BÁO CÁO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Tên đề tài: KHẢO SÁT MỨC ĐỘ ĐỀ KHÁNG KHÁNG SINH CỦA VI KHUẨN KLEBSIELLA PNEUMONIAE PHÂN LẬP ĐƯỢC TẠI BỆNH VIỆN NHI ĐỒNG 1 TỪ THÁNG 3/2018 ĐẾN 2/2019 KHOA CÔN
VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU II.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU
Vật liệu nghiên cứu
Vi khuẩn trong nghiên cứu này là tất cả vi khuẩn Klebsiella pneumoniae được phân lập từ các bệnh phẩm khác nhau của các khoa lâm sàng gửi tới khoa Vi sinh trong thời gian 03/2018 đến 02/2019
II.1.1.1 Thời gian nghiên cứu
- Từ 01/02/2019 đến 01/04/2019 tại Bệnh viện Nhi Đồng 1 TPHCM.
Môi trường
II.1.2.1 Môi trường cấy phân lập
⮚ Môi trường BA (Blood Agar)
Môi trường thạch máu (Blood Agar) là môi trường dinh dưỡng để nuôi cấy phân lập các vi khuẩn từ tất cả các mẫu bệnh phẩm trừ mẫu phân
⮚ Môi trường MC (Macconkey Agar)
Môi trường Macconkey Agar là môi trường phân lập và nuôi cấy các trực khuẩn Gram âm dễ mọc
⮚ Môi trường Mueller-Hinton Agar (MHA)
Mueller Hinton Agar (MHA) là môi trường tốt nhất để thử nghiệm kháng sinh đồ thường qui Thích hợp tăng trưởng cho hầu hết các vi khuẩn dễ mọc
II.1.2.2 Môi trường trong các thử nghiệm sinh hóa
❖ Môi trường Kligler Iron Agar (KIA): thử khả năng sử dụng các nguồn cacbonhydrat, sinh hơi
❖ Môi trường Simmon’s Citrate: thử khả năng sử dụng nguồn citrate như nguồn cacbon duy nhất
❖ Môi trường thử nghiệm tính di động (SIM) : môi trường chuyên biệt để khảo sát khả năng sinh H2S, Indol và khả năng di động của vi khuẩn.
Đĩa kháng sinh
Đĩa kháng sinh là những đĩa giấy có đường kính 6mm, được tẩm dung dịch kháng sinh với nồng độ tiêu chuẩn Các đĩa kháng sinh được đóng gói đảm bảo điều kiện hút ẩm và được lưu giữ ở 2 - 8 0 C hoặc ở -14 0 C
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm 18
Có rất nhiều loại kháng sinh Tuy nhiên không thể thử nghiệm kháng sinh đồ hết cho tất cả các loại mà cần phải có sự lựa chọn
Tất cả những đĩa giấy kháng sinh đều do hãng Biorad sản xuất, ngoại trừ Novobiocin, Nitrofurantoin do hãng Sanofi sản xuất
Các tiêu chuẩn lựa chọn kháng sinh thử nghiệm được hướng dẫn chi tiết bởi Ủy ban Quốc gia về tiêu chuẩn của các phòng thí nghiệm tại Mỹ (Clinical Laboratory Standards Institute, CLSI) Các tiêu chuẩn chính là:
- Chọn kháng sinh đại diện cho nhóm có cùng phổ hoạt động
- Tùy thuộc vào loại vi khuẩn thử nghiệm
- Tùy thuộc vào vị trí nhiễm khuẩn
- Tùy theo chiến lược và chính sách sử dụng kháng sinh ở từng vùng, từng địa phương.
Sinh phẩm , hóa chất và thuốc thử
- Nước muối sinh lý : Nacl 0.85%
- Oxidase, bộ thử nghiệm sinh hóa
- Dầu soi kính hiển vi
- Crystal violet, lugol, alcohol – acetol, dung dịch fuchsin 0,5%.
