Đánh giá ảnh hưởng của một số dịch chiết thực vật lên sự sinh trưởng phát triển và hoạt tính enzyme urease của một số vi khuẩn đất

MỤC LỤC Trang LỜI CAM ðOAN ............................................................................................... i LỜI CẢM ƠN....................................................................................................ii MỤC LỤC ........................................................................................................iii DANH MỤC BẢNG......................................................................................... vi DANH MỤC HÌNH ......................................................................................... vii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT ................................................................... ix I. MỞ ðẦU ........................................................................................................ 1 1.1 ðặt vấn ñề ............................................................................................ 1 1.2. Mục ñích, yêu cầu ................................................................................ 3 1.2.1 Mục ñích .............................................................................................. 3 1.2.2. Yêu cầu ................................................................................................ 3 1.3. Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn.................................................. 3 1.3.1. Ý nghĩa khoa học.................................................................................. 3 1.3.2. Ý nghĩa thực tiễn .................................................................................. 3 II. TỔNG QUAN TÀI LIỆU .............................................................................. 4 2.1. Quá trình chuyển hóa ñạm trong ñất..................................................... 4 2.1.1. Quá trình cố ñịnh nitơ trong ñất............................................................ 5 2.1.2. Quá trình amôn hóa .............................................................................. 5 2.1.3. Quá trình nitrat hóa............................................................................... 8 2.2. Giới thiệu về vi sinh vật ñất.................................................................. 9 2.2.1. Thành phần vi sinh vật ñất.................................................................... 9 2.2.2. Vai trò của vi sinh vật ñất................................................................... 10 2.3. Cấu trúc và chức năng của enzyme urease......................................... 11 2.3.1. Cấu trúc phân tử và hoạt ñộng của enzyme urease.............................. 11 2.3.2. Vai trò của enzyme urease.................................................................. 14 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… iv 2.4. Các chất ức chế hoạt ñộng enzyme urease .......................................... 16 2.4.1. Ảnh hưởng của các hợp chất vô cơ ñến khả năng hoạt ñộng của enzyme urease .................................................................................... 16 2.4.2. Một số chất hữu cơ kìm hãm hoạt ñộng enzyme urease ...................... 18 2.5. Vai trò của dịch chiết thực vật trong hoạt ñộng kháng khuẩn ............. 20 III. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ..................................... 