Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ học nhiễm helicobacter pylori ở trẻ em vùng tây nguyên việt nam

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI LÊ THỌ NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ HỌC NHIỄM HELICOBACTER PYLORI Ở TRẺ EM VÙNG TÂY NGUYÊN, VIỆT NAM LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI - 2014 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI LÊ THỌ NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ HỌC NHIỄM HELICOBACTER PYLORI Ở TRẺ EM VÙNG TÂY NGUYÊN, VIỆT NAM Chuyên ngành : Nhi khoa Mã số: 62720135 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS TS NGUYỄN VĂN BÀNG TS HOÀNG THỊ THU HÀ HÀ NỘI - 2014 LỜI CẢM ƠN Lời cho xin đƣợc bày tỏ biết ơn sâu sắc tới: Giáo sƣ Nguyễn Gia Khánh, Phùng Đức Cam ngƣời thầy từ đầu định hƣớng cho nghiên cứu H pylori lĩnh vực mẻ thú vị Hai thầy hƣớng dẫn cho cách suy nghĩ khoa học để hƣớng tới nghiên cứu luận án Giáo sƣ Lê Nam Trà thầy Hội đồng chấm đề cƣơng tiến sỹ, định hƣớng cho mục tiêu nghiên cứu chọn lọc dân tộc thích hợp để đƣa vào nghiên cứu Phó giáo sƣ Nguyễn Văn Bàng, ngƣời hƣớng dẫn tôi, với dẫn dắt khoa học từ khâu huấn luyện lấy mẫu, cách phân tích, lập luận ln nhiệt tình giúp đỡ tơi hồn cảnh Tiến sĩ Hoàng Thị Thu Hà, ngƣời hƣớng dẫn thứ hai ngƣời trực tiếp xét nghiệm huyết học 1890 mẫu nghiên cứu, phân tích đọc kết giúp tơi, có kết làm luận án xác, đồng thời ngƣời chia sẻ nên giúp tơi tìm đƣợc thơng tin quý báu để viết luận án Phó giáo sƣ tiến sĩ Nguyễn Văn Tồn, Phó giáo sƣ Hồng Minh Hằng, Tiến sĩ Phạm Đức Phúc giúp biết cách phân tích số liệu để viết luận án Sở Y tế tỉnh Lâm Đồng phòng ban tạo điều kiện mặt thời gian phần kinh phí giúp tơi hồn thành luận án Sở Y tế tỉnh Đak Lak, Gia Lai, Trung tâm Y tế huyện Cƣ M‟gar, Trung tâm Y tế huyện Chƣ Păh, Trung tâm Y tế huyện Đức Trọng, trạm Y tế xã Ia Phí, xã Ia Khƣơi, xã Ea Tar, xã N‟Thôn Hạ, xã Liên Hiệp, Hiệp An, Ninh Loan tạo điều kiện giúp đỡ mặt nhân lực để hoàn thành luận án Nhân viên bệnh viện Nhi Lâm Đồng, thành lập nhƣng đƣợc huấn luyện kỹ vấn lấy mẫu, vào số liệu, sát cánh vƣợt qua khó khăn đến vùng xa để hồn thành luận án Ban giám đốc trung tâm Y tế Dự Phòng, phòng xét nghiệm trung tâm Y tế Dự Phịng tỉnh Lâm Đồng giúp tơi tách chọn huyết theo quy trình chuẩn để chuyển Viện Vệ Sinh Dịch Tễ Trung Ƣơng xét nghiệm Cuối xin chân thành cảm ơn bệnh nhi gia đình em xã thuộc tỉnh vùng Tây Nguyên dành cho thời gian quý báu để thực việc nghiên cứu Lê Thọ LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng tơi, khơng trùng lặp với cơng trình nghiên cứu khoa học khác Các số liệu, kết nghiên cứu trung thực chƣa đƣợc công bố Tôi xin chịu trách