Thiết bị và dụng cụ
- Tủ cấy (an toàn sinh học cấp II)
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm 19
PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
II.2.1 Khai thác dữ liệu khoa học
❖ Thu thập dữ liệu từ:
- Khai thác dữ liệu khoa học từ PubMed, PubMed central (PMC) thuộc NCBI, các nguồn dữ liệu trực tuyến khác (EMB, Google)
- Sử dụng từ khóa liên quan đến vi khuẩn K pneumoniae thường gặp
- Thu thập dữ liệu qua 1 năm từ tháng 03/2018 đến 02/2019
- Triệu chứng lâm sàng nhiễm trùng bệnh viện trên thế giới
II.2.2 Phương pháp thực hiện
Phương pháp thu mẫu, nuôi cấy, phân lập, định danh, làm kháng sinh đồ, sàng lọc chủng vi khuẩn Klebsiella pneumoniae sinh β - lactamase phổ rộng
II.2.2.1 Khảo sát đặc điểm mẫu
Thông tin về bệnh nhân (độ tuổi, giới tính, số hồ sơ ) và chẩn đoán lâm sàng
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm 20
Bệnh phẩm là máu, mủ (gồm mủ vết thương, mủ phỏng, dịch ổ bụng, dịch màng phổi, đầu Catheter,…) bệnh phẩm đường hô hấp (đầu nội khí quản, đàm, dịch hút khí quản-NTA, dịch hút nội khí quản-ETA) từ các khoa lâm sàng được gửi xuống khoa Vi sinh
Các mẫu không đủ tiêu chuẩn sẽ được gửi trả về khoa lâm sàng và đề nghị lấy lại mẫu mới
II.2.2.2 Phương pháp cấy phân lập
Nguyên tắc: Để tách riêng biệt từng loại vi sinh vật trên môi trường nuôi cấy Từ một tế bào ban đầu, sau một thời gian nuôi cấy nhất định sẽ tạo ra một khóm hay 1 khuẩn lạc Dùng để cấy các mẫu bệnh phẩm là máu, các loại mủ, phân, dịch não tủy,…
- Lắc đều mẫu cấy (nếu mẫu là dịch)
- Khử trùng đầu que cấy trên ngọn lửa (đốt que cấy đến đỏ hồng) Mở nắp ống, khử trùng miệng lọ đựng mẫu
- Làm nguội que cấy và lấy 1 vòng mẫu cấy
- Khử trùng lại miệng lọ và đậy nắp lọ lại
- Dùng 1 tay mở nắp đĩa petri, 1 tay bắt đầu cấy ria trên mặt thạch Ria trên mặt thạch theo những đường ziczac trên khoảng 1/4 đĩa thạch
- Khử trùng que cấy Xoay đĩa petri khoảng 1/4 vòng
- Cấy ria đường thứ 2 từ một vị trí trên đường ria đầu tiên
- Khử trùng que cấy Xoay đĩa petri 1/4 vòng Tiếp tục cấy ria đường thứ 3 từ một vị trí trên đường ria thứ 2
II.2.2.3 Phương pháp nuôi cấy xác định số lượng vi khuẩn (dùng phương pháp cấy bán định lượng)
Dùng phương pháp cấy bán định lượng dùng để đếm số khuẩn lạc trong 1ml nước tiểu trên môi trường nuôi cấy
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm 21
Lắc đều mẫu nước tiểu Dùng khuyên cấy định lượng 0,001 ml (1μl), bằng kỹ thuật vô trùng, đưa theo phương thẳng đứng 90 0 vào lọ chứa nước tiểu để đảm bảo đủ lượng nước tiểu trên vòng khuyên cấy
Thực hiện phương pháp cấy hàng rào lần lượt trên các đĩa thạch chứa môi trường BA, MC Đem ủ thường các hộp thạch BA và MC ở 35 – 37 0 C từ 18 – 24h
Sau khi ủ, kiểm tra các hộp thạch nếu có vi khuẩn thì đếm số khuẩn lạc Tiến hành định danh vi khuẩn / vi nấm và thực hiện kháng sinh đồ
II.2.2.4 Môi trường cấy phân lập đối với các loại bệnh phẩm