24 3.1. Vật liệu............................................................................................... 24 3.2. Môi trường ......................................................................................... 24 3.3. Nội dung nghiên cứu .......................................................................... 25 3.4. Phương pháp nghiên cứu .................................................................... 25 3.4.1. Phương pháp thu thập các mẫu thực vật mục tiêu............................... 25 3.4.2. Phương pháp chiết tách dịch chiết thực vật thô................................... 25 3.4.3. Phương pháp lấy mẫu và xử lý mẫu ñất.............................................. 26 3.4.4. Phương pháp phân lập vi khuẩn amôn trong ñất ................................. 27 3.4.5. Phương pháp làm thuần, quan sát hình thái khuẩn lạc (Nguyễn Lân Dũng, 1972) ....................................................................................... 28 3.4.6. Phương pháp giữ giống ...................................................................... 28 3.4.7. Phương pháp làm tiêu bản soi bào tử vi khuẩn ................................... 29 3.4.8. Phương pháp chiết tách DNA (Miniprep of bacteria genomic DNA (molecular Cell Physiology, 2002)...................................................... 29 3.4.9. Phương pháp phân tích trình tự các isolate phân lập ñược .................. 30 3.4.10. Phương pháp ñánh giá tác ñộng của dịch chiết thực vật ñến sinh trưởng, phát triển của vi khuẩn phân lập ñược .................................... 31 3.4.11. Phương pháp ñánh giá tác ñộng kìm hãm của dịch chiết thực vật thô lên hoạt tính enzyme urease thương mại............................................. 32 IV. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN.................................................................... 34 4.1. Kết quả thu thập các mẫu thực vật mục tiêu từ Sa Pa – Lào Cai ......... 34 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… v 4.2. Kết quả phân lập vi khuẩn amôn hóa trong ñất trồng lúa vùng ñồng bằng sông Hồng Gia Lâm – Hà Nội.................................................... 40 4.3. Kết quả giải trình tự 16s rDNA của các isolate phân lập ñược............ 46 4.3.1. Kết quả nhân 16s rDNA của các chủng phân lập ................................ 46 4.3.2. Kết quả giải trình tự 16s rDNA của các chủng phân lập ñược ............ 47 4.4. Kết quả ñánh giá ảnh hưởng của dịch chiết thực vật ñến sinh trưởng, phát triển của vi khuẩn phân lập ñược .................................... 48 4.5. Kết quả ñánh giá ảnh hưởng của dịch chiết thực vật ñến hoạt tính enzyme urease .................................................................................... 51 4.5.1. Kết quả ñánh giá ảnh hưởng của dịch chiết thực vật chiết bằng nước cất ñến hoạt tính enzyme urease thương mại ...................................... 52 4.5.2. ðánh giá ảnh hưởng của dịch chiết thực vật chiết bằng các loại dung môi hữu cơ khác nhau ñến hoạt tính enzyme urease .................. 56 V. KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ ......................................................................... 65 5.1. Kết luận.............................................................................................. 65 5.2. Kiến nghị............................................................................................ 65 TÀI LIỆU THAM KHẢO ................................................................................ 66

