Nghiên cứu sản xuất vacxin vô hoạt tụ huyết trùng gia cầm bằng công nghệ lên men sục khí tại công ty trách nhiệm hữu hạn dược và vật tư thú y hanvet

Theo Tác giả Phan Thanh Phượng 2000, việc dùng kháng sinh ñồng thời tiêm vacxin Tụ huyết trùng vô hoạt không làm ảnh hưởng ñến quá trình sinh miễn dịch ở gà khỏe mạnh cũng như gà ở trong

BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO

TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI

-


 -

LÊ QUANG HUY

NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT VACXIN VÔ HOẠT TỤ HUYẾT TRÙNG GIA CẦM BẰNG CÔNG NGHỆ LÊN MEN SỤC KHÍ TẠI CÔNG TY TRÁCH NHIỆM HỮU HẠN DƯỢC VÀ VẬT TƯ THÚ Y HANVET

LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP

HÀ NỘI – 2013

BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO

TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI

-


 -

LÊ QUANG HUY

NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT VACXIN VÔ HOẠT TỤ HUYẾT TRÙNG GIA CẦM BẰNG CÔNG NGHỆ LÊN MEN SỤC KHÍ TẠI CÔNG TY TRÁCH NHIỆM HỮU HẠN DƯỢC VÀ VẬT TƯ THÚ Y HANVET

CHUYÊN NGÀNH : THÚ Y

MÃ SỐ: 60.64.0101

NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS BÙI TRẦN ANH ðÀO

HÀ NỘI - 2013

LỜI CAM ðOAN

Tôi xin cam ñoan ñây là công trình nghiên cứu của riêng tôi Các kết quả,

số liệu nêu trong bản luận văn này là hoàn toàn trung thực và chưa ñược bảo vệ

ở một học vị nào khác

Tôi cam ñoan rằng các thông tin trích dẫn trong luận văn ñều ñược chỉ rõ nguồn gốc

LỜI CẢM ƠN

để hoàn thành luận văn này, ngoài sự cố gắng của bản thân tôi còn nhận ựược sự giúp ựỡ tận tình của nhiều cá nhân và tập thể Nhân dịp này cho phép tôi ựược bày tỏ lòng biết ơn chân thành nhất tới:

TS Bùi Trần Anh đào Ờ Cán bộ giảng dạy bộ môn bệnh lý, khoa Thú y, trường đại học Nông nghiệp Hà Nội, thầy ựã trực tiếp hướng dẫn, chỉ bảo tận tình cho tôi trong suốt quá trình nghiên cứu và hoàn thành luận văn này

Các thầy cô giáo trong khoa Thú y, trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Trung tâm nghiên cứu và sản xuất sinh phẩm, công ty Hanvet ựã tạo mọi ựiều kiện thuận lợi giúp ựỡ tôi trong quá trình học tập và nghiên cứu

Tôi xin cảm ơn tới gia ựình, bạn bè và ựồng nghiệp ựã giúp ựỡ, ựộng viên tôi trong suốt quá trình thực hiện luận văn tốt nghiệp

Hà Nội, Ngày 09 tháng 09 năm 2013

Tác giả

Lê Quang Huy

MỤC LỤC

LỜI CAM ðOAN i

LỜI CẢM ƠN ii

MỤC LỤC iii

DANH MỤC BẢNG vi

DANH MỤC HÌNH vii

DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT viii

Phần I MỞ ðẦU 1

1.1 ðặt vấn ñề 1

1.2 Mục ñích của ñề tài 2

1.3 Ý nghĩa của ñề tài 2

Phần II TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

2.1 Vi khuẩn Pasteurella multocida và bệnh Tụ huyết trùng gia cầm 3

2.1.1 Hình thái và tính chất bắt màu 3

2.1.2 ðặc tính nuôi cấy 3

2.1.4 Kháng nguyên của vi khuẩn Pasteurella multocida 6

2.1.5 Bệnh Tụ huyết trùng gia cầm 8

2.2 Một số khái niệm cơ bản về vacxin 15

2.2.1 Khái niệm vacxin 15

2.2.2 ðặc tính cơ bản của vacxin 15

2.2.3 Thành phần của vacxin 17

2.2.4 Yêu cầu của một vacxin 21

2.2.5 Phân loại vacxin 22

2.3 Một số hiểu biết về miễn dịch học thú y 29

2.3.1 Khái niệm miễn dịch 29

2.3.2 Phân loại miễn dịch 30

2.4 Giới thiệu công nghệ lên men sục khí 33

Phần III ðỐI TƯỢNG, NỘI DUNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35

3.1 ðối tượng nghiên cứu 35

3.2 Nội dung nghiên cứu 35

3.2.1 Xác ựịnh môi trường thạch dùng ựể ựếm số lượng vi khuẩn 35

3.2.2 Khảo sát một số yếu tố ảnh hưởng ựến sự phát triển của vi khuẩn Pasteurella multocida trong ựiều kiện nuôi lắc (nhân giống cấp I) 35

3.2.3 Nghiên cứu ảnh hưởng của áp suất bề mặt, tốc ựộ khuấy ựến sự phát triển của vi khuẩn trong quá trình lên men (nhân giống cấp II, sản xuất) 35

3.2.4 Xác ựịnh nồng ựộ formol vô hoạt canh trùng 35

3.2.5 Sản xuất kháng nguyên Tụ huyết trùng gia cầm 35

3.2.6 Hóa nghiệm keo phèn 35

3.2.7 Phối trộn vacxin 35

3.2.8 Kiểm nghiệm vacxin 35

3.2.9 đánh giá chất lượng vacxin trên thực ựịa 36

3.3 Thời gian và ựịa ựiểm nghiên cứu 36

3.3.1 Thời gian nghiên cứu 36

3.3.2 địa ựiểm nghiên cứu 36

3.4 Nguyên liệu nghiên cứu 36

3.5 Phương pháp nghiên cứu 37

3.5.1 Phương pháp chọn giống vi khuẩn cấy giống cấp I 38

3.5.2 Phương pháp xác ựịnh số lượng vi khuẩn 38

3.5.3 Phương pháp nhân giống cấp I 39

3.5.4 Phương pháp nhân giống cấp II và nhân giống sản xuất vi khuẩn bằng công nghệ lên men sục khắ 39

3.5.5 Phương pháp chế tạo keo phèn 42

3.5.6 Phương pháp phối trộn, ra chai vacxin 43

3.5.7 Phương pháp kiểm nghiệm vacxin 44

3.5.8 Phương pháp xử lý số liệu 46

Phần IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 47

4.1 Xác ựịnh môi trường thạch dùng ựể ựếm số lượng vi khuẩn Pasteurella multocida 47

4.2 Khảo sát một số yếu tố ảnh hưởng ựến sự phát triển của vi khuẩn

Pasteurella multocida trong ựiều kiện nuôi lắc 49

4.2.1 Ảnh hưởng của tốc ựộ lắc ựến sự phát triển của vi khuẩn Pasteurella multocida 49

4.2.2 Ảnh hưởng của nồng ựộ huyết thanh ựến sự phát triển của vi khuẩn Pasteurella multocida 51

4.2.3 Ảnh hưởng của nồng ựộ ựường saccharose ựến sự phát triển của vi khuẩn Pasteurella multocida 53

4.2.4 Phối hợp các yếu tố ựể nâng cao hiệu quả nuôi cấy vi khuẩn Pasteurella multocida 55

4.3 Khảo sát ảnh hưởng của tốc ựộ khuấy, áp suất bề mặt ựến sự phát triển của vi khuẩn Pasteurella multocida trong ựiều kiện lên men 56

4.4 Xác ựịnh tỷ lệ formol vô hoạt canh trùng 57

4.5 Sản xuất kháng nguyên Tụ huyết trùng gia cầm 58

4.6 Hóa nghiệm các chỉ tiêu keo phèn 61

4.7 Phối trộn vacxin 61

4.8 Kiểm nghiệm vacxin Tụ huyết trùng gia cầm 62

4.8.1 Kết quả kiểm tra vô trùng 62

4.8.2 Kết quả kiểm tra an toàn 63

4.8.3 Kết quả kiểm tra hiệu lực 64

4.9 đánh giá chất lượng vacxin trên thực ựịa 65

4.9.1 Kết quả kiểm tra an toàn trên thực ựịa 65

4.9.2 Kết quả kiểm tra hiệu lực trên thực ựịa 65

Phần V KẾT LUẬN VÀ đỀ NGHỊ 67

5.1 Kết luận 68

5.2 đề nghị 69

TÀI LIỆU THAM KHẢO 70

DANH MỤC BẢNG

Bảng 4.1 Kết quả xác ñịnh môi trường thạch dùng ñể ñếm số lượng vi khuẩn

Pasteurella multocida 47

Bảng 4.2 Ảnh hưởng của tốc ñộ lắc ñến sự phát triển của vi khuẩn Pasteurella multocida 49

Bảng 4.3 Ảnh hưởng của nồng ñộ huyết thanh ñến sự phát triển của vi khuẩn Pasteurella multocida 51

Bảng 4.4 Ảnh hưởng của nồng ñộ ñường saccharose tới sự phát triển của vi khuẩn Pasteurella multocida 53

Bảng 4.5 Phối hợp các yếu tố ñể nâng cao hiệu quả nuôi cấy vi khuẩn Pasteurella multocida 55

Bảng 4.6 Ảnh hưởng của tốc ñộ khuấy và áp suất bề mặt ñến sự phát triển của vi khuẩn Pasteurella multocida 56

