… Các tế bào giải phóng cytokine đóng vai trò điều hòa phản ứng miễn dịch IL-12 cytokine tiền gây viêm sản sinh kích hoạt tế bào kháng nguyên, tế bào đuôi gai (tế bào tua), bạch cầu đơn nhân/đại thực bào IL12 giữ vai trò trung tâm việc hình thành điều tiết đáp ứng miễn dịch nội bào Nó tham gia vào q trình điều tiết viêm tế bào T loại phần đáp ứng miễn dịch thông thường bệnh viêm nhiễm như: thấp khớp, hen suyễn, vẩy nến bệnh Crohn IL-6 biết đến cytokine đa chức tham gia vào phản ứng sinh học bao gồm phản ứng miễn dịch, tạo máu phản ứng pha cấp tính Một số ảnh hưởng điều tiết IL-6 bao gồm ức chế sản xuất yếu tố hoại tử khối u (TNF), cung cấp thông tin phản hồi tiêu cực hạn chế phản ứng viêm cấp tính Các cytokine IL-6 cần thiết sản xuất nhiều lại liên quan đến số bệnh khác tạo thành chế tiêu cực hệ thống điều tiết IL-6 TNF-α liên quan đến tình trạng viêm, nhiễm trùng ác tính đa dạng Tầm quan trọng TNF-α viêm chứng minh hiệu kháng thể chống TNF-α thụ thể hòa tan TNF (TNFRs) việc kiểm sốt viêm khớp dạng thấp tình trạng viêm TNF-α không phát người khỏe mạnh tìm thấy huyết mơ điều kiện viêm, nhiễm mức độ huyết tương quan với mức độ nhiễm trùng Do vậy, việc ức chế sản xuất chất trung gian, bao gồm IL-12 p40, IL-6 TNF-α mục tiêu việc ngăn ngừa, điều trị trình gây viêm Các tế bào tua (đuôi gai) từ tủy xương (BMDCs) đóng vai trò quan trọng hai hệ thống miễn dịch bẩm sinh miễn dịch đáp ứng BMCD kích hoạt thực chức quan trọng miễn dịch phản ứng viêm thơng qua mơ hình phân tử kích thích sản xuất cytokine tiền gây viêm IL-12, IL-6 TNF-α Hoạt tính kháng viêm đánh giá dựa khả ức chế sản sinh cytokine tiền viêm tế bào tua (đi gai) có nguồn gốc tủy xương BMDCs 102 kích thích LPS hợp chất phân lập từ loài biển Asterina batheri Astropecten polyacanthus Phương pháp thử nghiệm hoạt tính kháng viêm trình bày theo phương pháp mơ tả mục II.2.3.2 Các cytokine tiền viêm là: IL-12 (Interleukin12) p40, IL-6 (interleukin-6) yếu tố hoại tử khối u TNF-α (tumor necrosis factor α) Kết trình bày bảng sau: Hình 4.2.3a Ảnh hưởng hợp chất AB1-AB5 lên sản sinh IL-12p40, IL-6 TNF-α từ tế bào BMDCs kích thích LPS 103 Hình 4.2.3b Ảnh hưởng dịch chiết methanol diclometan lên sản sinh IL-12p40, IL-6 TNF-α từ tế bào BMDCs kích thích LPS Hình 4.2.3c Ảnh hưởng hợp chất ASP1-ASP6 lên sản sinh IL-12p40, IL-6 TNF-α từ tế bào BMDCs kích thích LPS 104 Bảng 4.2.3 Hoạt tính kháng viêm hợp chất tế bào BMDCs kích thích LPS Giá trị IC50 (μM) Hợp chất IL-12 p40 IL-6 TNF-α ASP1 3,96 ± 0,12 4,07 ± 0,13 (-) ASP2 34,86 ± 1,31 (-) (-) ASP3 6,55 ± 0,18 (-) 22,80 ± 0,21 ASP4 5,06 ± 0,16 16,73 ± 0,25 (-) ASP5 1,82 ± 0,11 5,76 ± 0,14 4,94 ± 0,12 ASP6 79.05 ± 2.05 (-) (-) ASP7 3,90 ± 0,14 2,61 ± 0,10 7,00 ± 0,16 ASP-Cb 1,27 ± 0.11 8.82 ± 0018 11.48 ± 0.16 ASP-Mb 11.47 ± 0.16 20.28 ± 0.22 36.99 ± 0.24 AB2 36,4 ± 0,25 (-) (-) AB3 31,1 ± 0,18 (-) (-) AB4 22,8 ± 0,15 (-) (-) SB203580 a 5,00 ± 0,16 3,50 ± 0,12 7,20 ± 0,13 a Chất chuẩn dương, bsố liệu biểu thị đơn vị µg/ml Kết đánh giá (bảng 4.2.3) cho thấy hợp chất ASP4 thể khả ức chế mạnh sản sinh L-12 p40; Hai hợp chất ASP1 ASP7 ức chế mạnh sản sinh IL-12 p40 IL-6; ASP5 ức chế mạnh sản sinh IL-12 p40 TNF-α Các hợp chất còn lại thể hoạt tính trung bình khơng có biểu hoạt tính ức chế sản sinh cytokine tiền viêm nghiên cứu IV.3 Nhận xét Từ kết đánh giá hoạt tính sinh học cho thấy: Các steroid phân lập từ lồi biển Astropecten polyacanthus thể hoạt tính gây độc dòng tế bào ung thư cách chọn lọc Phân đoạn chiết diclometan (ASP-C) hợp chất ASP7 lồi biển thể hoạt tính gây độc mạnh chọn lọc dòng tế bào cung thư máu HL-60 Các kết nghiên cứu cho thấy phân đoạn chiết ASP-C hợp chất ASP7 thể khả kích thích q trình tế bào HL-60 chết theo chương trình (apoptosis) Ngồi ra, hợp chất steroid phân lập từ biển A polyacanthus thể hoạt tính kháng viêm cao 105 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Đây