L ỜI CẢM ƠN
4.1. Xác ñị nh môi trường thạch dùng ñể ñế m số lượng vi khuẩn Pasteurella
multocida
Việc xác ñịnh chính xác số lượng vi khuẩn trong mỗi ml canh trùng có ý nghĩa quan trọng trong quá trình sản xuất vacxin. Xác ñịnh không chính xác sẽ làm ảnh hưởng ñến hiệu quả kinh tế nếu như xác ñịnh số lượng vi khuẩn ít hơn thực tế, hoặc làm giảm số vi khuẩn trong mỗi ml vacxin nếu như xác ñịnh số lượng vi khuẩn nhiều hơn thực tế.
Chúng tôi sử dụng phương pháp ñếm số ñể xác ñịnh số lượng vi khuẩn. Vì vậy, ñể có kết quả chính xác về số lượng vi khuẩn trong quá trình sản xuất, chúng tôi tiến hành nghiên cứu tính chất mọc của vi khuẩn Tụ huyết trùng gia cầm trên hai loại môi trường là Nutrient Agar (NA) và Blood Agar (BA) có bổ sung máu với hàm lượng khác nhau, kết quả ñược trình bày ở bảng 4.1.
Bảng 4.1. Kết quả xác ñịnh môi trường thạch dùng ñểñếm số lượng vi khuẩn Pasteurella multocida
Số lượng khuẩn lạc (109CFU/ml) Nồng ñộ 10-8 Nồng ñộ 10-7 ðợt thí nghiệm Tỷ lệ máu bổ sung (%) NA BA NA BA 0 0 1,5±0,1 1,3 12,3±0,1 6 23,3±0,2 28,3±0,3 187,7±0,2 257,9±0,2 8 24,4±0,1 31,6±0,2 241,6±0,1 289,1±0,3 1 10 23,2±0,1 30,4±0,3 246,5±0,2 294,8±0,2 0 0 2,8±0,2 0 14,4±0,3 6 26,7±0,1 27,3±0,3 208,7±0,1 268,8±0,1 8 26,1±0,2 33,8±0,2 247,1±0,2 310,5±0,2 2 10 27,3±0,1 34,4±0,3 251,3±0,3 313,1±0,3 0 0 2,7±0,3 0 13,8±0,1 6 25,6±0,2 25,9±0,1 179,4±0,2 255,5±0,2 8 26,1±0,1 31,3±0,2 271,7 300,4±0,1 3 10 26,4±0,2 31,5±0,3 269,1±0,3 302,5±0,2
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 48
Hình 4.1. Sự phát triển của vi khuẩn Pasteurella multocida trên môi trường thạch NA (trái) và BA (phải) bổ sung 8% máu bò.
Bảng 4.1 cho thấy vi khuẩn P. multocida không mọc hoặc mọc rất kém trên cả hai môi trường thạch NA và BA không bổ sung máu. Tuy nhiên, vi khuẩn mọc tốt ở môi trường có bổ sung máu.
Tại nồng ñộ 10-8 trên cả hai môi trường thạch NA và thạch BA có bổ sung máu không có sự chênh lệch về số lượng khuẩn lạc ở các nồng ñộ máu khác nhau. Tuy nhiên, ở nồng ñộ 10-7 có sự chênh lệch về số lượng khuẩn lạc tại các nồng ñộ. ðiều ñó cho thấy ở nồng ñộ 10-8 do số lượng vi khuẩn trong mỗi ñĩa ít nên chưa dùng hết dinh dưỡng từ máu, ở nồng ñộ 10-7 số lượng vi khuẩn nhiều hơn, ñã sử dụng hết chất dinh dưỡng từ máu nên có sự chênh lệch về số lượng khuẩn lạc.Với tỷ lệ máu bổ sung vào môi trường 8% và 10% cho kết quả ñếm số là tương ñương nhau.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 49