Bảng 4.7 Xác ñịnh tỷ lệ formol vô hoạt canh trùng Tụ huyết trùng gia cầm 58

Bảng 4.8 Sản xuất kháng nguyên Tụ huyết trùng gia cầm 60

Bảng 4.9 Kết quả hóa nghiệm các chỉ tiêu keo phèn 61

Bảng 4.10 Kết quả phối trộn vacxin 62

Bảng 4.11 Kết quả kiểm tra vô trùng 5 lô vacxin 62

Bảng 4.12 Kết quả kiểm tra an toàn vacxin Tụ huyết trùng gia cầm 63

Bảng 4.13 Kết quả kiểm tra hiệu lực vacxin Tụ huyết trùng gia cầm 64

Bảng 4.14 Kết quả kiểm tra an toàn trên thực ñịa 65

Bảng 4.15 Kết quả kiểm tra hiệu lực của vacxin trên thực ñịa 66

DANH MỤC HÌNH

Hình 3.1 Hệ thống lên men tại công ty Hanvet 41

Hình 4.1 Sự phát triển của vi khuẩn Pasteurella multocida trên môi trường thạch NA (trái) và BA (phải) bổ sung 8% máu bò 48

Hình 4.2 Ảnh hưởng của tốc ñộ lắc ñến sự phát triển của vi khuẩn Pasteurella multocida 50

Hình 4.3 Ảnh hưởng của nồng ñộ huyết thanh ñến sự phát triển của vi khuẩn Pasteurella multocida 52

Hình 4.4 Ảnh hưởng của nồng ñộ ñường saccharose tới sự phát triển của vi khuẩn Pasteurella multocida 54

Hình 4.5 Gà chết do Tụ huyết trùng 67

Hình 4.6 Mào, tích thâm 67

Hình 4.7 Xoang bao tim tích nước 67

Hình 4.8 Xuất huyết mỡ vành tim 67

Hình 4.9 Hoại tử ñinh ghim trên bề mặt gan 67

Hình 4.10 Phổi tụ máu 67

DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT

BHI Brain Heart Infusion

CFU Colony forming unit (ñơn vị hình thành khuẩn lạc)

HLA Human leucocyte antigen

Kháng nguyên bạch cầu ở người MHC Major Histocompatibility Complex

Phức hợp tương ñồng tổ chức chính MLD Minimum Lethal Dose (liều gây chết tối thiểu)

Rpm Rotation per minute (vòng/phút)

TCVN Tiêu chuẩn Việt Nam

THT Tụ huyết trùng

TK Thuần khiết

VK Vi khuẩn

2008 ñến năm 2020 là 5%/năm, ñến năm 2020 ñàn gà ñạt 300 triệu con, trong ñó

gà công nghiệp chiếm 33%, sản lượng thịt gà ñạt 1.760 tấn, chiếm 32% tổng sản lượng thịt sẻ các loại; sản lượng trứng ñạt 14 tỷ quả, sản lượng thịt sẻ thủy cầm: 293.000 tấn, cho người/năm ñạt 3,0 kg ðây là những chỉ tiêu vô cùng to lớn, ñòi hỏi từ nay ñến năm 2020 chúng ta phải thực hiện ñồng bộ, có hiệu quả các giải pháp quan trọng như: quy hoạch ñất ñai, chuồng trại, tổ chức sản xuất, phòng chống dịch bệnh, cơ sở chế biến giết mổ, thị trường tiêu thụ…

Chăn nuôi gia cầm ở nước ta có ba phương thức chính: chăn nuôi nông hộ nhỏ lẻ, chăn nuôi bán công nghiệp và chăn nuôi công nghiệp, trong ñó chăn nuôi nông hộ là phổ biến nhất Theo số liệu ñiều tra của Tổng cục Thống kê năm

2004 có tới 65% hộ gia ñình nông thôn chăn nuôi gà theo phương thức này với tổng số gà tại thời ñiểm ước tính khoảng 110 – 115 triệu con (chiếm khoảng 50 – 52% tổng số gà xuất chuồng của cả năm)

Do hình thức chăn nuôi nhỏ lẻ, thả rông kết hợp với việc buôn bán, giết

mổ phân tán không tập trung và không ñảm bảo an toàn sinh học nên dịch bệnh vẫn thường xuyên xảy ra, gây tổn thất lớn về kinh tế Các bệnh thường gặp là: Newcastle, Gumboro, Tụ huyết trùng, Dịch tả Trong ñó, tỷ lệ gia cầm mắc

bệnh Newcastle từ 40 – 53%, bệnh Gumboro 27 – 32%, bệnh Tụ huyết trùng 14 – 15% (Nguyễn Thị Mai, 2009) Theo số liệu ñiều tra của viện chăn nuôi Quốc gia, tỷ lệ chết từ khi mới nở cho ñến lúc trưởng thành của gà thả rông là 47%; chi phí thuốc thú y trị bệnh lên ñến 10 – 12% giá thành

Công ty trách nhiệm hữu hạn dược và vật tư thú y Hanvet là một trong những công ty thuốc thú y lớn trong nước với nhiều sản phẩm ñược ưa chuộng trên thị trường như KTE Hi, KTG, KTV… Với ñội ngũ chuyên gia giàu kinh nghiệm cũng như trang thiết bị hiện ñại, trung tâm ñã và ñang nghiên cứu nhiều loại vacxin quan trọng cho gia súc, gia cầm Bên cạnh ñó, trung tâm vẫn nghiên cứu sản suất và nâng cao chất lượng nhiều loại vacxin truyền thống, trong ñó có vacxin vô hoạt Tụ huyết trùng gia cầm Xuất phát từ thực tiễn trên, chúng tôi

tiến hành thực hiện ñề tài “Nghiên cứu sản xuất vacxin vô hoạt Tụ huyết trùng gia cầm bằng công nghệ men sục khí tại công ty trách nhiệm hữu hạn dược

và vật tư thú y Hanvet”

1.2 Mục ñích của ñề tài

Nghiên cứu một số yếu tố ảnh hưởng ñến sự phát triển của vi khuẩn

Pasteurella multocida trong quá trình sản xuất vacxin

Xây dựng quy trình sản xuất vacxin vô hoạt Tụ huyết trùng gia cầm bằng công nghệ lên men sục khí

1.3 Ý nghĩa của ñề tài

Áp dụng công nghệ lên men sục khí vào sản xuất vacxin

Nâng cao chất lượng, hạ giá thành sản phẩm vacxin giúp cho người chăn nuôi có biện pháp phòng bệnh hữu hiệu ñối với bệnh Tụ huyết trùng gia cầm, ñem lại hiệu quả kinh tế trong chăn nuôi

Phần II TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1 Vi khuẩn Pasteurella multocida và bệnh Tụ huyết trùng gia cầm

2.1.1 Hình thái và tính chất bắt màu

Là loại cầu trực khuẩn, nhỏ, ngắn, hình trứng hay hình bầu dục hoặc hình cầu, là loại trung gian giữa cầu khuẩn và trực khuẩn, kích thước 0,25-0,4×0,4-1,5µm, bắt màu Gram âm Vi khuẩn không có lông, không di ñộng, không hình thành nha bào, có giáp mô nhưng khó thấy, ở trong cơ thể vi khuẩn nhuộm màu hai ñầu nên gọi là vi khuẩn lưỡng cực (Nguyễn Như Thanh, 2006)

Manniger (1919) ñã giải thích tính lưỡng cực của vi khuẩn là do tế bào của vi khuẩn ñang ở giai ñoạn sinh sản Trước khi phân chia, các tế bào phát triển trong cơ thể ñộng vật hay trong môi trường nuôi cấy, vi khuẩn tăng lên về kích thước, nguyên sinh chất tập trung về hai ñầu tế bào nên khi nhuộm thấy vi khuẩn lưỡng cực, phân thân tế bào mất màu

2.1.2 ðặc tính nuôi cấy

Pasteurella multocida (P.multocida) là loại vi khuẩn hiếu khí hoặc yếm khí không bắt buộc, có thể nuôi ở nhiệt ñộ 13 – 38oC, pH từ 7,2 – 7,4 Trên các môi trường nuôi cấy thông thường vi khuẩn phát triển kém, trong môi trường có

bổ sung thêm huyết thanh, máu vi khuẩn phát triển tốt

- Trong môi trường nước thịt: Theo Carter (1952), trong môi trường nước

thịt P.multocida mọc tốt làm ñục môi trường và có mùi tanh ñặc trưng Mùi tanh

này thể hiện rõ nhất ở pha phát triển nhanh, khi nuôi cấy lâu ngày, mùi tanh mất dần

- Trong môi trường thạch thường: Vi khuẩn mọc thành khuẩn lạc dạng S, khuẩn lạc nhỏ, long lanh như hạt sương, mặt khuẩn lạc vồng lên Nuôi lâu khuẩn

lạc có màu trắng ngà dính vào môi trường Trong môi trường này P.multocida

phát triển thành những dạng khuẩn lạc sau:

Dạng S (Smooth): khuẩn lạc trơn, bóng láng, long lanh, mặt vồng, có dung quang sắc cầu vồng, là dạng khuẩn lạc có ñộc lực mạnh, vi khuẩn hình thành dạng khuẩn lạc này thường tạo thành lớp giáp mô nhiều hơn loại khuẩn lạc dạng xù xì

Dạng R (Rough): khuẩn lạc thường dẹt, có rìa nhám xù xì, trơn nhám, có dung quang màu xanh, vi khuẩn hình thành khuẩn lạc dạng này có ñộc lực yếu hơn

Dạng M (Mucoid): khuẩn lạc dạng nhày ướt, có kích thước to nhất, có rìa nhẵn, dung quang sắc cầu vồng yếu hơn dạng S