✔ Đối với mẫu đàm, mủ, máu thì cấy vào môi trường BA, MC theo đường cấy 3 chiều và sau mỗi đường cấy sử dụng Staphylococcus aureus để vạch 1 đường thẳng vuông góc 90 0 với 3 đường cấy ria 3 chiều bên trên ( khảo sát hiện tượng vệ tinh “satellite”) trên hộp thạch BA
- Ủ hộp thạch BA (có vạch “satellite” bằng khuẩn lạc S.aureus) ở điều kiện khí trường 5% CO2, 37 0 C/24 giờ Hộp thạch MC ủ 37 0 C/24 giờ
✔ Đối với mẫu máu được lấy từ chai cấy máu đã được ủ trong máy cấy máu từ 2 đến 5 ngày
- Nếu mẫu cấy máu dương tính thì tiếp tục thực hiện cấy tìm vi khuẩn gây bệnh
- Nếu mẫu cấy máu âm tính thì trả kết quả sau 5 ngày không mọc
✔ Đối với dịch não tủy thì cấy vào môi trường BA và CA theo đường cấy 3 chiều và sau mỗi đường cấy sử dụng Staphylococcus aureus để vạch 1 đường thẳng vuông góc 90 0 với 3 đường cấy ria 3 chiều bên trên ( khảo sát hiện tượng vệ tinh “ satellite”) trên hộp thạch BA
- Ủ hộp thạch BA và CA ở điều kiện khí trường 5% CO2, 37 0 C/24 giờ
- Nếu vi khuẩn mọc cần tiến hành xác định có phải là tạp nhiễm hay không, nếu không thì tiếp tục định danh bất kỳ vi khuẩn gây bệnh nào phân lập được
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm 22
II.2.3 Phương pháp định danh
II.3.3.1 Phương pháp định danh trực khuẩn Gram (-)
Thực hiện thử nghiệm oxidase :
Sử dụng thuốc thử Tetramethyl paraphenylene diamin dihydroclride 1% (TPDD) có khả năng phản ứng với men Oxidase, tạo ra sự đổi màu từ hồng sang đen Để tiến hành thử nghiệm, đặt giấy lọc vào đĩa petri, nhỏ một giọt thuốc thử, sau đó dùng khuyên cấy lấy khuẩn lạc nghi ngờ chứa men Oxidase và bôi lên vị trí nhỏ thuốc thử.
Kết quả trong vòng 10 giây cho đến 1 phút: Nếu phết vi khuẩn chuyển dần sang màu tím than thì Oxidase (+), còn chỉ ngừng lại ở màu hồng thì Oxidase(-)
Thực hiện cấy các khóm vi khuẩn điển hình vào các môi trường sinh hóa trong ống nghiệm: KIA, Citrate, SIM Sau đó đem ủ các ống nghiệm ở nhiệt độ 35 –
37 0 Ctrong vòng 18 - 24 giờ Đọc kết quả:
Bảng 2.1 : Phản ứng sinh hóa của vi khuẩn Gram (-) dễ mọc
II.3.3.2 Phương pháp định danh Klebsiella pneumoniae
- Nuôi cấy vi khuẩn từ bệnh phẩm khác nhau của bệnh nhân được chuẩn đoán bị nhiễm trùng
SINH HÓA ĐỌC KẾT QUẢ
1 Oxidase Tím đen Hồng hoặc không màu
4 Sinh hơi Có khí Không có khí
5 Indol Đỏ lớp trên Vàng lớp trên
6 Di động Đục, mọc lan ra khỏi đường cấy
Trong, không mọc ra khỏi đường cấy
7 Citrate Xanh biển Xanh lá
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm 23
- Quan sát đại thể và khảo sát vi thể : Nhuộm Gram dựa vào thang điểm Barlett và chỉ áp dụng đối với mẫu đàm, dịch hút khí quản-NTA, dịch hút nội khí quản-ETA
- Nhuộm Gram: xác định vi khuẩn Gram (-)
- Dùng các thử nghiệm sinh hóa: oxidase, decarboxylase, di động, KIA, Urea/Indol, Citrate, Nitrate hoặc định danh vi khuẩn bằng hệ thống định danh và kháng sinh đồ tự động VITEK-2
- Làm kháng sinh đồ tay theo phương pháp Kirby- Bauer
- Thử nghiệm ESBL sàng lọc các chủng Klebsiella pneumoniae sinh β - lactamase phổ rộng.
