L ỜI CẢM ƠN
3.5.6.Phương pháp phối trộn, ra chai vacxin
Sau khi ñã có kết quả vô hoạt và ñếm số, chúng tôi tiến hành phối trộn vacxin.
Khối lượng canh trùng, nước sinh lý và keo phèn ñược tính toán sao cho ñảm bảo 10 tỷ vi khuẩn trong một ml vacxin, keo phèn chiếm 20% khối lượng vacxin theo các công thức sau:
Số lượng CFU/ml canh trùng (109CFU) Pvacxin =
10 × Pcanh trùng
Pvacxin
Pkeo phèn = 5
Psinh lý = Pvacxin – Pcanh trùng – Pkeo phèn
Ví dụ: Có 5 kg canh trùng với số lượng 24×109CFU/ml, ta có công thức tính như sau:
24 Pvacxin =
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 44 12 Pkeo phèn = 5 = 2,4 (kg) Psinh lý = 12 – 5 – 2,4 = 4,6 (kg)
Sau khi có kết quả như bảng phối trộn trên, keo phèn và nước sinh lý ñược trộn ñều bình Nalgene, dùng máy khuấy từ ñể khuấy ñều sao cho keo phèn tan hết, keo phèn ñược pha cùng với nước sinh lý bởi vì keo phèn ở trạng thái ñặc, có tính dẫn nhiệt kém, vì vậy pha loãng keo phèn bằng nước sinh lý sẽ làm cho nhiệt ñộ ñược ñồng ñều trong quá trình hấp ñồng thời keo phèn cũng ñược ñánh tan, tránh hiện tượng vón cục làm ảnh hưởng xấu ñến chất lượng vacxin.
Khi có kết quả hấp vô trùng keo phèn với nước sinh lý, cho canh trùng vào, khuấy 30 phút bằng máy khuấy từ cho hỗn hợp ñược ñồng nhất, tạo ñiều kiện cho kháng nguyên hấp phụ lên bề mặt keo phèn. Sau ñó lấy mẫu kiểm tra vô trùng, sản phẩm ñược bảo quản trong kho lạnh từ 2 – 8oC ñến khi ñã có kết quả vô trùng rồi tiến hành ra chai.