Hình dạng khuẩn lạc cũng có thể thay ñổi, nếu nuôi cấy lâu ngày thì kích thước khuẩn lạc lớn hơn, nhớt và dính chặt vào mặt thạch (gọi là khuẩn lạc già), khi cấy chuyển nhiều lần giáp mô bị mất, kích thước khuẩn lạc sẽ nhỏ lại, không màu và trong suốt Những vi khuẩn có giáp mô lớn là những vi khuẩn tạo nên khuẩn lạc dạng nhày, ít phát quang, có bờ tròn gọn, những vi khuẩn có giáp mô nhỏ hơn là những vi khuẩn tạo nên khuẩn lạc trơn bóng láng

- Trong môi trường thạch máu: Vi khuẩn mọc tốt hơn trên môi trường thạch thường, kích thước khuẩn lạc to hơn khuẩn lạc trên môi trường thạch thường, vi khuẩn không làm dung huyết Tuy nhiên Diallo và Frost (2000), qua

thực nghiệm cho thấy các chủng vi khuẩn P.multocida khi nuôi cấy trong các

môi trường nhân tạo không có khả năng phân hủy hồng cầu, nhưng các vi khuẩn này sau khi ñược xử lý với dung dịch Tween 80 nồng ñộ 0,5% trong 1 giờ thì khả năng ngày lại xuất hiện Vi khuẩn có khả năng phân hủy hồng cầu gà, cừu, thỏ ngựa và cả hồng cầu người Tuy nhiên hoạt tính ñối với hồng cầu các loài

khác nhau thì khác nhau Môi trường thạch máu ñược sử dụng ñể giữ giống vi khuẩn

Môi trường thạch huyết thanh huyết cầu tố vi khuẩn mọc tốt hơn (Nguyễn Vĩnh Phước, 1964) ðây là môi trường ñặc biệt dùng ñể giám ñịnh, phân lập và

xác ñịnh ñộc lực của vi khuẩn Pasteurella Trên môi trường này vi khuẩn phát

triển thành những khuẩn lạc ñặc biệt: Có hiện tượng phát huỳnh quang khi xem khuẩn lạc bằng kính hiển vi có hai thị kính với ñộ phóng ñại thấp (20 lần) và góc chiếu phản quang của ánh sáng ñèn ñiện là 45o Tùy theo ñộc lực của vi khuẩn

mà màu sắc huỳnh quang của khuẩn lạc khác nhau: Nếu vi khuẩn có ñộc lực cao, thì khuẩn lạc của chúng quan sát thấy: màu xanh lơ, xanh lá mạ chiếm 2/3 diện tích khuẩn lạc về phía ñèn, còn 1/3 diện tích khuẩn lạc màu vàng kim loại, vàng da cam, khuẩn lạc này gọi là Fg (Greenish Fluorescent) Nếu vi khuẩn có ñộc lực vừa, khuẩn lạc của chúng quan sát thấy: màu xanh lơ ít hơn diện tích màu vàng da cam, khuẩn lạc loại này là Fo (Orange Fluorescent) Nếu vi khuẩn

có ñộc lực rất yếu, khuẩn lạc của chúng không có hiện tượng phát huỳnh quang, không màu gọi là loại Nf (Not Fluorescent) Hiện tượng phát huỳnh quang của khuẩn lạc xem rõ khi nuôi cấy sau 24 giờ Nếu ñể lâu sau 72 giờ thì huỳnh quang sẽ mất ñi Cách xem màu sắc của khuẩn lạc trên chỉ áp dụng cho

Pasteurella gây bệnh trên lợn và trâu bò, không áp dụng cho Pasteurella gây bệnh cho gà ðối với Pasteurella gây bệnh cho gia cầm, loại vi khuẩn có ñộc lực

mạnh thì khuẩn lạc của chúng thuộc loại Fo

Khuẩn lạc của vi khuẩn P.multocida tập trung ở hai dạng chính là khuẩn

lạc có dung quang sắc cầu vồng và khuẩn lạc có dung quang màu xanh Với những khuẩn lạc có dung quang màu xanh thường không có hoặc có ít giáp mô, không có ñộc lực hoặc ñộc lực thấp thuộc dạng nhám, xù xì (Carter, 1955)

Theo tài liệu của OIE (2004), Namioka và Mutara (1961), môi trường tốt

nhất cho vi khuẩn P.multocida phát triển là môi trường YPC (yeast extract

peptone L – cystine) có thêm sucrose và sodium sulfate (Na2SO4) Nuôi cấy trên môi trường TSA (Tryptone Soya Agar) kích thước của khuẩn lạc sẽ lớn nhất Price (1969) cho rằng môi trường YPC có bổ sung máu, tính kháng nguyên của vi khuẩn tăng lên

rõ rệt ðây cũng chính là môi trường giúp tái tạo giáp mô của vi khuẩn Vi khuẩn

P.multocida còn có khả năng phát triển trên môi trường chế từ ñậu phụ Tuy nhiên vi

khuẩn P.multocida không phát triển trên môi trường MacConkey (Carter, 1984)

Môi trường gelatin: Cấy theo ñường cấy trích sâu, vi khuẩn mọc thành những khuẩn lạc mịn, hình hạt, không làm tan chảy gelatin

2.1.3 ðặc tính sinh hóa

- Chuyển hóa ñường: P.multocida có khả năng lên men nhưng không sinh

hơi ñường: glucose, saccarose, manit, sozbit, xylo Vi khuẩn không lên men ñường lactose, maltose, arabino…

Oxydase : dương tính (OIE, 2008)

2.1.4 Kháng nguyên của vi khuẩn Pasteurella multocida

2.1.4.1 Kháng nguyên vỏ K

Các kháng nguyên vỏ (K) bao xung quanh thân vi khuẩn che chở kháng nguyên O khỏi bị các Phage tác dụng nhưng cũng ngăn cản sự tiếp xúc giữa kháng nguyên O và kháng thể O Do vậy muốn phát hiện kháng nguyên O phải

phá hủy kháng nguyên K hoặc dùng phương pháp nuôi cấy không cho vi khuẩn hình

thành kháng nguyên giáp mô Kháng nguyên K chỉ có ở vi khuẩn P.multocida tạo

khuẩn lạc dạng S, không có ở vi khuẩn tạo khuẩn lạc dạng nhày (M) và xù xì (R) Kháng nguyên K nhận ñược bằng cách cho canh khuẩn mới nuôi cấy vào nước cất

và chiết xuất trong thời gian 5 phút ở 37oC Kháng nguyên K có hai thành phần là α

và β, chúng ñược cấu tạo từ protein và polysaccarit, ngoài ra còn có một số ít lypopolysaccarit Kháng nguyên K có khả năng gắn với thụ thể của tế bào hồng cầu

Do vậy người ta dùng kháng nguyên này ñể ñịnh type kháng nguyên giáp mô bằng phản ứng ngưng kết hồng cầu gián tiếp (IHA)

2.1.4.2 Kháng nguyên thân O

Kháng nguyên thân O là kháng nguyên thành tế bào của P.multocida, các

kháng nguyên O chỉ ñược bộc lộ khi kháng nguyên K ñược tách ra Namioka và

Murata cho rằng khi khuẩn lạc của P.multocida chuyển từ dạng S sang R thì vi

khuẩn vẫn giữ ñược kháng nguyên O

Kháng nguyên O là một phức hợp protein – lipid – polysaccarit Kháng

nguyên O của vi khuẩn P.multocida chiết xuất ñược nhờ axit trichloacetic, dung

dịch phenol và siêu âm Về ñặc ñiểm sinh học, các kháng nguyên O của

ñộc với thỏ song ñộc lực không lớn lắm Trong các phản ứng huyết thanh, kháng nguyên O có ñặc tính loài rất cao, tuy vậy nó cũng tạo thành phản ứng chéo với

các huyết thanh kháng các vi khuẩn Gram âm khác như P.haemolytica Hiện nay

nhiều thực nghiệm ñã công nhận kháng nguyên O ñóng vai trò quan trọng trong quá trình hình thành miễn dịch, song kháng nguyên K cũng ñóng vai trò không nhỏ trong quá trình này (Nguyễn Bá Hiên, 2001)

Carter và Chenpaga (1981) cho rằng cần phải kết hợp hai phản ứng là: phản ứng ngưng kết hồng cầu gián tiếp và phản ứng kết tủa khuếch tán trên

thạch ñể xác ñịnh serotype của vi khuẩn P.multocida

Theo quy ựịnh của FAO ựể xác ựịnh serotype của P.multocida cần kết

hợp cả hai hệ thống ựịnh type kháng nguyên: ựịnh type kháng nguyên giáp mô

và ựịnh type kháng nguyên thân Hiện nay hai hệ thống ựịnh type của

P.multocida ựược dùng phổ biến là: Namioka (1961) Ờ Carter (1955), Carter (1955) Ờ Heddleston (1972) trong ựó hệ thống Carter Ờ Heddleston ựược dùng phổ biến

