IV. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.5.1.Kết quả ựánh giá ảnh hưởng của dịch chiết thực vật chiết bằng nước
cất ựến hoạt tắnh enzyme urease thương mại
Các mẫu dịch chiết thực vật thô chiết bằng nước ựược tiến hành ựánh giá khả năng kìm hãm hoạt tắnh enzyme urease theo phương pháp khuếch tán ựĩa thạch. 30ộl dịch chiết thực vật thô ựược trộn ựều với 3ộl enzyme urease trong 20ộl ựệm sodium phosphat buffer. Hỗn hợp ựược ủ ở 370C, 10Ỗ. đĩa petri chứa môi trường chỉ thị ChristensenỖs Urea Agar ựược ựục các lỗ giếng thạch có ựường kắnh 7mm. Sau 10Ỗ, hỗn hợp ựược nhỏ vào giếng thạch với lượng 40 ộl/CT/giếng. Dịch chiết thực vật sử dụng trong thắ nghiệm ở nồng ựộ không pha loãng, pha loãng 2 lần và pha loãng 4 lần. Giếng ựối chứng không bổ sung dịch chiết thực vật. Khả năng kìm hãm của dịch chiết thực vật lên hoạt tắnh enzyme
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 53 urease thương mại ựược thể hiện qua ựường kắnh vòng phân giải và ựộ ựậm màu hồng quanh giếng thạch. đó là do trên môi trường chỉ thị, enzyme urease hoạt ựộng phân giải urê sinh NH3 làm pH môi trường chuyển từ trạng thái acid (môi trường có màu vàng) sang trạng thái bazơ (môi trường có màu hồng). Dịch chiết thực vật có khả năng kìm hãm hoạt tắnh enzyme urease thì màu hồng xuất hiện quanh giếng thạch nhỏ hơn và nhạt hơn so với giếng ựối chứng không bổ sung dịch chiết thực vật. Kết quả thu ựược sau 30Ỗ nhỏ hỗn hợp mẫu thắ nghiệm vào các giếng ựược thể hiện ở hình 11.
Hình 11ạ Ảnh hưởng của dịch chiết dàng mê công và dịch chiết Puồng ựìa nhau ựến hoạt tắnh enzyme urease thương mại
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 54
Hình 11b. Ảnh hưởng của dịch chiết ựìa chụt và dịch chiết ựìa sài ựến hoạt tắnh enzyme urease thương mại
Hình 11c. Ảnh hưởng của dịch chiết tầm gửi ký và dịch chiết tùng diè ựến hoạt tắnh enzyme urease thương mại
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 55
Hình 11d. Ảnh hưởng của dịch chiết xà ựìa pi ựến hoạt tắnh enzyme urease thương mại
Ghi chú: 1: CT1: 20 ộl SB + 30 ộl dịch chiết thực vật (DCTV) gốc + 3 ộl Urease 2: CT2: 20 ộl SB + 30 ộl DCTV pha loãng 2 lần + 3 ộl Urease
3: CT3: 20 ộl SB + 30 ộl DCTV pha loãng4 lần + 3 ộl Urease 4: CT4: 20 ộl SB + 30 ộl DCTV gốc + 3 ộl nước deion
5: CT5: 20 ộl SB + 30 ộl nước deion + 3 ộl Urease
Kết quả thắ nghiệm cho thấy, tất cả các mẫu dịch chiết thực vật ựều không ảnh hưởng ựến sự ựổi màu của môi trường. điều này ựược thể hiện rõ rệt ở các giếng số 4 không màu hoặc có màu của dịch chiết thực vật, không xuất hiện màu hồng của chất chỉ thị (trừ dịch chiết ựìa sài có khả năng làm thay ựổi màu môi trường chỉ thị).
Các mẫu dịch chiết thực vật không pha loãng ựều có khả năng kìm hãm hoạt ựộng của enzyme urease thương mại ở mức ựộ mạnh. Kết quả ựược thể hiện rõ ở các giếng số 1 thông qua màu hồng xuất hiện trên giếng ựều nhạt màu hơn, ựường kắnh vòng phân giải ựều nhỏ hơn rõ rệt so với ở các giếng số 2 (dịch chiết thực vật ựược pha loãng 2 lần), số 3 (dịch chiết thực vật ựược pha loãng 4 lần) và số 5 (giếng ựối chứng chứa enzyme urease thương mại ko chịu tác ựộng của dịch chiết thực vật). Khi không pha loãng, dịch chiết ựìa chụt, ựìa sài, tầm gửi ký, tùng dìe, xà ựìa pi có khả năng kìm hãm urease mạnh hơn dịch chiết dàng mê công, puồng ựìa nhaụ
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 56 Ở ựộ pha loãng 2 lần, dịch chiết puồng ựìa nhau, ựìa sài và ựìa chụt có khả năng kìm hãm hoạt ựộng của enzyme urease tốt hơn ở ựộ pha loãng 4 lần. điều này ựược thể hiện trên giếng thạch số 2 với ựường kắnh vòng phân giải nhỏ hơn và màu hồng xuất hiện trên môi trường ựều nhạt hơn so với ở giếng thạch số 3 và số 5.
Các mẫu dịch chiết xà ựìa pi, tùng dìe, tầm gửi ký: Màu hồng xuất hiện trên giếng thạch số 2 và số 3 tương ựương nhau, thể hiện rõ hơn so với giếng số 1 nhưng thấp hơn giếng số 5. điều này chứng tỏ, ở ựộ pha loãng 2 lần và 4 lần, các dịch chiết này có khả năng kìm hãm hoạt ựộng của enzyme urease tương ựương nhau và ựều thấp hơn so với dịch gốc không pha loãng.
Dịch chiết dàng mê công, màu hồng và ựường kắnh vòng phân giải xuất hiện trên giếng thạch số 2 và số 3 thể hiện tương ựương nhau và tương ựương với giếng số 5. Kết quả này cho thấy, dịch chiết dàng mê công khi pha loãng không thể hiện khả năng kìm hãm hoạt ựộng của enzyme urease một cách rõ rệt. Từ các kết quả nghiên cứu thu ựược, ựề tài ựi ựến kết luận, dịch chiết xà ựìa pi, ựìa sài, tùng dìe, tầm gửi ký có khả năng kìm hãm mạnh hoạt ựộng của ureasẹ