cơng trình nghiên cứu hai loài biển Asterina batheri Astropecthen polyacanthus thu thập vùng biển Việt nam Về nghiên cứu hóa học Đã phân lập tổng cộng 12 hợp chất từ hai loài biển, hợp chất từ lồi biển A batherri hợp chất từ loài biển A polyacanthus Dựa vào phương pháp phổ đại, cấu trúc hóa học chúng xác định sau:  Astebatherioside A (AB1)  Astebatherioside B (AB2)  Astebatherioside C (AB3)  Astebatherioside D (AB4)  3-[O--D-fucopyranosyl-(13)--D-fucopyranosyl-(14)-[-Dquinovopyranosyl-(12)]--D-quinovopyranosyl]-2-acetyl-pyrrole (AB5)  Astropectenol A (ASP1)  Astropectenol B (ASP2)  Astropectenol C (ASP3)  Astropectenol D (ASP4)  5α-cholest-7-ene-3β,6α-diol (ASP5)  5α-cholest-8(14)-ene-3β,7α-diol (ASP6)  5α-cholest-7,9(11)-diene-3β-ol (ASP7) Trong có hợp chất AB1-AB4 ASP1-ASP4 Các hợp chất thu từ loài A polyacanthus sterol, lớp chất phổ biến loài biển Trong hợp chất thu có hợp chất mới, hợp chất sterol nhiên có biến đổi số vị trí khung tạo nên khác biệt so với sterol phân lập trước đây: chuyển vị vòng B từ vòng thành vòng (ASP1), nối cầu peroxit vị trí C- 106 7/C-15 (ASP2), xuất cầu epoxy C-8/C-9 nhóm keton C-7 (ASP3) xuất nhóm hydroxyl vị trí C-9 (ASP4) Cấu trúc hợp chất việc chứng minh phương pháp phổ (NMR, FT-HRMS) còn giải thích dựa đường sinh tổng hợp lý thuyết hợp chất sterol phân lập từ loài biển A polyacanthus [95] Trong đó, hợp chất phân lập từ loài A batheri lại hợp chất pyrrole furan oligoglycoside, lớp chất gặp từ loài biển Mới có hợp chất dạng khung phân lập từ loài A pectinifera vào năm 2006 hợp chất AB1-AB4 hợp chất dạng khung tiếp tục phân lập từ loài A batheri Về nghiên cứu hoạt tính sinh học 2.1 Đã khảo sát hoạt tính gây độc tế bào in vitro phân đoạn CH2Cl2 hợp chất từ lồi biển A polyacanthus khả kích thích trình chết tế bào theo chu trình (apoptosis) Kết cho thấy: - Hợp chất ASP1 ASP4 thể hoạt tính yếu dòng tế bào SNU-C5 Các hợp chất ASP1, ASP3-ASP5, ASP7 phân đoạn diclorometan ASP-C thể hoạt tính hai dòng tế bào HL-60 PC-3, hợp chất ASP7 dịch chiết ASP-C thể hoạt tính tốt dòng tế bào ung thư máu HL-60 với giá trị IC50 tương ứng 2,70 µM 8,29 µg/ml, hoạt tính cao chất chuẩn dương sử dụng mitoxantrone (IC50 = 6,80 µM) - Ở nồng độ 10 µM (đối với ASP7) nồng độ 10 µg/ml (đối với ASP-C) q trình apoptosis thúc đẩy giai đoạn sub-G1 thông qua mức độ biểu protein liên quan như: gia tăng mức độ biểu Bax suy giảm mức độ biểu protein Bcl-2, caspase-9, caspase-3, PARP đồng thời tăng cường dạng hoạt hóa caspase việc điều tiết giảm đường ERK1/2 C-myc tế bào HL-60 2.2 Đánh giá hoạt tính kháng viêm dựa ảnh hưởng ức chế sản sinh cytokine tiền viêm 12 hợp chất tế bào tua (đuôi gai) BMDCs kích thích LPS Kết cho thấyhợp chất ASP4 thể khả ức chế mạnh sản sinh L-12 p40; Hai hợp chất ASP1 ASP7 ức chế mạnh sản sinh IL-12 p40 107 IL-6; ASP5 ức chế mạnh sản sinh IL-12 p40 TNF-α Các hợp chất còn lại thể hoạt tính trung bình khơng có biểu hoạt tính ức chế sản sinh cytokine tiền viêm nghiên cứu Kiến nghị: Đây cơng trình nghiên cứu hai loài biển A batheri A polyacanthus Các steroid phân lập từ loài A polyacanthus thể hoạt tính gây độc tế bào hoạt tính kháng viêm thú vị Bên cạnh hợp chất phân lập từ loài A batheri saponin gặp từ loài biển Do vậy, từ cơng trình nghiên cứu tác giả có số kiến nghị sau: - Đối với lồi biển A polyacanthus: cần có nghiên cứu sâu hoạt tính sinh học để từ phát triển thành sản phẩm phục vụ cho việc bồi bổ, nâng cao sức khỏe phòng ngừa, hỗ trợ điều trị bệnh ung thư, viêm nhiễm… - Đối với loài biển A batheri: cần có nghiên cứu thành phần hóa học lồi biển để tìm yếu tố đặc trưng phát sinh loài mặt sinh thái học 108 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ CỦA LUẬN ÁN Nguyen Phuong Thao, Nguyen Xuan Cuong, Bui Thi Thuy Luyen, Nguyen Hoai Nam, Pham Van Cuong, Nguyen Van Thanh, Nguyen Xuan Nhiem, Tran Thi Hong