Sơ đồ 2.1 : Phương pháp nghiên cứu của Klebsiella pneumoniae
Quan sát và đọc khóm khuẩn Đọc và phân tích kết quả Định danh bằng máy định danh: Vitek-2 Định danh thường
Thử nghiệm kháng sinh đồ và đĩa đôi β- lactamase phổ rộng
Bệnh phẩm sau khi được phân lập Quan sát đại thể, chọn môi trường phù hợp với từng loại bệnh phẩm
Cấy trên môi trường BA, MC.Ủ 35 - 37°C/24 -48 giờ
Nhuộm Gram: Quan sát Gram (-), Gram (+)
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm 24
Bảng 2.2 : Bảng trắc nghiệm sinh hóa định danh trực khuẩn Gram âm
H2S IND CIT Ure DI ĐỘNG
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm 25
II.3.3.3 Quy trình nhuộm Gram: Xác định vi khuẩn Gram (-)
Xác định vi khuẩn là Gram âm hay Gram dương và hình dạng để tiến hành các bước định danh tiếp theo
Khi nhuộm vi khuẩn với thuốc nhuộm Crystal Violet (Gentian) và một chất gắn màu Iodine như Lugol nếu ta tẩy màu bằng ethanol 95%, vi khuẩn Gram dương có lớp peptidoglycan dày ăn màu tím của Crystal Violet, ngược lại vi khuẩn Gram âm bị tẩy mất màu tím Khi nhuộm lại với Fuchsin 0,5%, nhóm Gram dương vẫn giữ màu tím còn nhóm Gram âm sẽ bắt màu hồng
- Hơ nhanh tiêu bản qua ngọn lửa đèn cồn
- Dùng bút chì mở hoặc bút lông ghi tên mẫu và số thứ tự, và vẽ vòng tròn d = 15mm ở trên lame kính để đánh dấu vết khuẩn
Bước 1: Chuẩn bị vết bôi: Dùng que cấy vô trùng lấy một ít bệnh phẩm để giữa phiến kính, làm khô trong không khí Mẫu thử làm phiến phết: Từ bệnh phẩm:
- Nếu bệnh phẩm là mủ hay các chất ngoại tiết tương đương: làm một phết mỏng với khuyên cấy đã khử trùng, trải đều trên tấm kính trên một diện tích 1,5 × 2,5 cm
- Nếu bệnh phẩm được lấy bằng que gòn: Dùng que gòn làm phiến phết thẳng hoặc làm huyền trọc với 1 giọt nước muối nếu bệnh phẩm đã khô
- Nếu bệnh phẩm là đàm hay phân: Chọn phần có mủ hay máu
- Nếu là bệnh phẩm lỏng như nước tiểu, nước tủy sống: Làm phiến phết từ cặn lắng li tâm với ống hút có đường kính nhỏ
- Nếu là lứa cấy lỏng: Tùy theo độ đục của lứa cấy, ta lấy một giọt nhỏ hay lấy đầy 2,3 khuyên cấy khuẩn để làm phiến phết
- Nếu là lứa cấy trên môi trường đặc: Dùng khuyên cấy khuẩn chấm trên 1 nhóm vi khuẩn riêng lẻ, làm huyền trọc trong 1 giọt nước muối trên kính, xong trải
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm 26 mỏng thành phiến phết Nên phân tán đều không dày để có thể quan sát được từng tế bào vi khuẩn Kỹ thuật làm phiến phết :