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI TRẦN THỊ ðÀO ðÁNH GIÁ ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ DỊCH CHIẾT THỰC VẬT LÊN SỰ SINH TRƯỞNG PHÁT TRIỂN VÀ HOẠT TÍNH ENZYME UREASE CỦA MỘT SỐ VI KHUẨN ðẤT LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã số: 60 42 80 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS. NGUYỄN TẤT CẢNH TS. NGUYỄN THÀNH TRUNG HÀ NỘI - 2012 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… i LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Các kết quả nghiên cứu trong luận văn là hoàn toàn trung thực và chưa từng công bố trong bất kỳ công trình nào. Hà Nội, ngày 2 tháng 10 năm 2012 Người cam đoan Trần Thị Đào Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… ii LỜI CẢM ƠN Trong quá trình học tập, thực tập tốt nghiệp, tôi đã nhận được sự giúp đỡ tận tình của các đoàn thể, cá nhân trong và ngoài trường. Với lòng biết ơn sâu sắc, tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến hai thầy giáo – PGS. TS. Nguyễn Tất Cảnh, giảng viên Bộ môn Canh Tác-Khoa Nông học và TS. Nguyễn Thành Trung, giảng viên Bộ môn Công nghệ vi sinh-Khoa Công nghệ sinh học-Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội đã tạo điều kiện, hướng dẫn và tận tình giúp đỡ tôi suốt quá trình thực tập và hoàn thành luận văn này. Tôi xin chân thành cảm ơn các thầy cô giáo trong khoa Công nghệ sinh học, các thầy cô giáo; Cán bộ nghiên cứu của Bộ môn Công nghệ vi sinh- Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội đã tạo điều kiện tốt nhất cho tôi trong quá trình học tập cũng như trong thời gian thực tập tốt nghiệp. Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn đến gia đình, bạn bè luôn bên cạnh động viên, giúp đỡ tôi trong quá trình nghiên cứu, học tập và làm thực tập tốt nghiệp. Xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 2 tháng 10 năm 2012 Học viên Trần Thị ðào Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… iii MỤC LỤC Trang LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT ix I. MỞ ĐẦU 1 1.1 Đặt vấn đề 1 1.2. Mục đích, yêu cầu 3 1.2.1 Mục đích 3 1.2.2. Yêu cầu 3 1.3. Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn 3 1.3.1. Ý nghĩa khoa học 3 1.3.2. Ý nghĩa thực tiễn 3 II. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4 2.1. Quá trình chuyển hóa đạm trong đất 4 2.1.1. Quá trình cố định nitơ trong đất 5 2.1.2. Quá trình amôn hóa 5 2.1.3. Quá trình nitrat hóa 8 2.2. Giới thiệu về vi sinh vật đất 9 2.2.1. Thành phần vi sinh vật đất 9 2.2.2. Vai trò của vi sinh vật đất 10 2.3. Cấu trúc và chức năng của enzyme urease 11 2.3.1. Cấu trúc phân tử và hoạt động của enzyme urease 11 2.3.2. Vai trò của enzyme urease 14 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… iv 2.4. Các chất ức chế hoạt động enzyme urease 16 2.4.1. Ảnh hưởng của các hợp chất vô cơ đến khả năng hoạt động của enzyme urease 16 2.4.2. Một số chất hữu cơ kìm hãm hoạt động enzyme urease 18 2.5. Vai trò của dịch chiết thực vật trong hoạt động kháng khuẩn 20 III. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 3.1. Vật liệu 24 3.2. Môi trường 24 3.3. Nội dung nghiên cứu 25 3.4. Phương pháp nghiên cứu 25 3.4.1. Phương pháp thu thập các mẫu thực vật mục tiêu 25 3.4.2. Phương pháp chiết tách dịch chiết thực vật thô 25 3.4.3. Phương pháp lấy mẫu và xử lý mẫu đất 26 3.4.4. Phương pháp phân lập vi khuẩn amôn trong đất 27 3.4.5. Phương pháp làm thuần, quan sát hình thái khuẩn lạc (Nguyễn Lân Dũng, 1972) 28 3.4.6. Phương pháp giữ giống 28 3.4.7. Phương pháp làm tiêu bản soi bào tử vi khuẩn 29 3.4.8. Phương pháp chiết tách DNA (Miniprep of bacteria genomic DNA (molecular Cell Physiology, 2002) 29 3.4.9. Phương pháp phân tích trình tự các isolate phân lập được 30 3.4.10. Phương pháp đánh giá tác động của dịch chiết thực vật đến sinh trưởng, phát triển của vi khuẩn phân lập được 31 3.4.11. Phương pháp đánh giá tác động kìm hãm của dịch chiết thực vật thô lên hoạt tính enzyme urease thương mại 32 IV. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 34 4.1. Kết quả thu thập các mẫu thực vật mục tiêu từ Sa Pa – Lào Cai 34 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… v 4.2. Kết quả phân lập vi khuẩn amôn hóa trong đất trồng lúa vùng đồng bằng sông Hồng Gia Lâm – Hà Nội 40 4.3. Kết quả giải trình tự 16s rDNA của các isolate phân lập được 46 4.3.1. Kết quả nhân 16s rDNA của các chủng phân lập 46 4.3.2. Kết quả giải trình tự 16s rDNA của các chủng phân lập được 47 4.4. Kết quả đánh giá ảnh hưởng của dịch chiết thực vật đến sinh trưởng, phát triển của vi khuẩn phân lập được 48 4.5. Kết quả đánh giá ảnh hưởng của dịch chiết thực vật đến hoạt tính enzyme urease 51 4.5.1. Kết quả đánh giá ảnh hưởng của dịch chiết thực vật chiết bằng nước cất đến hoạt tính enzyme urease thương mại 52 4.5.2. Đánh giá ảnh hưởng của dịch chiết thực vật chiết bằng các loại dung môi hữu cơ khác nhau đến hoạt tính enzyme urease 56 V. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 65 5.1. Kết luận 65 5.2. Kiến nghị 65 TÀI LIỆU THAM KHẢO 66 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… vi DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1. Hàm lượng đạm bị mất ở các dạng khác nhau (Ledgard 2001) 8 Bảng 2.2. Sự phân bố của vi sinh vật trong đất xác định theo chiều sâu đất (Lê Xuân Phương, 2008) 10 Bảng 2.3. Hoạt độ kìm hãm của Quercetin và các glycoside của nó đối với urease từ đậu rựa (Jack bean) và urease từ Lactobusillus fermentum (Shabana, 2010) 18 Bảng 3.1. Thành phần phản ứng PCR cho nhân dòng gen 16s rRNA 30 Bảng 3.2. Trình tự mồi 16s rDNA sử dụng trong nhân dòng gen 31 Bảng 4.1. Danh mục tên các loài thực vật sử dụng làm vật liệu nghiên cứu tại Sa Pa (Ninh Thị Phíp, 2008) 35 Bảng 4.2. Đặc điểm thực vật học của các loài cây sử dụng làm vật liệu nghiên cứu (Ninh Thị Phíp, 2008) 35 Bảng 4.3. Mô tả công dụng và phân bố của các loài nghiên cứu (Ninh Thị Phíp, 2008) 38 Bảng 4.4. Hình thái khuẩn lạc và bào tử của các vi khuẩn amôn hóa được phân lập trong đất trồng lúa vùng đồng bằng sông Hồng – Gia Lâm – Hà Nội 41 Bảng 4.5. Kết quả Blast trình tự 16s rDNA của isolate R17 47 Bảng 4.6. Khả năng kìm hãm của các mẫu dịch chiết thực vật chiết bằng nước đến sinh trưởng, phát triển của các isolate phân lập được 50 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… vii DANH MỤC HÌNH Trang Hình 1. Các quá trình chuyển hóa đạm trong đất (Courtney Johnson, 2005) 4 Hình 2. Trung tâm hoạt động của urease dựa trên phân tích sinh lý và quang phổ (Mobley et al., 1995) 12 Hình 3. Cấu trúc tinh thể trung tâm hoạt động của enzyme urease (Mobley và cộng sự, 1995) 13 Hình 4. Cơ chế hoạt động của enzyme urease (Mobley và cộng sự, 1995) 14 Hình 5. Các hợp chất vô cơ ức chế hoạt động của enzyme urease (Shabana, 2010) 17 Hình 6. Các dạng cấu trúc của quercetin glycoside (Shabana, 2010) 19 Hình 7. Kết quả kiểm tra các mẫu vi khuẩn amôn hóa phân lập được trên môi trường Christene’s urê agar 