2.1.5 Bệnh Tụ huyết trùng gia cầm

2.1.5.1 Khái niệm bệnh

Bệnh Tụ huyết trùng gia cầm (Fowl cholera) là một bệnh truyền nhiễm

cấp tắnh của gia cầm do cầu trực khuẩn Pasteurella aviseptica gây nên Tại nước

ta, bệnh có mặt hầu hết các tỉnh thành gây nhiều thiệt hại về kinh tế cho các trang trại và hộ chăn nuôi gia ựình (Nguyễn Xuân Bình, 1994; Lê Văn Lập và

cs, 2001; Sa đình Chiến, 2001) Bệnh có ựặc ựiểm: gà, vịt, ngan, ngỗng bị bệnh thường chết nhanh như bị ngộ ựộc cấp tắnh với tỷ lệ chết rất cao Bệnh tắch ựặc trưng thường gặp là viêm bao tim tắch nước, mỡ vành tim xuất huyết, gan sưng,

tụ máu và có nhiều ựiểm hoại tử màu vàng

2.1.5.2 Loài mắc bệnh

Trong tự nhiên, hầu hết các loài gia cầm ựều cảm thụ Gà và vịt thường bị bệnh nặng; ngan, ngỗng, gà tây cũng rất mẫn cảm, bệnh càng nặng với những những ựàn gia cầm có số lượng lớn Các loài chim hoang dã như chim sẻ, chim

ri, bồ câu, chim cu cũng mắc bệnh Bệnh ở gia cầm có thể lây sang các loài gia súc khác Lứa tuổi mắc bệnh: bệnh hay gặp ở gia cầm lớn, con non ắt mắc bệnh hơn Ở gà, bệnh thường hay xảy ra nặng nhất trong giai ựoạn 1 Ờ 3 tháng tuổi

2.1.5.3 Phương thức truyền lây

Bệnh lây lan trước tiên do gia cầm bị bệnh, ựang nung bệnh hay gia cầm mang trùng Các chất thải của gia cầm bệnh, việc mổ thịt gia cầm chết dịch làm

bệnh lây lan mạnh Nhiều trường hợp người ta nhận thấy không có sự lây lan nhưng bệnh vẫn tự phát ra ðiều này có thể giải thích bằng hiện tượng ký sinh

của vi khuẩn P.multocida trong cơ thể gia cầm khỏe Vì các ảnh hưởng của

ngoại cảnh hay các biến ñổi bên trong cơ thể làm sức ñề kháng giảm sút Vi khuẩn ký sinh tăng ñộc lực và gây bệnh Khi ấy một lượng lớn vi khuẩn ñược bài xuất ra ngoài và lây lan cho ñàn gia cầm khỏe mạnh xung quanh Ngoại cảnh ảnh hưởng ñến quá trình bệnh bao gồm các yếu tố dinh dưỡng và vệ sinh chăm sóc Thức ăn thiếu và kém phẩm chất (thiếu ñạm và vitamin nhất là vitamin A)

có thể làm bệnh phát ra Bệnh hay xảy ra trong vụ hè thu do gia cầm bị cảm lạnh hoặc bị cảm nóng bởi thời tiết thay ñổi ñột ngột Các trận mưa rào, các cơn gió mùa ñều có thể làm dịch bệnh phát ra Việc vận chuyển gia cầm, chuồng nuôi quá chật chội, nhốt chung gia cầm nhiều nơi tập hợp lại ñều thuận tiện cho phát sinh bệnh Bệnh còn dễ phát sinh trong ñiều kiện vệ sinh chuồng nuôi quá kém

Ao tù, nước ñọng ñều là những ñiều kiện thuận lợi ñể vi khuẩn Pasteurella tồn

tại lâu ngoài thiên nhiên Các nguyên nhân bên trong làm sức ñề kháng giảm sút còn bao gồm việc hoạt ñộng quá sức của buồng trứng ở gà ñẻ, gà thay lông, bệnh ký sinh trùng (Nguyễn Vĩnh Phước, 1978)

2.1.5.4 Cơ chế sinh bệnh

Vi khuẩn có thể có sẵn trong cơ thể hoặc qua niêm mạc ñường tiêu hóa,

hô hấp, xâm nhập vào máu Nếu vi khuẩn có ñộc lực cao, sẽ gây ra tình trạng bại huyết làm cho con vật chết nhanh (thể quá cấp tính) Bệnh ở thể cấp tính khi vi khuẩn có ñộc lực vừa, sau khi vào cơ thể, vi khuẩn sẽ khu trú ở gan gây nên quá trình viêm hoại tử, xâm nhập vào máu và lan ñến các cơ quan phủ tạng khác như tim, phổi gây ra những tổn thương thực thể và rối loạn chức năng Trong trường hợp vi khuẩn có ñộc lực yếu, khi xâm nhập vào cơ thể sẽ không gây ñược chứng bại huyết Vi khuẩn chỉ khu trú ở một số tổ chức gây viêm và hoại tử, bệnh tiến triển ở thể mạn tính

Thể mạn tính

Một số gia cầm qua khỏi thể cấp tính, bệnh sẽ diễn ra ở thể mạn tính kéo dài Cũng có thể gia cầm bị bệnh nhiễm trùng vi khuẩn có ñộc lực thấp nên bệnh diễn ra ở thể mạn tính Các triệu chứng giống như ở gia cầm bị bệnh ở thể cấp tính nhưng nhẹ hơn Con vật có biểu hiện viêm phế quản, phổi mạn tính, thở khò

khè và sưng khớp chân, ñi lại khó khăn, sau bị liệt chân Mắt bị sưng thũng do viêm kết mạc và giác mạc Một số gia cầm bệnh còn thấy bị ngoẹo cổ Bệnh diễn biến khoảng 10 – 15 ngày, gia cầm bệnh nếu không ñược ñiều trị cũng bị chết 100% do kiệt sức (Phạm Sỹ Lăng, 2009)

và các chất ñệm của buồng trứng thường bị sung huyết

Trong trường hợp mạn tính, bệnh tích chủ yếu là ở ñường hô hấp, xoang mũi và các xương xốp ðặc biệt ở gà tây, bệnh tích viêm phổi rất ñiển hình, nhiễm trùng ở màng kết và các mô liên kết, phù mặt, ngoài ra còn có thể thấy ở khớp khuỷu chân sau, bàn chân, xoang bụng và ống dẫn trứng Nhiễm trùng cục

bộ cịn cĩ thể xảy ra ở tai giữa, xương sọ và dẫn tới nghẹo cổ Ở gà tây, hiện tượng nghẹo cổ và sau đĩ là chết cĩ liên quan tới các nhiễm trùng ở xương sọ, tai giữa và màng não

Bệnh tích vi thể

Gan cĩ sự thâm nhiễm bạch cầu trung tính Phổi và các phủ tạng dạng nhu

mơ khác cũng cĩ sự thâm nhiễm với bạch cầu trung tính (Nguyễn Bá Hiên và cộng sự, 2012)

2.1.5.7 Chẩn đốn

Chẩn đốn lâm sàng và giải phẫu bệnh

Về mặt lâm sàng chẩn đốn bệnh Tụ huyết trùng gia cầm khơng khĩ khăn Trong thể cấp tính những bệnh tích đặc trưng như viêm ngoại tâm mạc tích nước, mỡ vành tim xuất huyết, viêm phổi, hoại tử gan và lách khơng sưng cho phép phân biệt giữa bệnh Tụ huyết trùng với Newcastle và thương hàn gà

Chẩn đốn vi khuẩn học

Bệnh phẩm là máu, tim, gan, phổi, tủy xương

- Làm tiêu bản nhuộm Gram

Nếu gia cầm bị bệnh sẽ tìm thấy vi khuẩn nhỏ, ngắn, hình trứng bắt màu Gram âm và lưỡng cực

Trong trường hợp bệnh mạn tính sẽ khĩ phát hiện vi khuẩn, cần nuơi cấy vào các mơi trường thích hợp hoặc tiêm động vật thí nghiệm

Nuơi cấy

Tốt nhất là cấy vào thạch máu, quan sát tính chất mọc, cĩ khả năng dung huyết hay khơng và lại làm tiêu bản nhuộm để kiểm tra hình thái

- Tiêm động vật thí nghiệm

Có thể gây bệnh ngay trên bản ñộng vật hoặc tiêm bệnh phẩm cho thỏ Sau tiêm 24 – 48 giờ thỏ sẽ chết với bệnh tích: nơi tiêm tụ máu, lồng ngực ñầy nước, ruột và phổi xuất huyết, khí quản xuất huyết và có bọt màu hồng (Nguyễn

ñể theo dõi Khi chưa có dịch cần vệ sinh chuồng trại, thức ăn nước uống ñồng thời nâng cao chất lượng thức ăn (ñạm và vitamin) có tác dụng nâng cao sức ñề kháng ñể phòng bệnh Trong bệnh Tụ huyết trùng, sức ñề kháng của cơ thể có ý nghĩa quan trọng trong quá trình sinh dịch vì một tỷ lệ khá lớn gia cầm có vi

khuẩn P.multocida ký sinh trong niêm mạc ñường hô hấp Khi sức ñề kháng suy

giảm, căn bệnh sẽ tự cường ñộc làm bệnh phát ra Ở những trại gà có quy mô lớn, khi có dịch nên giết thịt toàn bộ gà ñã nhiễm bệnh Cách ly triệt ñể những khu vực còn ñang an toàn Nếu ñàn gà có quy mô nhỏ có thể hạn chế tác hại bằng kháng sinh Việc tiêm thẳng vacxin vào ổ dịch thường cho kết quả xấu vì cho ñến nay vẫn chưa có một vacxin nào có hiệu quả tốt Cần tiêu ñộc kỹ chuồng trại, sau vài tuần có thể nuôi lại ñàn mới Việc tạo ñàn mới có thể bằng hai cách: tạo từ ñàn gà lớn trong nhiều năm không mắc bệnh Tụ huyết trùng, hoặc từ các ñàn gà con mới nở do bệnh Tụ huyết trùng gia cầm không truyền qua trứng Việc phòng bệnh Tụ huyết trùng trong chừng mực bằng kháng sinh

và sulfamid trong chừng mực có tác dụng hạn chế tác hại của bệnh trong các ñàn

gà thịt Tuy nhiên việc trộn kháng sinh vào thức ăn phổ biến cũng có thể có những hậu quả nguy hiểm vì dễ gây ra hiện tượng quen thuốc ở những quần thể

vi sinh vật Vì vậy việc phòng bệnh bằng kháng sinh chỉ áp dụng cho gia cầm

nuôi thịt và cần chỉ ñịnh trước khi giết thịt 3 – 5 ngày (Nguyễn Vĩnh Phước, 1978)