- Cầm que cấy thật thẳng đứng, đầu khuyên đặt trên ngọn lửa đèn cồn và đốt đỏ đầu que cấy
- Để nguội, lấy 1 khuyên đầy bệnh phẩm
- Đặt khuyên bệnh phẩm vào giữa tấm kính, cho áp sát vào mặt kính, phết đều trên kính thành những hình bầu dục với diện tích 1,5 cm × 2,5 cm
- Đốt đỏ đầu que cấy để khử khuẩn
Bước 2: Cố định tiêu bản vi khuẩn
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN III.1 ĐẶC TÍNH MẪU
KHẢO SÁT TỶ LỆ PHÂN BỐ VI KHUẨN KLEBSIELLA
PNEUMONIAE THEO TUỔI VÀ GIỚI TÍNH CỦA BỆNH NHÂN
III.2.1 Đặc tính về giới tính
Bảng 3.1 : Tỷ lệ nhiễm Klebsiella pneumoniae theo giới tính
Biểu đồ 3.1: Tỷ lệ phân bố theo giới tính trên tổng mẫu phân lập được
GIỚI SỐ LƯỢNG BỆNH PHẨM
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm 34
Từ 3779 mẫu bệnh phẩm, phân lập được 462 chủng Klebsiella pneumoniae, trong đó có 262 chủng Klebsiella pneumoniae được phân lập từ bệnh nhân nam và
200 chủng Klebsiella pneumoniae được phân lập từ bệnh nhân nữ
Trong số bệnh nhân mắc nhiễm Klebsiella pneumoniae, nam giới chiếm tỷ lệ cao hơn đáng kể với 57%, trong khi nữ giới chỉ chiếm 43% Tuy nhiên, chênh lệch này chưa đủ để kết luận rằng nhiễm trùng K pneumoniae ở nam giới cao hơn ở nữ giới Sự khác biệt này có thể phản ánh đặc điểm bệnh nhân và mô hình bệnh tật tại Bệnh viện Nhi Đồng 1 chứ không phải yếu tố giới tính.
III.2.2 Đặc tính về tuổi bệnh
Về tuổi bệnh nhân ghi nhận được kết quả sau :
Bảng 3.2: Tỷ lệ nhiễm Klebsiella pneumoniae theo độ tuổi
Biểu đồ 3.2 : Tỷ lệ nhiễm Klebsiella pneumoniae theo độ tuổi
TUỔI BỆNH NHÂN SỐ LƯỢNG KLEBSIELLA
Dưới 2 tháng tuổi 2 tháng tuổi đến 1 tuổi
2 tuổi đến 5 tuổi 5 tuổi trở lên
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm 35
Theo biểu đồ và bảng 3.2 cho thấy có sự khác nhau ở các lứa tuổi : Dưới 2 tháng tuổi chiếm tỷ lệ 51,73%, từ 2 tháng tuổi đến 1 tuổi chiếm 38,53%, 2 tuổi đến
5 tuổi chiếm 4,11%, 5 tuổi trở lên chiếm 5,63% suy ra tỷ lệ bệnh nhân nhiễm
Klebsiella pneumoniae cao nhất ở độ tuổi dưới 2 tháng, do ở lứa tuổi này sức đề kháng còn rất yếu và các hệ miễn dịch chưa hoàn thiện không đủ sức chống lại các tác nhân xâm nhiễm từ bên ngoài
Tỷ lệ mắc bệnh giảm dần theo lứa tuổi, càng lớn tỷ lệ mắc bệnh của trẻ bị nhiễm khuẩn do Klebsiella pneumoniae càng giảm Càng lớn thì sức đề kháng của cơ thể trẻ càng phát triển điều này góp phần lý giải sự giảm của tỷ lệ mắc bệnh theo lứa tuổi.