nhiệm lời cam đoan Lê Thọ DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Các ký hiệu: (+): Dƣơng tính (-): Âm tính Σ: Tổng cộng %: Tỷ lệ phần trăm Tiếng Việt: - DD-TT - DSR - ĐK - KNKQ - LL - LS - NMDD - TX - UTDD - VDD Tiếng Anh: - CagA - CI - CLO test - ELiSA - Etest - H.pylori - Hp - OR - PcR - RAPD - RUT - UBT - VagA >: Lớn 3 lần thời gian kéo dài > tháng làm ảnh hƣởng đến sinh hoạt), nôn tái diễn (NTD), nôn máu (NM), phân đen (PĐ) Bệnh TH (từ dƣới tháng đến nay): Không (o), Đau thƣợng vị (ĐTV: đau điển hình vùng thƣợng vị có khơng lên quan đến bữa ăn), đau bụng tái diễn (ĐBTD: >3 lần thời gian kéo dài > tháng làm ảnh hƣởng đến sinh hoạt), nôn tái diễn (NTD), nôn máu (NM), phân đen (PĐ) Tiền sử dị ứng: Mày đay (MĐ), hen PQ (HPQ), chàm (Ch), di ứng thức ăn (DƢTA), khác (ghi rõ ): 10 KS tháng: Kháng sinh dùng tháng vừa qua: Có (+) không (-) 11 KS 12 tháng: số đợt dùng KS năm qua: ghi số đợt dùng KS 12 Thời gian bú mẹ: ghi tổng số tháng bú mẹ 13 Sống tập thể: ghi thời điểm (tháng) bắt đầu sống tập thể (nhƣ đến nhà trẻ, không nhà trẻ, ghi tuổi học tiểu học ) 14/15 RT TA (rửa tay trƣớc ăn) RT SVS (rửa tay sau đại tiện): ghi theo mức độ: luôn (LL), thƣờng xuyên (thỉnh thoảng quên) (TX), nhớ quên (KNKQ), (ĐK), không (KBG) 16 Sau vệ sinh (sau đại tiện: chùi hay rửa): Chỉ rửa (RR), rửa (R), chùi (CC), chùi (C), rửa, chùi (R+C) 17 Ngƣời/giƣờng: số ngƣời ngủ chung giƣờng thƣờng xuyên nhất: ghi theo số ngƣời (2,3,4,5 ) 18 Nhai/bón: có ăn thức ăn ngƣời khác nhai bón tiền sử (kể trẻ em ngƣời lớn): có (+), khơng (-) 19 Ăn bốc: khơng (-), (+/-), luôn hay thƣờng xuyên (+) 20 (ăn chung bát, đũa, thìa ): khơng (-), (+/-), luôn hay thƣờng xuyên (+) II Thơng tin hộ gia đình: 2.1 Thu nhập trung bình/tháng/đầu ngƣời: ngàn đồng/tháng ngàn đồng/tháng ƣớc tính lƣơng, khác (can bộ)/thóc,khoai, sắn, chăn ni, khác(nơng dân): 2.2 Nhà ở: Diện tích bình qn……….m2/ ngƣời Nhà ở: nhà tƣ nhân ‫ڤ‬ nhà tập thể (nhà sàn/nhà rông/nhà đất/nhà xây lát)  (nhà đất/nhà xây lát/nhà tầng) 2.3 Nguồn nƣớc (có thể dùng nhiều nguồn): Nƣớc máy  giếng xây  Sông  giếng làng  giếng đào ‫ڤ‬ suối  2.4 Hố xí: Tự hoại ‫ڤ‬ bán tự hoại  hai ngăn  thùng ngăn  khác , khơng có hố xí cố định:  2.5 Dùng phân bắc tƣơi: Không dùng bao giờ: ‫ ڤ‬trong ruộng /vƣờn nhà  địa phƣơng  2.6 Nuôi động vật: Nuôi nhà: Chó ‫ڤ‬ mèo  lợn Khoảng cách từ chỗ ngƣời đến chuồng trâu bò/lợn: khác  m 2.7 Những thức ăn đặc biệt (ghi rõ loại thức ăn đặc biệt bản, dân tộc ấy): 2.8 Những tập qn riêng biệt gia đình thơn bản: 2.9 Tuổi kết hôn: Chồng: vợ: 2.10 Tuổi sinh đầu lòng: Chồng: 2.11 Những điều ghi đặc biệt: vợ: Phụ lục Kỹ thuật ELISA in-house Kháng nguyên H pylori đƣợc sử dụng: Kháng nguyên