Hanh, Eun-Ji Kim, Hee-Kyoung Kang, Phan Van Kiem, Chau Van Minh, and Young Ho Kim Steroidal constituents from the starfish Astropecthen polyacanthus and their anticancer effects Chem Pharm Bull 61(10) 1044-1051 (2013) Nguyen Phuong Thao, Le Duc Dat, Ninh Thi Ngoc, Vu Anh Tu, Tran Thi Hong Hanh, Phan Thi Thanh Huong, Nguyen Xuan Nhiem, Bui Huu Tai, Nguyen Xuan Cuong, Nguyen Hoai Nam, Pham Van Cuong, Seo Young Yang, Sohyun Kim, Doobyeong Chae, Young-Sang Koh, , Phan Van Kiem, Chau Van Minh, and Young Ho Kim Pyrrole and furan oligoglycosides from the starfish Asterina batheri and their inhibitory effect on the production of pro-inflammatory cytokine in lipopolysaccharide-stimulated bone marrowderived dendritic cell Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 23 (2013) 1823-1827 Nguyen Phuong Thao, Nguyen Xuan Cuong, Bui Thi Thuy Luyen, Tran Hong Quang, Tran Thi Hong Hanh, Sohyun Kim, Young-Sang Koh, Nguyen Hoai Nam, Phan Van Kiem, Chau Van Minh, and Young Ho Kim Antiinflammatory components of the starfish Astropecthen polyacanthus Mar Drugs 2013, 11, 2917-2926 Trần Thị Hồng Hạnh, Nguyễn Phương Thảo, Lê Đức Đạt, Ninh Thị Ngọc, Phan Thị Thanh Hương, Vũ Anh Tú, Châu Ngọc Điệp, Nguyễn Tiến Đạt, Nguyễn Xuân Cường, Nguyễn Hoài Nam, Phan Văn Kiệm, Young Ho Kim, Châu Văn Minh Các hợp chất steroid phân lập từ loài biển Astropecthen polyacanthus Tạp chí Hóa học, Tập 51 (6ABC) 10-13, 2013 Tran Thi Hong Hanh, Ninh Thi Ngoc, Le Đuc Đat, Phan Thi Thanh Huong, Nguyen Phuong Thao, Nguyen Tien Đat, Do Thi Thao, Nguyen Xuan Cuong, Nguyen Hoai Nam, Đo Cong Thung, Phan Van Kiem, Chau Van Minh An anti-imflammatory pyrrole oligoglycoside from the starfish Asterina batheri living in Vietnamese seas Journal of medicinal materials Vol.19, No.5, 279283, 2014 109 TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] J.H Ausubel, D.T Crist, P.E and Waggoner, First census of marine lifeHighlight of a decade of discovery., Census of Marine lìe international secretariat, New York, (2010) [2] P Snelgrove, Discoveries of the census odd marine life, Cambridge University Press, (2010) [3] Richard C Brusca, Gary J Brusca, Invertebrates, second edition, "Chapter 22: Phylum Echinodermata", Sinaure Associates, (2002) 801-830 [4] L.H Hyman, The Invertebrates, :"Vol 4: Echinodermats", New York, McGrawHill, (1955) [5] Đào Tấn Hổ, Đa dạng sinh học động vật Da gai vịnh Nha Trang suy giảm nguồn lợi loài kinh tế Hội thảo Quốc gia sinh thái tài nguyên sinh vật lần thứ nhất., NXB Nông nghiệp, Hà nội, (2005) 568-572 [6] Châu Văn Minh, Phan Văn Kiệm, Nguyễn Văn Hùng, Nguyễn Hoài Nam, P.V Cường, Dược liệu biển Việt nam thực trạng hội phát triển, NXB Khoa học tự nhiên công nghệ (Hà nội 2012) 59-60 [7] G Dong, T Xu, B Yang, X Lin, X Zhou, X Yang, Y Liu, Chemical Constituents and Bioactivities of Starfish, Chemistry & Biodiversity, (2011) 740-791 [8] F De Riccardis, L Minale, R Riccio, M Iorizzi, C Debitus, D Duhet, C Monniot, A novel group of polyhydroxycholanic acid derivatives from the deep water starfish Styracaster caroli, Tetrahedron Letters, 34 (1993) 4381-4384 [9] M Iorizzi, F de Riccardis, L Minale, E Palagiano, R Riccio, C Debitus, D Duhet, Polyoxygenated marine steroids from the deep water starfish Styracaster caroli, Journal of Natural Products, 57 (1994) 1361-1373 [10] F De Riccardis, I Izzo, M Iorizzi, E Palagiano, L Minale, R Riccio, Two novel polyhydroxysteroids with a 24-Ethyl-25-hydroxy-26-sulfoxy side chain from the deep water starfish Styracaster caroli, Journal of Natural Products, 59 (1996) 386-390 [11] R Riccio, M Santaniello, O.S Greco, L Minale, Structure elucidation of minor marine polyhydroxysteroids isolated from the starfish Archaster typicus, Journal of the Chemical Society, Perkin Transactions 1, (1989) 823826 [12] R Riccio, O.S Greco, L Minale, D Laurent, D Duhet, Highly hydroxylated marine steroids from the starfish Archaster typicus, Journal of the Chemical Society, Perkin Transactions 1, (1986) 665-670 [13] N.V Ivanchina, A.A Kicha, T.T.T Huong, A.I Kalinovsky, P.S Dmitrenok, I.G Agafonova, P.Q Long, V.A Stonik, Highly hydroxylated steroids of the starfish Archaster typicus from the Vietnamese waters, Steroids, 75 (2010) 897-904 [14] X.