Phòng bệnh bằng vacxin: Hiện nay có một số loại vacxin Tụ huyết trùng

vô hoạt ñể phòng bệnh cho gia cầm như vacxin Tụ huyết trùng gia cầm vô hoạt

có keo phèn, vacxin Tụ huyết trùng gia cầm vô hoạt nhũ hóa, vacxin Tụ huyết trùng

gà vô hoạt Sử dụng theo hướng dẫn của nơi sản xuất Tuy nhiên vacxin Tụ huyết trùng thường có hiệu lực không cao và thời gian miễn dịch ngắn, vì thế với những ñàn gà lớn việc sử dụng vacxin là không có ý nghĩa Vacxin chỉ nên sử dụng phòng bệnh cho gia cầm quý hoặc trong ñiều kiện chăn nuôi ở quy mô nhỏ Theo Tác giả Phan Thanh Phượng (2000), việc dùng kháng sinh ñồng thời tiêm vacxin Tụ huyết trùng vô hoạt không làm ảnh hưởng ñến quá trình sinh miễn dịch ở gà khỏe mạnh cũng như gà ở trong ổ dịch Tụ huyết trùng, từ ñó có thể khuyến cáo trong ổ dịch ñối với những gia cầm có nguy cơ ñe dọa nghiêm trọng bệnh Tụ huyết trùng sử dụng biện pháp tạo miễn dịch chủ ñộng và ñiều trị nguyên nhân gây bệnh bằng kháng sinh cùng một lúc Việc làm ñó giảm ñược thiệt hại kinh tế, ñảm bảo an toàn cho ñàn gà và nhanh chóng chấm dứt dịch bệnh

ðiều trị

Chỉ nên áp dụng ñiều trị cho một số gia cầm quý hoặc gia cầm chăn nuôi quy mô nhỏ, khi có một số gia cầm thể hiện bệnh hoặc chết Khi ñã kết luận bệnh, phải tiến hành áp dụng biện pháp ñiều trị dự phòng tức là phải ñiều trị với tất cả gia cầm ñang có trong ñàn Những thuốc kháng sinh có tác dụng tốt ñối với Tụ huyết trùng gia cầm như Ampicillin, Gentamycin, Streptomycin, Kanamycin, Chloramphenicol, Chlotetracylin…khi ñiều trị nên phối hợp kháng sinh nhóm Aminosid (Streptomycin, Gentamycin, Kanamycin) với nhóm Penicilin, Ampicillin hoặc nhóm sulfamid (Tetramindan, Sulfamethoxinpyridazine) với nhóm Tetracylin hoặc Tetracylin với Chloramphenicol thì khả năng ñiều trị khỏi nhanh (Nguyễn Xuân Bình, 2002)

2.2 Một số khái niệm cơ bản về vacxin

2.2.1 Khái niệm vacxin

Theo quan ựiểm trước ựây, vacxin là một chế phẩm sinh học có chứa chắnh mầm bệnh hoặc kháng nguyên của mầm bệnh gây ra một bệnh truyền nhiễm cần phòng Khi sử dụng cho ựộng vật, vacxin tạo ra một ựáp ứng miễn dịch chủ ựộng giúp ựộng vật chống lại ựược sự xâm nhiễm của mầm bệnh tương ứng Vắ dụ: vacxin Tụ huyết trùng ựược làm từ vi khuẩn Tụ huyết trùng ựã ựược

vô hoạt

Ngày nay, khái niệm về vacxin có sự thay ựổi, vacxin không chỉ là chế phẩm sinh học ựược tạo ra từ vi sinh vật hay ký sinh trùng ựược dùng ựể phòng bệnh mà còn ựược làm từ các vật liệu sinh học khác và ựược dùng với mục ựắch không phòng bệnh Vắ dụ vacxin chống khối u làm từ tế bào sinh khối u Như vậy, hiện nay vacxin ựược hiểu với khái niệm rộng hơn: vacxin là chế phẩm sinh học chứa kháng nguyên có thể tạo cho cơ thể một ựáp ứng miễn dịch và ựược dùng với mục ựắch phòng bệnh hoặc với mục ựắch khác

2.2.2 đặc tắnh cơ bản của vacxin

Một vacxin phải ựảm bảo 4 ựặc tắnh cơ bản:

2.2.2.1 Tắnh sinh miễn dịch hay tắnh mẫn cảm

đó là khả năng tạo ra ựáp ứng miễn dịch dịch thể hay tế bào hoặc cả hai Tắnh sinh miễn dịch phụ thuộc vào kháng nguyên của cơ thể nhận kắch thắch có nghĩa là phụ thuộc vào tắnh lạ của kháng nguyên, ựường ựưa kháng nguyên và

cơ ựịa của cá thể ựộng vật

2.2.2.2 Tắnh kháng nguyên hay tắnh sinh kháng thể

Một vacxin khi ựưa vào cơ thể phải có khả năng kắch thắch cơ thể sản sinh

ra kháng thể Các yếu tố gây bệnh có thể có nhiều Epitop khác nhau Trong ựó

có thể có Epitop quá nhỏ (Hapten) không có tính sinh kháng thể nếu ñể nguyên Muốn chúng sinh kháng thể chống lại mầm bệnh cần ñổi chúng thành có tính kháng nguyên, thường kết hợp chúng với một protein mang tải vô hại

2.2.2.3 Tính hiệu lực

Tính hiệu lực nói lên khả năng bảo hộ ñộng vật sau khi sử dụng vacxin Một vacxin ñưa vào cơ thể, nhiều kháng thể ñược tạo ra nhưng không phải loại nào cũng có hiệu lực tức là tiêu diệt ñược yếu tố gây bệnh Do yếu tố gây bệnh

có nhiều kháng nguyên khác nhau nên trong bào chế vacxin trước tiên phải làm sao cho ñáp ứng miễn dịch chống lại những nhóm quy ñịnh kháng nguyên thiết yếu, nghĩa là nếu ñánh vào ñó thì yếu tố gây bệnh bị tiêu diệt hoặc chí ít cũng không còn khả năng sinh hại nữa Vì thế, trong nghiên cứu sản xuất vacxin hiện nay người ta ñang có những cố gắng phân lập những kháng nguyên hay nhóm quy ñịnh kháng nguyên thiết yếu ñể làm cho vacxin ñược thuần khiết và tiến tới

Tuy nhiên, hiệu lực của một vacxin phụ thuộc vào nhiều yếu tố như: bảo quản, vận chuyển và kỹ thuật tiêm phòng Vì vậy, người ta xây dựng một môn

khoa học mới gọi là vacxin học (vaccinology) mà mục ñích là nghiên cứu mọi biện pháp từ lúc sản xuất ñến tiêu dùng ñể tăng tính hiệu lực của vacxin

sử dụng phải thấp hơn rất nhiều so với liều gây ñộc

Sau sản xuất, vacxin phải ñược thử tính an toàn qua nhiều bước thử trong phòng thí nghiệm, trên thực ñịa, thử ở quy mô nhỏ và ñại trà Tần suất và mức

ñộ nặng nhẹ của các phản ứng phụ nếu có phải ñược xác ñịnh trước khi ñược ñem ra dùng trung, nhưng vẫn phải ñược theo dõi hết sức cẩn thận (Phạm Sỹ Lăng, Nguyễn Bá Hiên, 2010)

xâm nhập và gây bệnh của mầm bệnh Khả năng kích thích sinh miễn dịch dịch thể và miễn dịch tế bào của kháng nguyên gọi là tính kháng nguyên Tính kháng nguyên của một kháng nguyên trong vacxin mạnh hay yếu phụ thuộc vào tổng

số nhóm quyết ñịnh kháng nguyên, trọng lượng phân tử, thành phần hoá học, cấu trúc lập thể và khả năng tích ñiện của các phân tử kháng nguyên Một kháng nguyên tạo phòng vệ tốt cho cơ thể, ngoài tính kháng nguyên mạnh cần có tính ñặc hiệu cao Tính ñặc hiệu của kháng nguyên phụ thuộc vào tính chất và cấu trúc của các nhóm quyết ñịnh tính kháng nguyên Tính ñặc hiệu của kháng nguyên cao không chỉ ñặc trưng tương ñối với loài mà còn ñặc trưng với cả type

và subtype Kháng nguyên ñể chế tạo vacxin phòng bệnh truyền nhiễm có thể bao gồm kháng nguyên của thân, lông, vỏ bọc và ñộc tố của chúng sản sinh ra trong quá trình phát triển như vacxin phòng bệnh Tụ huyết trùng cho gia súc, gia cầm, vacxin phó thương hàn lợn Kháng nguyên cũng có thể là thành phần của các yếu tố gây bệnh của vi sinh vật như vacxin chứa kháng nguyên F4, F5, F6

của E.coli phòng bệnh tiêu chảy cho lợn con, bê, nghé, phù ñầu lợn hay vacxin

chứa kháng nguyên VP2 của virus gumboro dùng phòng bệnh Gumboro cho gà hoặc Kháng nguyên là ADN, protein tái tổ hợp như vacxin tái tổ hợp phòng bệnh lở mồm long móng và bệnh lưỡi xanh, vacxin Trovac phòng bệnh cúm gia cầm H5N1 và bệnh ñậu cho gà