toàn thân vi khuẩn bất hoạt siêu ly tâm từ loại chủng H pylori phân lập đƣợc bệnh nhân viêm loét dày-tá tràng (Kháng nguyên đƣợc sản xuất theo thƣờng qui Học viện Karolinska, Thụy Điển) - Kháng nguyên Campylobacter jejuni đƣợc sản xuất từ chủng bệnh nhân tiêu chảy ngƣời Việt Nam (theo thƣờng qui Học viện Karolinska, Thụy Điển) - Chuẩn bị cho ELISA: Pha loãng kháng nguyên H pylori dung dịch PBS pH 7,4 theo nồng độ 80µg/ml Nhỏ 100µl dung dịch kháng ngun pha lỗng vào giếng ELISA Phủ kín giấy bạc giữ nhiệt độ phòng qua đêm - Chuẩn bị dung dịch đệm: Dung dịch gắn bản: PBS pH 7,4 Dung dịch pha loãng huyết thanh: PBS-BSA 1%-Tween 20 PBS-BSA 1%-Tween 20 kháng nguyên Campylobacter jejuni Dung dịch rửa bản: PBS-Tween 20 Dung dịch chất: Chỉ chuẩn bị trƣớc dùng phút theo tỷ lệ viên chất 5ml dung dịch chất (tránh ánh sáng) - Huyết bệnh nhân đƣợc pha loãng 1:100 dung dịch đệm PBS-BSA 1%- Tween 20, sau tiếp tục pha lỗng 1:10 PBS bao gồm 90 µg/ml kháng nguyên Campylobacter jejuni để tránh phản ứng chéo kháng thể - Nhỏ 100µl dung dịch huyết pha lỗng vào lỗ nhựa gắn kháng nguyên H pylori Ủ nhựa 1giờ 370C Sử dụng hai chứng dƣơng hai chứng âm (chuẩn quốc tế) Mỗi mẫu huyết đƣợc làm đúp nhựa - Rửa nhựa lần dung dịch PBS -Tween 20, pH=7 - Nhỏ 100µl dung dịch kháng thể dê kháng IgG ngƣời đƣợc pha loãng theo tỉ lệ 1:2500 vào lỗ nhựa Tiếp tục ủ 370C - Rửa nhựa lần dung dịch PBS - Tween 20, pH =7 - Nhỏ 100µl dung dịch chất vào lỗ nhựa Dùng hàng nhựa nhỏ dung dịch chất để làm hàng chứng cho phản ứng ngày Tiếp tục ủ nhựa 15 phút 370C 30 phút nhiệt độ phòng - Đọc kết phản ứng máy ELISA với bƣớc sóng 405nm * Đánh giá kết quả: Giá trị 0,2 giới hạn đánh giá kết dƣơng tính hay âm tính phƣơng pháp Giá trị đƣợc xác định từ nghiên cứu Hồng Thị Thu Hà cs [125], chuẩn vàng hợp phƣơng pháp CLO, mô bệnh học, nuôi cấy, ELISA chủng H pylori dƣơng tính đƣợc ni cấy từ 124 bệnh nhân lt dày- tá tràng 200 ngƣời lành, với độ nhạy cảm 100% (124/124) độ đặc hiệu 96% (192/200) Phụ lục ... TRƢỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI LÊ THỌ NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ HỌC NHIỄM HELICOBACTER PYLORI Ở TRẺ EM VÙNG TÂY NGUYÊN, VIỆT NAM Chuyên ngành : Nhi khoa Mã số: 62720135 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Người... quán, đặc biệt vùng Tây Nguyên Nhằm đánh giá tỷ lệ nhiễm H pylori dân tộc Tây Nguyên yếu tố nguy lây nhiễm H pylori, tiến hành đề tài: ? ?Nghiên cứu đặc điễm dịch tễ học nhiễm Helicobacter pylori trẻ. .. em vùng Tây Nguyên, Việt Nam? ?? với hai mục tiêu: Xác định tỷ lệ nhiễm H pylori trẻ em dân tộc Tây Nguyên Việt Nam năm 2010-2011 Xác định số yếu tố liên quan đến nhiễm H pylori trẻ em dân tộc Tây