-W Yang, X.-Q Chen, G Dong, X.-F Zhou, X.-Y Chai, Y.-Q Li, B Yang, W.-D Zhang, Y Liu, Isolation and structural characterisation of five new and 14 known metabolites from the commercial starfish Archaster typicus, Food Chemistry, 124 (2011) 1634-1638 110 [15] R Higuchi, Y Noguchi, T Komori, T Sasaki, Biologically active glycosides from asteroidea, XVIII 1H-NMR spectroscopy and biological activities of polyhydroxylated steroids from the starfish Asterina pectinifera Müller et Troschel, Liebigs Annalen der Chemie, 1988 (1988) 1185-1189 [16] M Honda, T Igarashi, N Marubayashi, T Komori, Biologically active glycosides from asteroidea, XXVII Stereochemistry of the C-17 side chain of 26-homothornasterol B: Novel triethylaluminum-promoted rearrangement and alkylation of epoxy alcohols, Liebigs Annalen der Chemie, 1991 (1991) 595598 [17] L.X Zhang, X Fan, J.G Shi, A novel polyhydroxyl sterol from Asterina pectinifera, Journal of Asian natural products research, (2005) 25-29 [18] R Riccio, L Minale, S Pagonis, C Pizza, F Zollo, J Pusset, A novel group of highly hydroxylated steroids from the starfish Protoreaster nodosus, Tetrahedron, 38 (1982) 3615-3622 [19] Y Peng, J Zheng, R Huang, Y Wang, T Xu, X Zhou, Q Liu, F Zeng, H Ju, X Yang, Y Liu, Polyhydroxy steroids and saponins from China sea starfish Asterina pectinifera and their biological activities, Chemical & pharmaceutical bulletin, 58 (2010) 856-858 [20] M.V D'Auria, R Riccio, L Minale, S La Barre, J Pusset, Novel marine steroid sulfates from Pacific ophiuroids, The Journal of Organic Chemistry, 52 (1987) 3947-3952 [21] M.V D'Auria, R Riccio, E Uriarte, L Minale, J Tanaka, T Higa, Isolation and structure elucidation of seven new polyhydroxylated sulfated sterols from the ophiuroid Ophiolepis superba, The Journal of Organic Chemistry, 54 (1989) 234-239 [22] Francesco De Riccardis, Luigi Minale, and Rafaele Riccio, Bruno Giovannitti, and Maria Iorizzi, Phosphated and sulphated marine polyhydroxylated steroids from the starfish Tremaster novaecaledoniae, Gazzetta Chimica Italiana, 123 (1993) 79-85 [23] W Wang, F Li, Y Park, J Hong, C.-O Lee, J.Y Kong, S Shin, K.S Im, J.H Jung, Bioactive Sterols from the Starfish Certonardoa semiregularis, Journal of Natural Products, 66 (2003) 384-391 [24] W Wang, J Hong, C.-O Lee, K.S Im, J.S Choi, J.H Jung, Cytotoxic sterols and saponins from the starfish Certonardoa semiregularis, Journal of Natural Products, 67 (2004) 584-591 [25] W Wang, H Jang, J Hong, C.-O Lee, K.S Im, S.-J Bae, J.H Jung, Additional cytotoxic sterols and saponins from the starfish Certonardoa semiregularis, Journal of Natural Products, 67 (2004) 1654-1660 [26] E.V Levina, A.I Kalinovskii, P.V Andriyashchenko, P.S Dmitrenok, E.V Evtushenko, V.A Stonik, A new steroidal glycoside phrygioside A and its aglycone from the starfish Hippasteria phrygiana, Russ Chem Bull, 53 (2004) 2634-2638 [27] E.V Levina, A.I Kalinovsky, P.V Andriyashenko, P.S Dmitrenok, D.L Aminin, V.A Stonik, Phrygiasterol, a cytotoxic cyclopropane-containing colyhydroxysteroid, and related compounds from the Pacific starfish Hippasteria phrygiana, Journal of Natural Products, 68 (2005) 1541-1544 [28] S De Marino, M Iorizzi, F Zollo, L Minale, C.D Amsler, B.J Baker, J.B McClintock, Isolation, structure elucidation, and biological activity of the 111 steroid oligoglycosides and polyhydroxysteroids from the Antarctic starfish Acodontaster conspicuus, Journal of