45 Hình 8. Kết quả nhân gen 16s rDNA với cặp mồi 16sF1 và 16sR1 46 Hình 9. Kết quả Blast trình tự 16s rDNA của isolate R17 48 Hình 10a. Khả năng ức chế sinh trưởng isolate R19 của các mẫu dịch chiết thực vật chiết bằng nước cất 49 Hình 10b. Khả năng ức chế sinh trưởng isolate R20 của các mẫu dịch chiết thực vật chiết bằng nước cất 49 Hình 11a. Ảnh hưởng của dịch chiết dàng mê công và dịch chiết Puồng đìa nhau đến hoạt tính enzyme urease thương mại 53 Hình 11b. Ảnh hưởng của dịch chiết đìa chụt và dịch chiết đìa sài đến hoạt tính enzyme urease thương mại 54 Hình 11c. Ảnh hưởng của dịch chiết tầm gửi ký và dịch chiết tùng diè đến hoạt tính enzyme urease thương mại 54 Hình 11d. Ảnh hưởng của dịch chiết xà đìa pi đến hoạt tính enzyme urease thương mại 55 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… viii Hình 12a. Ảnh hưởng của dịch chiết dàng mê công chiết bằng các dung môi hữu cơ khác nhau đến hoạt tính enzyme urease thương mại 58 Hình 12b. Ảnh hưởng của dịch chiết puồng đìa nhau chiết bằng các dung môi hữu cơ khác nhau đến hoạt tính enzyme urease thương mại 59 Hình 12c. Ảnh hưởng của dịch chiết đìa sài chiết bằng các dung môi hữu cơ khác nhau đến hoạt tính enzyme urease thương mại 60 Hình 12d. Ảnh hưởng của dịch chiết đìa chụt chiết bằng các dung môi hữu cơ khác nhau đến hoạt tính enzyme urease thương mại 61 Hình 12e. Ảnh hưởng của dịch chiết tầm gửi ký chiết bằng các dung môi hữu cơ khác nhau đến hoạt tính enzyme urease thương mại 62 Hình 12f. Ảnh hưởng của dịch chiết tùng diè chiết bằng các dung môi hữu cơ khác nhau đến hoạt tính enzyme urease thương mại 63 Hình 12g. Ảnh hưởng của dịch chiết xà đìa pi chiết bằng các dung môi hữu cơ khác nhau đến hoạt tính enzyme urease thương mại 63 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… ix DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT AHA: Acetohydroxamic acid CT: Công thức DCD: Dicyandiamide DCTV: Dịch chiết thực vật H. pyroli: Helicobacter pyroli IC: Inhibitor concentration MT: Môi trường LB: Luria Broth nBTPT: N-(n-butyl) thiophosphoric triamide NCBI: National center for biotechnology information PCR: Phản ứng chuỗi polymerase (polymerase chain reaction) SB: Sodium phosphate buffer WHO: World health organism [...]... chi t th c v t lên sinh trư ng c a m t s vi sinh v t gây b nh ngư i, v t nuôi; ñánh giá nh hư ng c a d ch chi t th c v t lên ho t ñ ng c a enzyme urease ñư c sinh ra b i H pyroli và ñư c chi t xu t t ñ u r a ñã có nhi u công trình công b Tuy nhiên, vi c nghiên c u nh hư ng c a d ch chi t th c v t ñ n sinh trư ng c a vi khu n ñ t và ho t ñ ng c a enzyme urease ñư c sinh ra b i nhóm vi khu n này còn... n s sinh trư ng, phát tri n và ho t tính enzyme urease c a vi khu n phân l p ñư c 1.3 Ý nghĩa khoa h c và ý nghĩa th c ti n 1.3.1 Ý nghĩa khoa h c ð tài ñã góp ph n xây d ng cơ s d li u ban ñ u v ñ c ñi m hình thái, hóa sinh, phân t c a vi khu n amôn hóa trong ñ t tr ng lúa, ñ ng th i ñánh giá ñư c tác ñ ng c a m t s d ch chi t th c v t ti m năng t i sinh trư ng, phát tri n và ho t tính enzyme urease. .. enzyme urease, xúc tác cho quá trình th y phân urê cung c p d ng nitơ d tiêu cho cây tr ng 2.3 C u trúc và ch c năng c a enzyme urease 2.3.1 C u trúc phân t và ho t ñ ng c a enzyme urease 2.3.1.1 C u trúc phân t c a enzyme urease Enzyme urease là enzyme liên k t v i ion kim lo i Nikel (Ni) C u trúc phân t , s lư ng, ki u dáng c a các ti u c u t , kh i lư ng phân t và trình t amino acid c a