Thành phần hoá học của kháng nguyên vi sinh vật trong vacxin ñều là protein, lypopolysaccarit, polysaccarit (kháng nguyên vỏ bọc) Trong các loại kháng nguyên của vi sinh vật, kháng nguyên có bản chất là protein và lypopolysaccarit có tính kháng nguyên mạnh, tính ñặc hiệu cao Kháng nguyên

có bản chất polysaccarit thường có phản ứng chéo với nhau vì chúng có những nhóm ñường cấu tạo nên các quyết ñịnh kháng nguyên giống nhau

2.2.3.2 Chất bổ trợ

Thuật ngữ “chất bổ trợ - adjuvant” (trong tiếng la tinh adjuvare có nghĩa

là giúp ñỡ) lần ñầu tiên ñược Ramon ñặt ra năm 1926 cho những chất ñược sử dụng ñể kết hợp với kháng nguyên ñặc hiệu, phức hợp này sản sinh nhiều miễn dịch hơn so với kháng nguyên ñược sử dụng riêng lẻ (Derek T O’Hagan, 2000) Vậy chất bổ trợ của vacxin là những chất có hoạt tính kích thích miễn dịch không ñặc hiệu dùng bổ sung vào vacxin ñể nâng cao hiệu quả và ñộ dài miễn dịch Chất bổ trợ của vacxin có ba tác dụng chính: Hấp thu và lưu giữ kháng nguyên trong cơ thể lâu hơn, không bài thải nhanh kháng nguyên Tạo kích thích ñáp ứng miễn dịch không ñặc hiệu của cơ thể Giảm kích thích phản ứng của ñộc tố (nếu có) trong vacxin ñối với cơ thể Căn cứ vào bản chất, thành phần cấu tạo của chất bổ trợ, người ta chia chất bổ trợ ñang ñược dùng trong chế tạo vacxin thành các nhóm sau:

và toàn thân Trong thú y người ta hay dùng keo phèn trong các vacxin vi khuẩn

vô hoạt

Chất bổ trợ hữu cơ

Bao gồm các loại dầu thực vật như dầu hướng dương, dầu lạc, dầu Oliu, các loại mỡ ñộng vật, các sản phẩm của dầu khoáng hoặc montanide 50 của

Pháp… Các chất bổ trợ hữu cơ khi hỗn hợp với kháng nguyên sẽ tạo thành dạng nhũ tương nước trong dầu Ở dạng nhũ tương này, kháng nguyên nằm trong huyễn dịch dầu ðể khắc phục nhược ñiểm vacxin nhũ tương nước trong dầu như dễ phân lớp, rít kim khi tiêm, về sau người ta ñã nghiên cứu chế tạo ra vacxin dạng nhũ tương kép nước trong dầu trong nước Khi vacxin nhũ có chứa

xác vi khuẩn (thường dùng xác vi khuẩn họ Mycobacterium) ñược gọi là vacxin

nhũ hoàn toàn, vacxin nhũ không chứa xác vi khuẩn ñược gọi là vacxin nhũ không hoàn toàn

Tác dụng của chất bổ trợ dầu trong vacxin cũng tương tự như tác dụng của chất bổ trợ vô cơ Nhờ các phức hợp nhũ kháng nguyên – dầu – nước mà kháng nguyên ñược tự do giải phóng từ từ vào cơ thể ñể kích thích sản sinh kháng thể và tế bào miễn dịch ñặc hiệu kéo dài, ñồng thời các hạt nhũ dầu cũng

di chuyển từ chỗ tiêm vào hạch lympho hoặc ñến các cơ quan có thẩm quyền miễn dịch ñể kích thích miễn dịch không ñặc hiệu Kết quả là liều vacxin giảm, hiệu lực miễn dịch tăng cao, thời gian miễn dịch kéo dài

Chất bổ trợ vi sinh vật

Thường dùng xác của một số loài vi khuẩn như M.tubercullosis hay

Lypopolysaccarit Gồm các loại sau:

- Sản phẩm từ vi khuẩn

- Trợ chất ñầy ñủ của Freund’s

- (CFA, FCA) (M.tubercullosis chết)

- DETOXTM (thành tế bào Mycobacterium phlei)

+ Butyl – Este – MDP (MurametidTM)

+ Threonyl – MDP (Termurtid)

+ Dipalmitoyl phosphatidylethanolamin – MTP (MTP – PE)

+ Glycerol dipalmitat – MDP (Immther) – Dipalmitoxy – Propylamid – MDP (TheramidTM)

- Gamma inulin và algammulin

- β – glucan (α – glucan, pleuran)

- Monophosphoryl lipid A (MPL’’)

- Neuramidase – galactose oxydase (NAGO)

- Klepsiella pneumonia glycoprotein

- Bordetella pertussis

- Corynebacterium parvum (Nguyễn Bá Hiên, 2009)

2.2.4 Yêu cầu của một vacxin

ðể ñáp ứng yêu cầu phòng bệnh, một vacxin phải ñáp ứng ñược những yêu cầu tối thiểu sau: Trước hết, vacxin phải chứa kháng nguyên và các kháng nguyên ñó phải ñược hệ thống miễn dịch coi là mục tiêu tấn công Các kháng nguyên trong vacxin phải kích thích sinh ñáp ứng miễn dịch phòng hộ, nghĩa là kháng nguyên không kích thích các ñáp ứng sinh miễn dịch không phòng hộ Sự phòng hộ phải ñạt ñược khi cơ thể tiếp xúc với mầm bệnh và lý tưởng nhất là sự phòng bệnh này phải kéo dài Vacxin phải ñáp ứng miễn dịch mạnh và tốt nhất

là không cần chất bổ trợ Vacxin kích thích sinh ñáp ứng miễn dịch tốt mà không cần dùng nhắc lại và tốt nhất là ñường dùng vacxin ñơn giản Vacxin phải

an toàn, an toàn là tiêu chuẩn ñánh giá khi sử dụng vacxin trên chính ñối tượng ñược tiêm phòng, tức là vacxin không gây nên bệnh, các phản ứng có hại, hoặc gây chết ở con vật ñược tiêm vacxin Vacxin phải vô trùng, tức là vacxin chỉ chứa duy nhất một hay một loại kháng nguyên ñược dùng làm vacxin mà không

bị nhiễm tạp các loại khác Về mặt thực hành, giá một liều vacxin phải thấp, ổn ñịnh về mặt sinh học, dễ sử dụng, ít tác dụng phụ (Tô Long Thành, 2011)

2.2.5 Phân loại vacxin

2.2.5.1 Vacxin vô hoạt (inactivated vaccines)

Vacxin vô hoạt là các vi sinh vật, trước ñó là cường ñộc, ñã ñược giết chết bằng hóa chất hoặc bằng nhiệt Kháng nguyên ñể chế tạo vacxin loại này thường

là toàn thân virus hay vi khuẩn Một số loại vacxin chết thường dùng trong thú y: Tụ huyết trùng gia cầm, Tụ huyết trùng lợn, Tụ huyết trùng trâu bò, lở mồm long móng, cúm gia cầm Hầu hết các vacxin này tạo ñáp ứng miễn dịch không hoàn chỉnh hoặc thời gian miễn dịch ngắn và thường phải dùng liều bổ sung

Hiện nay, chất lượng của vacxin vô hoạt ñã ñược cải thiện rõ rệt nhờ việc

sử dụng các chất bổ trợ có chất lượng cao Mặc dù trước ñây vacxin nhược ñộc coi là tạo ñược miễn dịch cao hơn và dài hơn so với vacxin vô hoạt; nhưng ñến nay với các chất bổ trợ mới, vacxin vô hoạt ñã dần dần thay thế cho vacxin nhược ñộc trên thị trường thế giới, nhất là tại các nước có trình ñộ phát triển khoa học kỹ thuật cao người ta không muốn gặp phải nguy cơ xuất hiện lại các chủng vi sinh vật có khả năng gây bệnh cho gia súc và gia cầm từ vacxin, dù là với một xác suất nhỏ nhất

Ưu ñiểm của vacxin vô hoạt

Vacxin vô hoạt có thể tạo nên sự bảo hộ cao nếu như dùng ñúng liều và hướng dẫn sử dụng Việc tiêm nhắc lại là cần thiết, một trong những ñiều nguy hiểm của vacxin sống nhược ñộc là khả năng trở lại cường ñộc, nhưng ở vacxin

vô hoạt thì không có Bởi vì mầm bệnh chết nên không thể gây hại cho cơ thể, vacxin có thể ñông khô nên vận chuyển dễ dàng

Nhược ñiểm của vacxin vô hoạt

Một số loại vacxin vô hoạt có chất lượng thấp hơn so với vacxin nhược ñộc cùng loại Vacxin nhược ñộc có thể tạo nên ñáp ứng miễn dịch mạnh khi sử dụng với một liều nhưng ñối với vacxin vô hoạt cần phải tiêm nhắc lại ðiều ñó

bất tiện ở những nơi phải tiêm với số lượng lớn cá thể Một trong những vấn ựề nữa gặp phải ở vacxin vô hoạt là chúng không có kắch thắch hiệu quả ựối với ựáp ứng miễn dịch cục bộ hoặc miễn dịch niêm mạc (mucosal immunity) trong khi

ựó vacxin nhược ựộc có kắch thắch hiệu quả Giá thành của vacxin khá cao hơn

so với vacxin nhược ựộc cùng loại (UKHealthcentre, 2013)

2.2.5.2 Vacxin nhược ựộc (live, attenuated vaccines)

để khắc phục các nhược ựiểm của vacxin ựược tạo ra từ vi sinh vật cường ựộc ựã ựược vô hoạt có tắnh sinh miễn dịch thấp, các nhà khoa học ựã nghiên cứu chế tạo vacxin là vi sinh vật sống bằng cách làm giảm ựộc tắnh của vi sinh vật ựó thể hiện bằng khả năng gây bệnh ựối với vật chủ tự nhiên Loại vacxin này có khả năng kắch thắch ựáp ứng bảo vệ cơ thể tốt hơn nhưng nó lại có rủi ro ựối với những cơ thể có sức ựề kháng kém