Natural Products, 60 (1997) 959-966 [29] E Kho, D.K Imagawa, M Rohmer, Y Kashman, C Djerassi, Sterols in marine invertebrates 22 Isolation and structure elucidation of conicasterol and theonellasterol, two new 4-methylene sterols from the red sea sponges Theonella conica and Theonella swinhoei, The Journal of Organic Chemistry, 46 (1981) 1836-1839 [30] G Notaro, V Piccialli, D Sica, R Pronzato, New Δ8(14)-3β, 7αDihydroxysterols from the marine sponge Pellina semitubulosa, Journal of Natural Products, 55 (1992) 773-779 [31] Y Sugo, Y Inouye, N Nakayama, Structures of nine oxygenated 4-methylene sterols from Hachijo marine sponge Theonella swinhoei, Steroids, 60 (1995) 738-742 [32] N Ma, H.F Tang, F Qiu, H.W Lin, X.R Tian, W Zhang, A new polyhydroxysteroidal glycoside from the starfish Anthenea chinensis, Chinese Chemical Letters, 20 (2009) 1231-1234 [33] N Ma, H.-F Tang, F Qiu, H.-W Lin, X.-R Tian, M.-N Yao, Polyhydroxysteroidal glycosides from the starfish Anthenea chinensis, Journal of Natural Products, 73 (2010) 590-597 [34] W Wang, F Li, N Alam, Y Liu, J Hong, C.-K Lee, K.S Im, J.H Jung, New Saponins from the Starfish Certonardoa semiregularis, Journal of Natural Products, 65 (2002) 1649-1656 [35] A Casapullo, E Finamore, L Minale, F Zollo, J.B Carré, C Debitus, D Laurent, A Folgore, F Galdiero, Starfish saponins, Part 49 New cytotoxic steroidal glycosides from the starfish Fromia monilis, Journal of Natural Products, 56 (1993) 105-115 [36] A.A Kicha, N.V Ivanchina, A.I Kalinovsky, P.S Dmitrenok, I.G Agafonova, V.A Stonik, Steroidal triglycosides, Kurilensosides A, B, and C, and other polar steroids from the far eastern starfish Hippasteria kurilensis, Journal of Natural Products, 71 (2008) 793-798 [37] J.A Findlay, Z.-Q He, Novel sulfated sterol glycosides from Asterias forbesi, Journal of Natural Products, 53 (1990) 710-712 [38] A.A Kicha, A.I Kalinovsky, N.V Ivanchina, V.A Stonik, New steroid glycosides from the deep-water starfish Mediaster murrayi, Journal of Natural Products, 62 (1999) 279-282 [39] M Iorizzi, L Minale, R Riccio, T Higa, J Tanaka, Starfish saponins, Part 46 Steroidal glycosides and polyhydroxysteroids from the starfish Culcita novaeguineae, Journal of Natural Products, 54 (1991) 1254-1264 [40] R.S de Correa, R Riccio, L Minale, C Duque, Starfish saponins, Part 21 Steroidal glycosides from the starfish Oreaster reticulatus, Journal of Natural Products, 48 (1985) 751-755 [41] M Iorizzi, G Bifulco, F de Riccardis, L Minale, R Riccio, F Zollo, Starfish Saponins, Part 53 A Reinvestigation of the polar steroids from the starfish Oreaster reticulatus: Isolation of sixteen steroidal oligoglycosides and six polyhydroxysteroids, Journal of Natural Products, 58 (1995) 10-26 [42] I Kitagawa, M Kobayashi, On the structure of the major saponin from the starfish Acanthaster planci, Tetrahedron Letters, 18 (1977) 859-862 112 [43] H.D Chludil, A.M Seldes, M.S Maier, Antifungal steroidal glycosides from the patagonian starfish Anasterias minuta:  structure−activity correlations, Journal of Natural Products, 65 (2002) 153-157 [44] John A Findlay, Zheng-Quan He, and Barbara Blackwell, Minor saponins from the starfish Asterina forbesi, Can J Chem., 68 (1990) 1215-1217 [45] E Finamore, L Minale, R Riccio, G Rinaldo, F Zollo, Novel marine polyhydroxylated steroids from the starfish Myxoderma platyacanthum, The Journal of Organic Chemistry, 56 (1991) 1146-1153 [46] M.J Vázquez, E Quiđố, R Riguera, A San Martín, J Dárias, Santiagoside, the first asterosaponin from an antarctic starfish (Neosmilaster georgianus), Tetrahedron, 48 (1992) 6739-6746 [47] I.H Hwang, D.W Kim, S.J Kim, B.S Min, S.H Lee, J.K Son, C.H Kim, H.W Chang, M Na, Asterosaponins isolated from the starfish Asterias amurensis, Chemical & pharmaceutical bulletin, 59 (2011) 78-83 [48] H.F Tang, Y.H Yi, L Li, P Sun, S.Q Zhang, Y.P Zhao, Three new asterosaponins from the starfish Culcita novaeguineae and their bioactivity, Planta medica, 71 (2005) 458-463 [49] H.