KHẢO SÁT SỰ PHÂN BỐ VI KHUẨN KLEBSIELLA PNEUMONIAE
PNEUMONIAE TRONG CÁC LOẠI BỆNH PHẨM
Bảng 3.3 : Tỷ lệ Klebsiella pneumoniae phân lập từ các loại bệnh phẩm
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm 36
Mủ vết thương ngoại khoa 11 2,37
Biểu đồ 3.3 : Tỷ lệ Klebsiella pneumoniae phân lập từ các loại bệnh phẩm
Theo bảng và quan sát biểu đồ 3.3 trong 462 chủng Klebsiella pneumoniae được phân lập được 326 của bệnh phẩm dịch hút khí quản (NTA, ETA) chiếm tỷ lệ cao nhất tới 70,56%, 55 được phân lập từ mẫu bệnh phẩm máu chiếm 11,9%, sau đó là các bệnh phẩm vết thương ngoại khoa 2,37%, khác 2,15%, (mủ phỏng, mủ abces, nước tiểu là 1,95%), (catheter, dịch ổ bụng, mủ vết thương là 1,52%), viêm phúc mạc 1,3%, mủ da 0,65%, (dịch khớp, dịch màn bụng, rốn là 0,22%)
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm 37
III.4 KHẢO SÁT TỶ LỆ PHÂN BỐ KLEBSIELLA PNEUMONIAE THEO KHOA LÂM SÀNG
Bảng 3.4 : Tỷ lệ phân bố vi khuẩn Klebsiella pneumoniae theo khoa lâm sàng
KHOA LÂM SÀNG TẦN SỐ TỶ LỆ %
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm 38
Biểu đồ 3.4 : Tỷ lệ phân bố vi khuẩn Klebsiella pneumoniae theo khoa lâm sàng
Tỉ lệ phân bố vi khuẩn Klebsiella pneumoniae khác nhau đáng kể giữa các khoa tại bệnh viện: khoa Sơ sinh cao nhất (43,72%), tiếp theo là khoa Hô hấp (15,37%) Trẻ sơ sinh có sức đề kháng yếu, dễ bị nhiễm khuẩn từ môi trường bệnh viện gây ra các bệnh như viêm phổi, nhiễm trùng huyết, nhiễm khuẩn đường tiêu hóa Bệnh viện Nhi đồng 1 và Bệnh viện Nhi đồng 2 có dấu hiệu nhiễm trùng bệnh viện nghiêm trọng cần được kiểm soát chặt chẽ.
KHẢO SÁT MỨC ĐỘ ĐỀ KHÁNG KHÁNG SINH CỦA KLEBSIELLA
Tiến hành làm kháng sinh đồ theo phương pháp Kirby-Bauer, đã thu nhận được kết quả theo bảng sau:
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm 39
Theo các thứ tự Kháng (Resistance), Trung Gian (Intermediate), Nhạy (Susceptible)
Bảng 3.5 : Tính nhạy cảm kháng sinh của Klebsiella pneumoniae
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm 40
Biểu đồ 3.5 : Tỷ lệ kháng kháng sinh của Klebsiella pneumoniae
Phân tích kết quả kháng kháng sinh của 462 chủng thực hiện kháng sinh đồ cho thấy Klebsiella pneumoniae có mức đề kháng kháng sinh với hầu hết các loại kháng sinh Trong 14 kháng sinh được thực hiện thì Klebsiella pneumoniae kháng 8 loại kháng sinh ở mức trên 40% Trong đó Klebsiella pneumoniae đề kháng cao nhất với Cefuroxime (84,5%), kế tiếp là Ceftriaxone (82,7%), Cefotaxime (73%), Gentamicin (69,6%), Trimethoprim/Sulfamethoxazole (68,5%), Ciprofloxacin (55,8%), Ceftazidime (51,7%), Ticarcillin/Clavulanic acid (46,3%), Levofloxacin (45,3%), Cefepime (36,1%), Ertapenem (33,7%), Imipenem (32,4%), Meropenem (32,1%), Chloramphenicol (27,2%) chiếm tỷ lệ thấp