Vacxin sống, nhược ựộc hoặc ựộc lực thấp là vacxin ựược tạo ra từ các vi sinh vật sống bằng cách nuôi dưới các ựiều kiện không thuận lợi về nhiệt ựộ hoặc không thắch ứng với vật chủ tự nhiên làm chúng bị yếu hoặc mất hẳn ựộc tắnh (tắnh gây bệnh) hoặc ựược lựa chọn trong tự nhiên do ựặc tắnh nhược ựộc hoặc không ựộc ựối với vật chủ tự nhiên

Vacxin nhược ựộc thường tạo ựáp ứng miễn dịch dài hơn Một số vacxin sống, nhược ựộc dùng trong thú y là vacxin nhược ựộc nhân tạo gồm vacxin Newcastle hệ I, vacxin Flury LEP, HEP, vacxin IB, vacxin ILT và vacxin nhược ựộc tự nhiên gồm vacxin Lasota, vacxin Marek, vacxin V4, F, B

Ưu ựiểm của vacxin nhược ựộc

Vacxin nhược ựộc hoạt hóa tất cả các thành phần của hệ thống miễn dịch,

có thể kắch thắch hình thành ựáp ứng IgG dịch thể và IgA cục bộ và kắch thắch ựáp ứng miễn dịch ựối với tất cả các kháng nguyên phòng hộ Quá trình vô hoạt

có thể thay ựổi tắnh kháng nguyên đáp ứng miễn dịch kéo dài hơn, có nhiều

phản ứng chéo hơn, gây ñáp ứng miễn dịch nhanh ở phần lớn vật chủ ñược dùng vacxin Dễ dàng sử dụng vacxin trong trường hợp dùng cho uống hoặc phun khí dung, dễ dàng vận chuyển trên thực ñịa vì thể tích nhỏ Có thể sử dụng ñể loại

bỏ mầm bệnh cường ñộc lưu hành trong quần thể vật chủ

Nhược ñiểm của vacxin nhược ñộc

Có thể gây ñột biến, trở lại cường ñộc, vi sinh vật trong vacxin có thể lây lan tới vật chủ trong cùng ñàn không ñược tiêm vacxin và ñôi khi ñược coi là một ưu ñiểm khi muốn gây miễn dịch cho quần thể nơi mà không phải lúc nào tỷ

lệ tiêm phòng cũng ñạt 100% Sự lưu hành của vi sinh vật nhược ñộc dùng trong vacxin trong thực tế là khó kiểm soát và vì thế nếu ñặc tính nhược ñộc không ổn ñịnh, vi sinh vật có thể trở lại cường ñộc hoặc ñột biến Phạm vi ứng dụng của vacxin ở vùng khí hậu nóng bị hạn chế do ñiều kiện bảo quản Mầm bệnh, mặc

dù nhược ñộc, có thể “gây bệnh” ở mức ñộ rất thay ñổi trên vật chủ bị suy giảm miễn dịch Hiện tại, có một xu hướng chế tạo các chủng vi sinh vật nhược ñộc hoặc không ñộc ñể làm vacxin sống, nhược ñộc bằng cách làm bất hoạt (vô hiệu hóa) hoặc phá hủy (cắt bỏ) các gen mã hóa cho ñộc lực của tác nhân gây bệnh

Vì nguồn kháng nguyên hầu như không bị thay ñổi do vi sinh vật tiếp tục sinh sản trong cơ thể vật chủ nên vacxin này có hiệu lực rất cao, khả năng bảo vệ cơ thể rất tốt Tuy nhiên, trong các nghiên cứu về mức ñộ an toàn của vacxin cho thấy, các chủng vacxin ñược tạo ra lại có tính di truyền không ổn ñịnh Các gen ñộc ñã bị bất hoạt nhưng sau một thời gian nó có thể phục hồi và vì thế vacxin sống nhược ñộc cũng có thể mang rủi ro lớn

Gần ñây, nhờ sự phát triển của công nghệ sinh học phân tử, các nhà khoa học ñã nghĩ ra việc tạo vacxin phòng bệnh mới dựa vào vacxin tiểu phần Vì là kháng nguyên tiểu phần nên vacxin này có ñộ an toàn rất cao và khả năng bảo

hộ vẫn ñược ñảm bảo ðây là loại vacxin ñang ñược quan tâm nghiên cứu hàng ñầu và sẽ ñược sử dụng rộng rãi trong tương lai không xa

2.2.5.3 Vacxin giải ñộc tố (toxoid vaccines)

Với các vi khuẩn sản sinh ra ñộc tố hoặc chất hóa học có hại, vacxin giải ñộc tố có thể là giải pháp Vacxin này ñược sử dụng khi ñộc tố của vi khuẩn là yếu tố chính gây nên bệnh ở gia súc Các nhà khoa học ñã nhận thấy rằng học có thể làm vô hoạt ñộc tố bằng việc sử dụng formalin và nước vô trùng ðộc tố ñược giải ñộc ñược gọi là giải ñộc tố, an toàn trong việc sử dụng vacxin

Khi hệ thống miễn dịch bắt gặp vacxin chứa ñộc tố không gây hại, nó học cách ngăn ngừa ñộc tố tự nhiên Hệ thống miễn dịch sản sinh kháng thể phát hiện và ngăn chặn chặn ñộc tố, vacxin uốn ván và vacxin bạch hầu là những ví

dụ về loại vacxin này (NIAID, 2012)

2.2.5.4 Vacxin dưới ñơn vị (subunit vaccines)

Thay vì dùng toàn thân vi khuẩn, vacxin dưới ñơn vị sử dụng duy nhất các kháng nguyên kích thích tốt nhất ñến hệ thống miễn dịch Trong một vài trường hợp, vacxin này sử dụng những epitop – một phần ñặc hiệu của kháng nguyên ñược kháng thể hoặc tế bào lympho T nhận biết và gắn Bởi vì vacxin dưới ñơn

vị chỉ chứa duy nhất kháng nguyên thiết yếu và không phải các phân tử khác tạo nên vi khuẩn do vậy khả năng xảy ra phản ứng bất lợi của vacxin là thấp Vacxin dưới ñơn vị có thể chứa từ 1 ñến 20 hoặc nhiều hơn về số lượng kháng nguyên,

vì vậy việc nhận dạng các kháng nguyên có khả năng kích thích tốt ñến hệ thống miễn dịch là phức tạp Khi các nhà khoa học làm ñiều ñó, họ có thể làm một trong hai cách sau: nuôi vi khuẩn trong phòng thí nghiệm, sau ñó sử dụng hóa chất ñể phá và lấy lại phần kháng nguyên quan trong hoặc nuôi cấy kháng nguyên từ vi khuẩn sử dụng công nghệ ADN, vacxin ñược sản xuất theo cách này ñược gọi là vacxin dưới ñơn vị tái tổ hợp (NIAID, 2012)

Ưu ñiểm của vacxin dưới ñơn vị

Vacxin dưới ñơn vị có chứa các kháng nguyên tinh khiết hơn vacxin toàn thân Các Vacxin dưới ñơn vị không có khả năng gây nhiễm vì thế chúng an toàn ngay cả khi vật chủ bị suy giảm miễn dịch và ít khi chúng có tác dụng phụ Một số vacxin protein có khả năng cảm ứng sinh miễn dịch phòng hộ tốt là các

thành phần giải ñộc tố uốn ván, giải ñộc tố bạch hầu Các ñộc tố này ñã ñược xử

lý ñể loại bỏ ñộc lực của chúng và chúng vẫn còn khả năng kích thích ñáp ứng miễn dịch hình thành kháng thể có khả năng trung hòa các ñộc tố tự nhiên

Nhược ñiểm của vacxin dưới ñơn vị

Các ñiểm bất lợi của vacxin dưới ñơn vị là vì các kháng nguyên có thể không giữ ñược cấu trúc không gian nguyên thủy của chúng, vì thế kháng thể ñược cơ thể vật chủ tạo ra ñề kháng lại protein dưới ñơn vị có thể không nhận biết kháng nguyên ñó nằm trên bề mặt mầm bệnh Nhìn chung, protein riêng lẻ không kích thích hệ thống miễn dịch tốt như vacxin toàn thân mầm bệnh Protein tự nhiên sau khi tách chiết thường vẫn không tinh khiết

2.2.5.5 Vacxin peptide tổng hợp

Là các sản phẩm có cấu trúc hóa học ñã ñược xác ñịnh và người ta có thể coi ñây là một dạng vacxin dưới ñơn vị

Ưu ñiểm của vacxin peptide tổng hợp

Ổn ñịnh trong ñiều kiện nhiệt ñộ của môi trường Không có tác nhân gây bệnh hoặc các protein khác trong thành phẩm Dễ dàng thiết kế ñể kích thích ñáp ứng miễn dịch mong muốn Peptide không có cấu trúc như peptide tự nhiên (nguyên thủy) và không gắn kết với các phần tử nhận biết mẫu hình phân tử (pattern recognition molecules – PRM) có mặt trên các tế bào thực bào trung gian có ñặc tính thúc ñẩy quá trình “nuốt” mầm bệnh Có thể nâng cao tính sinh miễn dịch của các peptide bằng cách ñưa chúng vào cơ thể cùng với các hạt lipid nhỏ Những hạt này sẽ vận chuyển các peptide thẳng vào bào tương của các tế bào của vật chủ và sử dụng các peptide này sau ñó ñược tổng hợp nhân tạo với

số lượng lớn ñể kích thích sinh miễn dịch Các vacxin peptide này chủ yếu chứa các peptide có khả năng kích thích hình thành ñáp ứng miễn dịch phòng hộ

