Nghiên cứu phân lập và đánh giá tác động của vi sinh vật trong quá trình tạo trầm hương trên cây dó bầu (Aquilaria crassna Pierre ex. Lecomte)

ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƢỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA NGUYỄN VĂN HÙNG NGHIÊN CỨU PHÂN LẬP VÀ ĐÁNH GIÁ TÁC ĐỘNG CỦA VI SINH VẬT TRONG Q TRÌNH TẠO TRẦM HƢƠNG TRÊN CÂY DĨ BẦU (Aquilaria crassna Pierre ex Lecomte) Chuyên ngành: Công nghệ Sinh học Mã số: 60.42.80 LUẬN VĂN THẠC SĨ Thành phố Hồ Chí Minh, tháng 08 năm 2014 CƠNG TRÌNH ĐƢỢC HOÀN THÀNH TẠI TRƢỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP HỒ CHÍ MINH Cán hƣớng dẫn khoa học: Phó Giáo sƣ, Tiến sĩ Nguyễn Đức Lƣợng Cán chấm nhận xét 1: PGS TS Lê Thị Thủy Tiên Cán chấm nhận xét 2: TS Trần Trung Hiếu Luận văn Thạc sĩ đƣợc bảo vệ Trƣờng Đại học Bách Khoa, ĐHQG Tp HCM ngày 15 tháng năm 2014 Thành phần Hội đồng đánh giá luận văn thạc sĩ bao gồm: (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị Hội đồng chấm bảo vệ luận văn Thạc sĩ) Chủ tịch Hội đồng: PGS TS Bùi Văn Lệ Ủy viên Phản biện 1: PGS TS Lê Thị Thủy Tiên Ủy viên Phản biện 2: TS Trần Trung Hiếu Ủy viên Hội đồng: PGS TS Nguyễn Đức Lƣợng Thƣ ký Hội đồng: TS Nguyễn Tấn Trung Xác nhận Chủ tịch Hội đồng đánh giá LV Trƣởng Khoa quản lý chuyên ngành sau luận văn đƣợc sửa chữa (nếu có) CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG TRƢỞNG KHOA KTHH ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP.HCM CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƢỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA Độc lập - Tự - Hạnh phúc NHIỆM VỤ LUẬN VĂN THẠC SĨ Họ tên học viên: Nguyễn Văn Hùng MSHV: 11310608 Ngày, tháng, năm sinh: 08/03/1983 Nơi sinh: Bình Định Chuyên ngành: Công nghệ Sinh học Mã số : 60.42.80 I TÊN ĐỀ TÀI: Nghiên cứu phân lập đánh giá tác động vi sinh vật trình tạo trầm hƣơng dó bầu (Aquilaria crassna Pierre ex Lecomte) II NHIỆM VỤ VÀ NỘI DUNG:  Thu thập mẫu trầm hƣơng (trầm kiến) dó bầu (Aquilaria crassna Pierre ex Lecomte) rừng tự nhiên rừng trồng, thu đƣợc từ hai tỉnh Bình Định Hà Tĩnh  Phân lập vi sinh vật có mẫu trầm hƣơng  Bƣớc đầu thử nghiệm sơ khả làm biến đổi màu gỗ dó bầu (Aquilaria crassna Pierre ex Lecomte) vi sinh vật phân lập đƣợc từ mẫu trầm hƣơng  Tuyển chọn vi sinh vật làm đổi màu gỗ dó bầu tiến hành định danh để xác định lồi vi sinh vật có khả tạo trầm hƣơng dó bầu III NGÀY GIAO NHIỆM VỤ : 19/08/2013 IV NGÀY HOÀN THÀNH NHIỆM VỤ: 06/2014 V CÁN BỘ HƢỚNG DẪN : Phó Giáo sƣ, Tiến sĩ Nguyễn Đức Lƣợng Tp HCM, ngày tháng năm 2014 CÁN BỘ HƢỚNG DẪN CHỦ NHIỆM BỘ MÔN ĐÀO TẠO (Họ tên chữ ký) (Họ tên chữ ký) PGS TS Nguyễn Đức Lƣợng TRƢỞNG KHOA….