enzyme urease. .. ng enzyme urease thư ng có ñ c tính và kh năng kìm hãm không n ñ nh (Xiao et al., 2007) ðã có nh ng nghiên c u ng d ng các h p ch t t nhiên trong vi c ñi u khi n ho t ñ ng enzyme urease sinh ra t vi khu n Helicobacter pyroli trong vi c ñi u tr b nh ngư i và ñ ng v t (Xiao et al., 2007) Tuy nhiên, vi c nghiên c u ng d ng các h p ch t t nhiên chi t xu t t th c v t trong vi c kìm hãm ho t ñ ng enzyme urease. .. khí m và pH thích h p thì vi sinh v t phát tri n nhi u v s lư ng và thành ph n S phát tri n c a vi sinh v t l i chính là nhân t làm cho ñ t thêm phì nhiêu, màu m ðánh giá ñ phì nhiêu c a ñ t ph i tính ñ n thành ph n và s lư ng vi sinh v t N u ch tính ñ n hàm lư ng ch t h u cơ thì khó gi i thích ñư c t i sao m t vùng ñ t chiêm trũng hàm lư ng ch t h u cơ, ch t mùn, ñ m, lân ñ u cao mà cây tr ng phát. .. i v i nhi u loài vi sinh v t H vi sinh v t trong ñ t r t phong phú và ña d ng, bao g m: vi khu n, n m, x khu n, nhi u lo i t o, nguyên sinh ñ ng v t Trong ñó, vi khu n là nhóm chi m nhi u nh t v s lư ng Trong m t gram ñ t có hàng trăm, hàng nghìn tri u vi khu n Chúng bao g m vi khu n háo khí, vi khu n k khí, vi khu n t dư ng, vi khu n d dư ng S lư ng và thành ph n h vi sinh v t ñ t thay ñ i theo ñi... quá trình phân gi i protein và các h p ch t h u cơ khác ch a nitơ t o thành amôniac Các vi khu n có kh năng amôn hóa bao g m n m, x khu n, vi khu n sinh bào t và không sinh bào t ða s vi sinh v t amôn hóa thu c nhóm ña th c Khi sinh trư ng trong môi trư ng ch a nhi u thành ph n protein, các vi sinh v t amôn hóa ñ u ti t enzyme proteinase vào môi trư ng Dư i tác d ng c a enzyme này, protein ñư c th... tryptophan, m t s vi sinh v t có th sinh ra ch t có mùi th i là indon và scaton M t s amin sinh ra trong quá trình kh cacboxyl c a các amino acid có th ñ c v i ngư i và gia súc, ñáng chú ý là histamin, acmatin, putrexin, cadavein * Các nhóm vi sinh v t có kh năng phân gi i protein: Các nhóm vi sinh v t có kh năng phân gi i protein ña d ng và phong phú bao g m vi khu n, n m, x khu n Vi khu n có kh năng... chăn nuôi ñã cho th y, DCD có hi u qu gi m m t ñ m 76% và tăng năng su t c lên 33% Tuy nhiên, các ch t vô cơ kìm hãm ho t ñ ng enzyme urease khi bón vào trong ñ t có nh hư ng ñ n ho t ñ ng sinh h c và qu n th sinh v t trong ñ t 2.4.2 M t s ch t h u cơ kìm hãm ho t ñ ng enzyme urease Ngày càng có nhi u nghiên c u hư ng t i phát hi n nh ng ñ c trưng sinh hóa c a các h p ch t ñư c chi t xu t t th c v t... cacbamate gi i phóng NH3 và lo i nư c kh i cacbamate ñ hoàn thành m t chu kỳ Hình 4 Cơ ch ho t ñ ng c a enzyme urease (Mobley và c ng s , 1995) 2.3.2 Vai trò c a enzyme urease 2.3.2.1 Vai trò c a enzyme urease trong quá trình gây b nh ngư i và ñ ng v t H pyroli ñư c coi là tác nhân gây b nh loét d dày, tá tràng và ung thư d dày ði u ñáng chú ý là H pylori có th t n t i và phát tri n trong môi trư ng . đạm trong đất nông nghiệp. Do đó, đề tài “ðánh giá ảnh hưởng của một số dịch chiết thực vật lên sự sinh trưởng phát triển và hoạt tính enzyme urease của một số vi khuẩn ñất” được thực hiện. dịch chiết thực vật đến hoạt tính enzyme urease 51 4.5.1. Kết quả đánh giá ảnh hưởng của dịch chiết thực vật chiết bằng nước cất đến hoạt tính enzyme urease thương mại 52 4.5.2. Đánh giá ảnh. pháp đánh giá tác động của dịch chiết thực vật đến sinh trưởng, phát triển của vi khuẩn phân lập được 31 3.4.11. Phương pháp đánh giá tác động kìm hãm của dịch chiết thực vật thô lên hoạt tính