III.5.1 Tỷ lệ nhạy , trung tính, kháng kháng sinh của vi khuẩn Klebsiella pneumoniae theo bệnh phẩm thu nhận được tại bệnh viện
Tỷ lệ phần trăm kháng
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm 41
Biểu đồ 3.6 : Tỷ lệ nhạy , trung tính, kháng của vi khuẩn Klebsiella pneumoniae theo bệnh phẩm thu nhận được tại bệnh viện
Từ bảng 3.5 và biểu đồ 3.6 cho thấy tỷ lệ kháng cao hơn tỷ lệ nhạy Đã có 8/14 kháng sinh kháng ở trên 40% Điều đó có thể nói các kháng sinh đang dần yếu dần và các kháng sinh tốt nhất trong việc điều khi như sau: Chloramphenicol với độ nhạy với kháng sinh là 68,4%, tiếp đến là Meropenem (66,4%), Imipenem (65,3%), Ertapenem (64,8%), Cefepime (52,8%)
KHẢO SÁT TỶ LỆ KLEBSIELLA PNEUMONIAE SINH β – LACTAM PHỔ RỘNG
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm 42
Bảng 3.6 : Tỷ lệ vi khuẩn Klebsiella pneumoniae sinh men ESBL
Biểu đồ 3.7 : Tỷ lệ vi khuẩn Klebsiella pneumoniae sinh men ESBL trong thử nghiệm sàng lọc
Tỷ lệ vi khuẩn Klebsiella pneumoniae tiết men β - lactam khá cao (54,80%) chiếm trên một nữa trong tổng số 462 mẫu phân lập được Và tỷ lệ này rất đáng báo động cho tình hình đề kháng kháng sinh của vi khuẩn này
Tỷ lệ vi khuẩn Klebsiella pneumoniae sinh ESBL trong nghiên cứu của chúng tôi đạt 54,80%, một con số khá cao Phát hiện này chỉ ra rằng việc sử dụng quá mức các kháng sinh cephalosporin thế hệ thứ ba là một trong những nguyên nhân chính dẫn đến sự gia tăng các chủng K pneumoniae có khả năng sản sinh β-lactamase phổ rộng.
ESBL Số lượng vi khuẩn (N) Tỷ lệ %
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm 43
III.6.1 Tỷ lệ Klebsiella pneumoniae sinh ESBL theo mẫu bệnh phẩm
Bảng 3.7 : Tỷ lệ Klebsiella pneumoniae sinh ESBL theo mẫu bệnh phẩm
ESBL ÂM (N 9) Tần số Tỷ lệ
Mủ vết thương ngoại khoa
Từ bảng 3.7 suy ra Klebsiella pneumoniae sinh ESBL nhiều nhất từ bệnh phẩm dịch hút khí quản (NTA, ETA) chiếm 326/462 mẫu bệnh phẩm được phân lập được và có tỷ lệ ESBL dương tính trên 52% Điều này cho thấy vi khuẩn Klebsiella pneumoniae được phân lập chủ yếu từ nguồn bệnh dịch hút khí quản (NTA, ETA) và có tỷ lệ sinh ESBL cao nhất
Hiện tượng ESBL dương tính ngày càng phát triển mạnh, các vi khuẩn mang men ESBL dễ dàng lây lan từ người này sang người khác, từ các dụng cụ y tế sang
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm 44 các bệnh nhân,… Nếu vi khuẩn mang men này không được kiểm soát chặt chẽ và không ngăn chặn sự lây lan thì sự bùng phát của tình hình đề kháng kháng sinh sẽ trở nên nghiêm trọng hơn và trở thành cơn khủng hoảng của ngành y tế
SVTH: Trần Nguyễn Linh Tâm