……… (Họ tên chữ ký) LỜI CẢM ƠN Luận văn đƣợc hoàn thành nhờ giúp đỡ lớn từ Thầy tơi: Phó Giáo sƣ Tiến sĩ Nguyễn Đức Lƣợng, Thầy truyền đạt kiến thức chuyên ngành quý báu suốt năm học tập trƣờng Thầy quan tâm nhắc nhở, động viên trình làm luận văn, chia khó khăn giúp đỡ tơi cần Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Thầy Tôi xin gửi lời cảm ơn đến cơ: Phó Giáo sƣ - Tiến sĩ Nguyễn Thúy Hƣơng, Phó Giáo sƣ - Tiến sĩ Lê Thị Thủy Tiên, Tiến sĩ Huỳnh Ngọc Oanh quan tâm tạo điều kiện thiết bị dụng cụ phịng thí nghiệm góp ý q trình làm luận văn tơi Xin gửi lời cảm ơn: Thạc sĩ Nguyễn Ngọc Thanh – ĐH Mở Tp Hồ Chí Minh, Thạc sĩ Liêu Mỹ Đơng – ĐH Cơng nghiệp Thực phẩm, Tp Hồ Chí Minh, Kỹ sƣ Nguyễn Hồng Anh giúp tơi nhiều, cô Võ Thị Ly Tao, Thạc sĩ Trần Trúc Thanh, Kỹ sƣ Nguyễn Anh Tuấn, giúp đỡ dụng cụ, hóa chất phịng thí nghiệm cho tơi Đặc biệt, gia đình ln dõi theo động viên tinh thần để tơi tồn tâm q trình học tập TĨM TẮT Đề tài “Nghiên cứu phân lập đánh giá tác động vi sinh vật q trình tạo trầm hƣơng dó bầu (Aquilaria crassna Pierre ex Lecomte)”, đối tƣợng nghiên cứu hai mẫu trầm hƣơng (trầm kiến) dó bầu thu thập từ Hà Tĩnh Bình Định Sau phân lập hai mẫu trầm hƣơng môi trƣờng PDA 28oC sau ngày tiến hành thu nhận bào tử, tuyển chọn sinh vật có khả tạo trầm hƣơng thu đƣợc kết nhƣ sau: (1) Kết phân lập xác định đƣợc vi sinh vật diện mẫu trầm hƣơng chủ yếu loài nấm sợi, chúng thuộc nhóm nấm sợi có hình thái khuẩn lạc, màu sắc khả tạo bào tử khác Trong đó, mẫu (trầm hƣơng – Bình Định) có chủng nấm, ký hiệu chủng nấm phân lập đƣợc là: BĐ 1, BĐ 2, BĐ 3, BĐ 4; kết phân lập mẫu (trầm hƣơng – Hà Tĩnh) có chủng nấm, chúng tơi ký hiệu chủng nấm phân lập đƣợc là: HT 1, HT 2, HT 3, HT Tuy nhiên, chủng nấm BĐ có mẫu trầm hƣơng Bình Định HT mẫu trầm hƣơng Hà Tĩnh có hình thái giống hồn tồn (2) Sau ngày ni cấy môi trƣờng PDA: chủng nấm BĐ mẫu trầm Bình Định có số lƣợng bào tử cao 47,2 x 107(Bào tử/ml), HT mẫu trầm hƣơng Hà Tĩnh có số lƣợng bào tử thấp 14,4 x 107 (Bào tử/ml) (3) Khả làm biến đổi màu gỗ dó bầu (từ trắng kem sang nâu nhạt): Trong chủng nấm phân lập đƣợc mẫu trầm hƣơng, có hai chủng nấm có khả tạo nên tƣơng tác vi sinh vật tế bào gỗ dó bầu BĐ (HT 4), BĐ Kết định danh hai chủng theo phƣơng pháp giải trình tự gen 28S rRNA tra cứu BLAST SEARCH (Phòng xét nghiệm NK-Biotek Tp Hồ Chí Minh), sau giải trình tự gen 28S tra cứu BLAST SEARCH có kết nhƣ sau :  BĐ (HT 4) loài nấm mốc Aspergillus niger (phụ lục 1)  BĐ nấm Bionectria ochroleuca (phụ lục 2) LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chƣa đƣợc cơng bố cơng trình khác Nếu sai tơi hồn tồn chịu trách nhiệm Ngƣời viết cam đoan ... dõi theo động vi? ?n tinh thần để tơi tồn tâm q trình học tập TĨM TẮT Đề tài ? ?Nghiên cứu phân lập đánh giá tác động vi sinh vật q trình tạo trầm hƣơng dó bầu (Aquilaria crassna Pierre ex Lecomte)? ??,... Cơng nghệ Sinh học Mã số : 60.42.80 I TÊN ĐỀ TÀI: Nghiên cứu phân lập đánh giá tác động vi sinh vật q trình tạo trầm hƣơng dó bầu (Aquilaria crassna Pierre ex Lecomte) II NHIỆM VỤ VÀ NỘI DUNG:... màu gỗ dó bầu (Aquilaria crassna Pierre ex Lecomte) vi sinh vật phân lập đƣợc từ mẫu trầm hƣơng  Tuyển chọn vi sinh vật làm đổi màu gỗ dó bầu tiến hành định danh để xác định lồi vi sinh vật có