L ỜI CẢM ƠN
3.5.7. Phương pháp kiểm nghiệm vacxin
3.5.7.1. Phương pháp lấy mẫu kiểm nghiệm
Mẫu kiểm nghiệm là các ựơn vị sản phẩm ựược lấy từ các lô vacxin ựể tiến hành kiểm nghiệm trước khi xuất xưởng và lưu giữ trong thời gian bảo quản của vacxin.
Mẫu phải có tắnh ựại diện, lấy ngẫu nhiên theo tỷ lệ quy ựịnh và ựược bảo quản trong ựiều kiện phù hợp, an toàn, khi ựến phòng kiểm nghiệm phải ựược tiến hành ngay các thủ Tục kiểm nghiệm trong thời gian ngắn nhất.
Lấy mẫu theo tiêu chuẩn ngành 10 TCN 160 Ờ 92 ỘVacxin thú y - Quy trình lấy mẫu và sử dụng mẫu trong kiểm nghiệmỢ, mẫu ựược lấy theo lô vacxin
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 45 với tỷ lệ như sau:
10% sản phẩm (ắt nhất là 5) ựối với lô dưới 100 sản phẩm. 10% sản phẩm ựối với lô 100 ựến dưới 500 sản phẩm.
2% sản phẩm ựối với lô từ 500 sản phẩm trở lên (nhiều nhất là 20 sản phẩm). Mẫu ựược chia làm 3 nhóm:
Nhóm 1: từ 3 sản phẩm trở lên dùng ựể kiểm tra thuần khiết. Nhóm 2: từ 3 sản phẩm trở lên dùng ựể kiểm tra các chỉ tiêu khác. Nhóm 3: 2 sản phẩm ựể lưu giữ.
3.5.7.2. Phương pháp kiểm tra vô trùng
- Mỗi lô vacxin ựược kiểm tra trên các môi trường cơ bản sau: + 2 ống thạch máu
+ 2 ống thạch thường + 2 ống nước thịt
+ 2 ống nước thịt gan yếm khắ + 2 ống thạch nấm
+ 2 lọ nước thịt dinh dưỡng 50ml
- Lượng vacxin cấy kiểm tra vào mỗi ống môi trường 0,2ml.
Vacxin Tụ huyết trùng gia cầm ựược kiểm tra trên các môi trường theo hai bước sau:
+ Bước 1: Cấy mẫu vào 2 lọ nước thịt dinh dưỡng 50ml, theo dõi ở 37oC trong 3 ngày.
+ Bước 2: Cấy chuyển từ 2 lọ nước thịt dinh dưỡng trên sang 2 ống thạch máu, 2 ống thạch thường, 2 ống nước thịt, 2 ống nước thịt gan yếm khắ và 2 ống thạch nấm, theo dõi ở 37oC trong 7 ngày. Riêng 2 ống thạch nấm ựể ở nhiệt ựộ phòng 25 - 30oC.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 46 Lô vacxin ựược ựánh giá là ựạt chỉ tiêu vô trùng khi không có bất cứ một loại vi sinh vật tạp nào mọc trên các môi trường trong thời gian theo dõi.
3.5.7.3. Phương pháp kiểm tra an toàn
để tiến hành kiểm tra an toàn của vacxin vô hoạt Tụ huyết trùng gia cầm, chúng tôi tiến hành như sau:
Mỗi lô vacxin sử dụng hai gà có trọng lượng 1,0 Ờ 2,0 kg chưa ựược tiêm vacxin Tụ huyết trùng gia cầm, mỗi gà tiêm dưới da 2 ml vacxin và theo dõi trong 10 ngày.
Nội dung theo dõi ựược quy ựịnh với những tiêu chắ: sốc vacxin, kém ăn, viêm, sưng cục bộ nơi tiêm và các phản ứng phụ khácẦ
đánh giá kết quả: sau 10 ngày theo dõi, hai gà phải sống khỏe mạnh, không có phản ứng hoặc phản ứng nằm trong phạm vi cho phép và không có con nào chết thì lô vacxin mới ựạt tiêu chuẩn.
3.5.7.4. Phương pháp kiểm tra hiệu lực
Tiêm miễn dịch cho 4 gà (1,0 Ờ 2,0kg) mỗi con một liều vacxin quy ựịnh. Sau 21 ngày gà ựược miễn dịch cùng với 2 gà ựối chứng cùng nguồn gốc và lứa tuổi ựược thử thách với vi khuẩn Tụ huyết trùng gà cường ựộc tương ứng, liều 1 MLD vào dưới da. Theo dõi trong 10 ngày, vacxin ựược gọi là ựạt tiêu chuẩn hiệu lực nếu:
Gà ựối chứng chết hết trong khi gà miễn dịch sống ắt nhất 2 con. Gà ựối chứng chết một, gà miễn dịch sống tất cả.