-F Tang, Y.-H Yi, L Li, P Sun, S.-Q Zhang, Y.-P Zhao, Bioactive asterosaponins from the starfish Culcita novaeguineae, Journal of Natural Products, 68 (2005) 337-341 [50] H.-F Tang, G Cheng, J Wu, X.-L Chen, S.-Y Zhang, A.-D Wen, H.-W Lin, Cytotoxic asterosaponins capable of promoting polymerization of tubulin from the starfish Culcita novaeguineae, Journal of Natural Products, 72 (2009) 284289 [51] T.V Malyarenko, A.A Kicha, N.V Ivanchina, A.I Kalinovsky, R.S Popov, O.S Vishchuk, V.A Stonik, Asterosaponins from the Far Eastern starfish Leptasterias ochotensis and their anticancer activity, Steroids, 87 (2014) 119127 [52] R Riccio, E De Simone, A Dini, L Minale, C Pizza, F Senatore, F Zollo, Starfish saponins VI - unique 22,23-epoxysteroidal cyclic glycosides, minor constituents from Echinaster sepoeitus, Tetrahedron Letters, 22 (1981) 15571560 [53] R Riccio, A Dini, L Minale, C Pizza, F Zollo, T Sevenet, Starfish saponins VII Structure of luzonicoside, a further steroidal cyclic glycoside from the pacific starfish Echinaster luzonicus, Experientia, 38 (1982) 68-70 [54] F De Simone, A Dini, E Finamore, L Minale, C Pizza, R Riccio, F Zollo, Starfish saponins Part Structure of sepositoside A, a novel steroidal cyclic glycoside from the starfish Echinaster sepositus, Journal of the Chemical Society, Perkin Transactions 1, (1981) 1855-1862 [55] W Jin, K.L Rinehart, E.A Jares-Erijman, Ophidiacerebrosides: cytotoxic glycosphingolipids containing a novel sphingosine from a sea star, The Journal of Organic Chemistry, 59 (1994) 144-147 [56] V Costantino, C de Rosa, E Fattorusso, C Imperatore, A Mangoni, C Irace, C Maffettone, D Capasso, L Malorni, R Palumbo, C Pedone, Oreacerebrosides: Bioactive cerebrosides with a triunsaturated sphingoid base from the sea star Oreaster reticulatus, European Journal of Organic Chemistry, 2007 (2007) 5277-5283 113 [57] M Inagaki, T Nakata, R Higuchi, Isolation and structure of a galactocerebroside molecular species from the starfish Culcita novaeguineae, Chemical & pharmaceutical bulletin, 54 (2006) 260-261 [58] K Pan, M Inagaki, N Ohno, C Tanaka, R Higuchi, T Miyamoto, Identification of sixteen new galactocerebrosides from the starfish Protoreaster nodosus, Chemical & pharmaceutical bulletin, 58 (2010) 470474 [59] Y Kawano, R Higuchi, R Isobe, T Komori, Biologically active glycosides from asteroidea, XVII Glycosphingolipids from the starfish Acanthaster planci, Isolation and structure of two new ceramide lactosides, Liebigs Annalen der Chemie, 1988 (1988) 1181-1183 [60] M Inagaki, K Nakamura, S Kawatake, R Higuchi, Isolation and structural determination of four new ceramide lactosides from the starfish Luidia maculata, European Journal of Organic Chemistry, 2003 (2003) 325-331 [61] A.A Kicha, N.V Ivanchina, A.I Kalinovsky, P.S Dmitrenok, V.A Stonik, Alkaloidosteroids from the starfish Lethasterias nanimensis chelifera, Tetrahedron Letters, 44 (2003) 1935-1937 [62] M Iorizzi, F de Riccardis, L Minale, R Riccio, Starfish Saponins, 52 Chemical Constituents from the Starfish Echinaster brasiliensis, Journal of Natural Products, 56 (1993) 2149-2162 [63] L.X Zhang, X Fan, J.G Shi, A novel pyrrole oligoglycoside from the starfish Asterina pectinifera, Natural product research, 20 (2006) 229-233 [64] Y.C Zhan, Y Sun, W Li, Y Lin, Y Sha, Y.H Pei, A new triterpene glycoside from Asterias rollentoni, Journal of Asian natural products research, (2006) 631-636 [65] D.J Newman, G.M Cragg, Marine Natural Products and Related Compounds in Clinical and Advanced Preclinical Trials†, Journal of Natural Products, 67 (2004) 1216-1238 [66] F Farokhi, G Wielgosz-Collin, M Clement, J.