Nhược ñiểm của vacxin peptide tổng hợp

Hạn chế duy nhất của vacxin peptide tổng hợp là nó gắn kết yếu với các alleles HLA của MHC vì thế một số peptide ñược chế tạo ra không có khả năng tạo miễn dịch phòng hộ

2.2.5.6 Vacxin cộng hợp (conjugate vaccines)

Vacxin cộng gộp có chứa thành phần polysaccharides của vi khuẩn, liên kết với protein Sự liên kết giữa polysaccharide với protein khiến cho ñáp ứng miễn dịch chống lại vi khuẩn thông qua polysaccaride có chứa trong vacxin lên

bề mặt tế bào miễn dịch do vậy vacxin phòng chống ñược bệnh (BVGH, 2013)

2.2.5.7 Vacxin tổ hợp (recombinant vector vaccines)

Vacxin tái tổ hợp là các vacxin trong ñó các gen mã hóa cho các kháng nguyên quan tâm ñược gắn vào bộ gen của một vật mang là một vi khuẩn hay một virus Vật mang sẽ tổng hợp và giải phóng ra các kháng nguyên ñược dùng làm vacxin hoặc kháng nguyên có thể ñược tinh khiết và sử dụng như một vacxin dưới ñơn vị, bằng cách kết hợp ADN của một mầm bệnh vào một vi khuẩn khác, có thể tạo ra miễn dịch chống lại các bệnh có quá trình nhiễm trùng phức hợp

Ưu ñiểm của vacxin tái tổ hợp so với vacxin dưới ñơn vị tách chiết

Vacxin tái tổ hợp an toàn hơn so với vacxin nhược ñộc ứng dụng công nghệ ADN tái tổ hợp cũng có thể tạo ra các vacxin nhược ñộc an toàn hơn Giá thành rẻ và các lô sản phẩm ñồng nhất trên nuôi cấy tế bào, môi trường nuôi nấm men hoặc vi khuẩn Việc tách chiết protein tự nhiên từ vi khuẩn, virus hay

từ mô bào của ñộng vật phức tạp hơn nhiều so với việc tách chiết protein từ môi trường nuôi cấy nhân tạo

Nhược ñiểm của vacxin tái tổ hợp

Cùng mầm bệnh có thể rất ña dạng về mặt kháng nguyên Vacxin có thể

có hiệu quả với chủng này mà không có tác dụng với chủng khác Một protein tái tổ hợp ñơn giản có thể không kích thích ñược ñủ tất cả các thành phần của hệ thống miễn dịch, ví dụ các carbonhydrate sẽ có tính sinh miễn dịch kém do quá trình sinh tổng hợp không chính xác

2.2.5.8 Vacxin ADN

Trong những năm gần ñây, người ta ñã chế tạo ra một loại vacxin là ADN của mầm bệnh và ñược gọi là vacxin ADN

Ưu ñiểm của vacxin ADN

Kháng nguyên ñược thể hiện ở dạng nguyên thủy của nó, vì thế quá trình chế biến và nhận diện kháng nguyên tới hệ thống miễn dịch tốt hơn Có thể kích thích tế bào T gây ñộc tế bào (CTL) và ñáp ứng miễn dịch này tồn tại ñược trong một thời gian dài, ngoài ra kháng nguyên còn kích thích ñáp ứng kháng thể phòng hộ và ñáp ứng CD4+ trong cùng một cá thể Dễ sản xuất và tinh chế, cải tiến và kết hợp vacxin Tạo ra ñáp ứng miễn dịch trong thời gian kéo dài và hoạt phổ của ñáp ứng miễn dịch rộng Có thể giảm liều vacxin vì kháng nguyên ñược sản xuất và thể hiện trong một thời gian dài Dễ sản xuất và bảo quản Có thể sản xuất plasmid dễ dàng với số lượng lớn ADN rất ổn ñịnh và ñề kháng với nhiệt ñộ rất tốt vì thế bảo quản và vận chuyển vacxin dễ dàng Trình tự chuỗi ADN có thể thay ñổi dễ dàng trong phòng thí nghiệm ðiều ñó có nghĩa là nhà sản xuất vacxin có thể ñáp ứng rất nhanh với sự thay ñổi của tác nhân gây bệnh ðối với vacxin ADN, có thể sử dụng hỗn hợp các plasmid tức là có sản xuất nhiều loại kháng nguyên cùng một lúc, hoạt phổ vacxin sẽ rộng hơn

Nhược ñiểm của vacxin ADN

ADN ngoại lai ñược ñưa vào sẽ hợp nhất vào nhiễm sắc thể của vật chủ

và tạo ra khả năng biến nạp hình thành ADN triplex và ñột biến lồng (insertional mutagensesis) ðiều này có thể dẫn ñến ung thư thông qua sự thay ñổi chức năng của một ADN bình thường Có thể gây dung nạp miễn dịch, nghĩa là sự thể hiện kháng nguyên trong vật chủ có thể làm cho vật chủ không hình thành ñáp ứng ñặc hiệu ñối với kháng nguyên ñó Chính vì thế, trước khi ñưa ra sử dụng, cần ñánh giá kỹ mọi khía cạnh của vacxin ADN trong ñó ñặc biệt lưu ý phải loại trừ khả năng hợp nhất của ADN ñưa vào với nhiễm sắc thể của tế bào vật chủ (Tô Long Thành, 2011)

2.3 Một số hiểu biết về miễn dịch học thú y

2.3.1 Khái niệm miễn dịch

Miễn dịch là trạng thái ñặc biệt của một cơ thể không mắc phải một tác ñộng có hại của các yếu tố gây bệnh như: vi sinh vật, các chất ñộc do chúng tiết

ra hoặc các chất lạ khác Trong khi ñó các cơ thể cùng loài hoặc khác loài bị tác ñộng trong ñiều kiện sống và lây bệnh tương tự Một cách dễ hiểu có thể nói: Miễn dịch là khả năng tự vệ của cơ thể, là khả năng nhận ra và loại trừ các vật lạ

ra khỏi cơ thể Miễn dịch có thể có ñược là do cơ năng bảo vệ cơ thể bao gồm: miễn dịch tự nhiên (miễn dịch không ñặc hiệu) và miễn dịch thu ñược (miễn dịch ñặc hiệu) chúng liên quan rất chặt chẽ với nhau

Khả năng miễn dịch của cơ thể còn rất liên quan ñến các yếu tố như: cơ năng hoạt ñộng của cơ thể, ñặc tính của mầm bệnh, ñiều kiện ngoại cảnh… Vì vậy tính miễn dịch cũng biểu hiện ở những mức ñộ khác nhau Cơ thể có mức

ñộ miễn dịch cao, khi mầm bệnh xâm nhập vào sẽ không gây ñược bệnh, mầm bệnh sẽ bị loại trừ Cơ thể có mức ñộ miễn dịch thấp, mầm bệnh sẽ gây ñược bệnh, nhưng biểu hiện bệnh lý chỉ ở một mức ñộ nhất ñịnh Cơ thể không có

miễn dịch: khi mầm bệnh xâm nhập sẽ gây ñược bệnh, bệnh thể hiện với các triệu chứng, bệnh tích ñiển hình, cơ thể bị nhiễm ñộc, phá hủy dẫn ñến tử vong (Nguyễn Bá Hiên, 2009)

2.3.2 Phân loại miễn dịch

2.3.2.1 Dựa vào tính chất của miễn dịch

Miễn dịch tự nhiên

Miễn dịch tự nhiên hay miễn dịch bẩm sinh là ñặc tính không mắc phải một bệnh hay một số bệnh nào ñó của một giống vi sinh vật nhất ñịnh gây ra Miễn dịch này mang tính chất di truyền từ ñời này sang ñời khác Có nhiều ví dụ

về loại miễn dịch này như ñộng vật ñề kháng tốt ñối với virus thực vật và ngược lại, người không mắc bệnh dịch tả lợn hay ngựa không mắc bệnh lở mồm long móng Những sự ñề kháng trên ñược xem như là sức ñề kháng của loài Trong trường hợp khác, sự ñề kháng không hoàn toàn ñược thể hiện, trong khi trâu bò mẫn cảm cao với bệnh nhiệt thán, lợn lại có phần ñề kháng, trong khi nhiễm trùng nguy hiểm ñược quan sát ở trâu bò ñối với lợn sự nhiễm trùng này có xu hướng cục bộ ở vùng hầu hợn Kháng thể ñặc hiệu không phải là yếu tố cơ bản của sự ñề kháng tự nhiên ñối với bệnh Một vài cá thể loài của ñộng vật có thể biểu hiện sự ñề kháng với bệnh có ý nghĩa hơn ñối với các cá thể khác, nó ñược gọi là sự ñề kháng cá thể, các nhân tố có thể ảnh hưởng ñến sức ñề kháng của cá thể có thể là dinh dưỡng, tuổi, nhiệt ñộ môi trường, sức ñề kháng hoặc do cấu tạo của gen Hầu hết các giống chuột nuôi trong phòng thí nghiệm mẫn cảm với bệnh thương hàn, nhưng các giống có sức ñề kháng cao là do chọn lọc và dinh dưỡng Sự khác nhau có ý nghĩa này ñược lưu ý trong tỷ lệ mắc bệnh lao giữa các chủng tộc người (I A Merchant, R A Packer, 1967)

Trong miễn dịch bẩm sinh người ta chia ra làm hai loại: Miễn dịch tự nhiên tuyệt ñối nghĩa là trong bất cứ ñiều kiện nào khả năng miễn dịch của cơ