-M Kornprobst, G Barnathan, Cytotoxicity on human cancer cells of Ophidiacerebrosides isolated from the African Starfish Narcissia canariensis, Marine Drugs, (2010) 2988-2998 [67] M Iorizzi, P Bryan, J McClintock, L Minale, E Palagiano, S Maurelli, R Riccio, F Zollo, Chemical and biological investigation of the polar constituents of the starfish Luidia clathrata, collected in the gulf of Mexico, Journal of Natural Products, 58 (1995) 653-671 [68] N.V Ivanchina, A.A Kicha, A.I Kalinovsky, P.S Dmitrenok, V.A Stonik, Hemolytic steroid disulfates from the far eastern starfish Pteraster pulvillus, Journal of Natural Products, 66 (2003) 298-301 [69] N.V Ivanchina, A.A Kicha, A.I Kalinovsky, P.S Dmitrenok, A.S Dmitrenok, E.L Chaikina, V.A Stonik, M Gavagnin, G Cimino, Polar steroidal compounds from the far eastern starfish Henricia leviuscula, Journal of Natural Products, 69 (2006) 224-228 [70] Chau Van Minh, Nguyen Xuan Cuong, Nguyen Van Thanh, Hoang Thanh Huong, and Phan Van Kiem, Highly oxygenated sterols from the starfish Archaster typicus, Journal of Chemistry, 45 (2007) 377-381 [71] Phan Van Kiem, Nguyen Van Thanh, Nguyen Xuan Cuong, and Chau Van Minh, Cholest-7-ene-3-one, cholesterol and batilol from the starfish Archaster typicus, Journal of Chemistry, 45 (2007) 513-517 114 [72] Chau Van Minh, Nguyen Van Thanh, Nguyen Xuan Cuong, Phan Van Kiem, A new galctocerebroside from the starfish Archaster typicus, 12th Congress, Kuala Lumpur, Malaysia, 309 (2007) [73] A.A Kicha, N.V Ivanchina, T.T.T Huong, A.I Kalinovsky, P.S Dmitrenok, S.N Fedorov, S.A Dyshlovoy, P.Q Long, V.A Stonik, Two new asterosaponins, archasterosides A and B, from the Vietnamese starfish Archaster typicus and their anticancer properties, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 20 (2010) 3826-3830 [74] Alla A Kicha, Trinh T T Huong, Nâtlia V Ivanchina, Anatoly I Kalinovsky, Paven S Dmitrenok, Irina G Agafonova, Pham Q Long, Valentin A Stonik, Two new asterosaponines, archasteroside A and B, from the Vietnamese starfish Archaster typicus and their anticancer properies., Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 20 (2010) 3826-3830 [75] Trịnh Thị Thu Hương, Phạm Quốc Long, Alla A Kicha, Natalia V Ivanchina, Anatoly I Kalinovsky, Paven S Dmitrenok, and Valentin A Stonik, A new polyhydroxy steroid from the starfish Archaster typicus, Journal of Chemistry, 47 (2009) 374-379 [76] N.P Thao, B.T.T Luyen, E.-J Kim, H.-K Kang, S Kim, N.X Cuong, N.H Nam, P.V Kiem, C.V Minh, Y.H and Kim, Asterosaponins from the starfish Astropecten monacanthus supperess growth and induce apoptosis in HL-60, PC-3, and SNU-C5 human cancer cell lines., Biol Pharm Bull., 37 (2014) 315-321 [77] Nguyen Phuong Thao, Cuong NX, Luyen BT, Thanh NV, Nhiem NX, Koh YS, Ly BM, Nam NH, Kiem PV, Minh CV, Kim YH, Anti-inflammatory asterosaponins from the starfish Astropecten monacanthus, J Nat Prod., 76 (2013) 1764-1770 [78] M Iorizzi, G Bifulco, F de Riccardis, L Minale, R Riccio, F Zollo, Starfish saponins, Part 53 A reinvestigation of the polar steroids from the starfish Oreaster reticulatus: isolation of sixteen steroidal oligoglycosides and six polyhydroxysteroids, J Nat Prod., 58 (1995) 10-26 [79] S De Marino, N Borbone, M Iorizzi, G Esposito, J.B McClintock, F Zollo, Bioactive asterosaponins from the starfish Luidia quinaria and Psilaster cassiope Isolation and structure characterization by two-dimensional NMR spectroscopy, J Nat Prod., 66 (2003) 515-519 [80] H.F Tang, Y.H Yi, L Li, P Sun, S.Q Zhang, Y.P Zhao, Bioactive asterosaponins from the starfish Culcita novaeguineae, J Nat Prod., 68 (2005) 337-341 [81] X.C Li, D.L Barnes, I.A Khan, A new lignan glycoside from Eleutherococcus senticosus, Planta Med., 67 (2001) 776-778 [82] H.-J Zhang, Y.-H Yi, H.-W Lin, Oxygenated 4-methylidene sterols from the south China sea sponge Theonella swinhoei, Helvetica Chimica Acta, 93 (2010) 1120-1126 [83] H Miyaoka, M Shinohara, M Shimomura, H Mitome, A Yano, K Iguchi, Y Yamada, Aragusterols E-H, new 26,27-cyclosterols from the Okinawan marine sponge of the genus Xestospongia and absolute configurations of xestokerols A and B, Tetrahedron, 53 (1997) 5403–5412 [84] M Tsuda, E.J Parish, G.J Schroepfer, Carbon-13 nuclear magnetic resonance studies of allylic hydroxysterols Assignment of structure of 5a-cholest-8(14)- 115 ene-3b,7a,15a-triol, an inhibitor of sterol synthesis, J Org Chem., 44 (1979) 1282–1289 [85] G Notaro, V Piccialli, D Sica, R Pronzato, New Δ8(14)-3β, 7αDihydroxysterols from the Marine Sponge Pellina semitubulosa, J Nat Prod., 55 (1992) 773–779 [86] V Costantino, E Fattorusso, A Mangoni, M Aknin, E.M Gaydou, Novel 3-βmethoxysteroids from the senegalse sponge Microscleroderma spirophora, Steroids, 59 (1994) 181–184 [87] N.P Thao, N.X Cuong, B.T Luyen, N.H Nam, P.V Cuong, N.V Thanh, N.X Nhiem, T.T Hanh, E.J Kim, H.K Kang, P.V Kiem, C.V Minh, Y.H Kim, Steroidal constituents from the starfish Astropecten polyacanthus and their anticancer effects, Chem Pharm Bull, 61 (2013) 1044-1051 [88] W.K Wilson, R.M Sumpter, J.J Warren, P.S Rogers, B Ruan, G.J Schroepfer, Analysis of unsaturated C27 sterols by nuclear magnetic resonance spectroscopy, J Lipid Res., 37 (1996) 1529–1555 [89] M.V D'Auria, L.G Paloma, L Minale, R Riccio, C Debitus, C Lévi, Unique 3β-O-Methylsterols from the Pacific sponge Jereicopsis graphidiophora, J Nat Prod., 55 (1992) 311–320 [90] D Hanahan, R.A Weinberg, The hallmarks of cancer, Cell, 100 (2000) 57–70 [91] K.C Zimmermann, D.R Green, How cells die: Apoptosis pathways, J Allergy Clin Immunol., 108 (2001) S99–S103 [92] A.C Cheng, T.C Huang, C.S Lai, M.H Pan, Induction of apoptosis by luteolin through cleavage of Bcl-2 family in human leukemia HL-60 cells, Eur J Pharmacol., 509 (2005) 1–10 [93] A Rasola, M Sciacovelli, F Chiara, B Pantic, W.S Brusilow, P Bernardi, Activation of mitochondrial ERK protects cancer cells from death through inhibition of the permeability transition, Proc Natl Acad Sci U S A., 107 (2010) 726–731 [94] E Yeh, M Cunningham, H Arnold, D Chasse, T Monteith, G Ivaldi, W.C Hahn, P.T Stukenberg, S Shenolikar, T Uchida, C.M Counter, J.R Nevins, A.R Means, R Sears, A signalling pathway controlling c-Myc degradation that impacts oncogenic transformation of human cells, Nature Cell Biology, (2004) 308–318 [95] N.P Thao, N.X Cuong, B.T.T Luyen, N.H Nam, P.V Cuong, N.V Thanh, N.X Nhiem, T.T.H Hanh, E.-J Kim, H.-K Kang, P.V Kiem, C.V Minh, Y.H Kim, Steroidal Constituents from the Starfish Astropecten polyacanthus and Their Anticancer Effects, Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 61 (2013) 1044-1051 ... 6α-O-[β-D-fucopyranosyl- 16 (1→2 )- -D-galactopyranosyl-(1→4 )-[ β-D-quinovopyranosyl-(1→2) ]- -Dquinovopyranosyl-(1→3 )- -D-galactopyranosyl ]-5 α-chol-9(11)-en-23-one-3β-ylsodium sulfate (172), 6α-O-[β-D-fucopyranosyl-(1→2 )- -D-galactopyranosyl-... 6α-O-[β-D-fucopyranosyl-(1→2 )- -D-galactopyranosyl- (1→4 )-[ β-D-quinovopyranosyl-(1→2) ]- -D-quinovopyranosyl-(1→3 )- -Dgalactopyranosyl ]-5 α-cholesta-9(11),24-dien-23-one-3β-yl sodium sulfate (173) 6α-O-[β-D-fucopyranosyl-(1→2 )- -D-galactopyranosyl-(1→4 )-[ β-Dquinovopyranosyl-(1→2) ]- -D-quinovopyranosyl-(1→3 )- -D-galactopyranosyl]5α-cholest-9(11)-en-23-one-3β-yl... 6αO-[β-D-fucopyranosyl-(1→2 )- -L-arabinopyranosyl-(1→4 )-[ β-Dquinovopyranosyl-(1→2 )- -D-xylopyranosyl-(1→3 )- -D-quinovopyranosyl ]-5 αpregn-9(11)-en-20-one-3β-yl sulfate (176) (20S,24R )-6 α-O-[β-D-fucopyranosyl(1→2 )- -L-arabinopyranosyl-(1→4 )-[ β-D-quinovopyranosyl-(1→2 )- -Dxylopyranosyl-(1→3 )- -D-quinovopyranosyl ]-2 0-hydroxy-23-oxo-24-methyl-5αcholest-9(11)-en-3β-yl