Nghiên cứu sử dụng nhóm hoạt chất diterpen lacton từ cây xuyên tâm liên andrographis paniculata bổ sung trong thức ăn chăn nuôi heo gà công nghiệp

SỞ KHOA HỌC-CÔNG NGHỆ TP HCM VIỆN KHKT NÔNG NGHIỆP MIỀN NAM TRUNG TÂM SÂM & DƯỢC LIỆU TP.HCM -ooo0ooo - BÁO CÁO NGHỆM THU (ðã chỉnh sửa theo góp ý Hội đồng nghiệm thu ngày 26 tháng năm 2010 NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG NHÓM HOẠT CHẤT DITERPEN LACTON TỪ CÂY XUYÊN TÂM LIÊN (Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees) BỔ SUNG TRONG THỨC ĂN CHĂN NUÔI HEO GÀ CƠNG NGHIỆP Chủ trì đề tài ThS Vương Nam Trung TS Trần Cơng Luận Cơ quan chủ trì ñề tài Viện Khoa Học Kỹ Thuật Nông nghiệp miền Nam TP HỒ CHÍ MINH Tháng 12/2010 TĨM TẮT NỘI DUNG NGHIÊN CỨU Xuyên tâm liên (Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees) thuộc họ Ơ rơ (Acanthaceae) thuốc cổ truyền dùng chữa cảm sốt, viêm đường hơ hấp nhiều bệnh nhiễm khác sốt rét, lỵ tiêu chảy Trung Quốc, Ấn ðộ nước ðơng Nam Á Cây chúng minh có đặc tính miễn dịch, kháng khuẩn, kháng viêm bảo vệ gan Thành phần diterpenoid andrographolid tiêu chuẩn chủ yếu cho phân ñịnh chất lượng Xuyên tâm liên Nó có nhiều tác dụng dược lý giải ñộc gan, kháng HIV, chống ung thư, hạ ñường huyết hạ huyết áp Sau năm 1975 nước ta, Xuyên tâm liên ñược sử dụng rộng rãi thuốc kháng sinh, sau khơng ñược dùng cho ñến chưa ñược ñưa vào dược điển Việt Nam.Trong báo cáo này, chúng tơi muốn phục hồi giá trị Xuyên tâm liên nước cách “Nghiên cứu sử dụng nhóm hoạt chất diterpen lacton từ Xuyên tâm liên (Andrographis paniculata Nees) bổ sung thức ăn chăm nuôi heo, gà cơng nghiệp’’ Các kết thu sau: - Khảo sát thực trạng thu thập 11 mẫu địa bàn Tp HCM, Long An, Bình Dương, ðồng Tháp Kết cho thấy mẫu thu hái ðồng Tháp Long An tốt so với nơi khác - Tiêu chuẩn hóa nguyên liệu dựa dược ñiển Trung Quốc WHO Trong ño hàm lượng diterpen lacton tồn phần 6,0% theo phương pháp đo quang - Phân lập xác ñịnh cấu trúc andrographolid thu ñược 2,4g với ñộ tinh khiết 99,8% - ðiều chế bột bán thành phẩm với hàm lượng diterpen lacton 50% quy mơ phịng thí nghiệm - Bốn dịch chiết nước, MeOH, EtOH CHCl2-MeOH nồng ñộ 20mg thể tác dụng kháng khuẩn chủng gram dương, ñặc biệt với chủng MRSA Tuy nhiên andrographolid, thành phần diterpen lacton khơng thể tác dụng vi khuẩn gram dương gram âm nồng ñộ 10 ml - Dịch chiết nước (1 g/kg, uống), cao diterpen lacton (200 mg/kg, uống) andrographolid (5-20 mg/kg, tiêm phúc mơ) có tác dụng làm tăng số thực bào chuột bị gây suy giảm miễn dịch Ngoài ra, andrographolid (5-20 mg/kg, tiêm phúc mô) làm tăng hàm lượng GSH bị giảm cyclophosphamid - Xây dựng quy trình điều chế chế phẩm bột thơ tiêu chuẩn hóa chế phẩm với hàm lượng diterpen lacton toàn phần 8% - Xây dựng quy trình điều chế chế phẩm bột diterpen lacton tiêu chuẩn hóa chế phẩm với hàm lượng diterpen lacton toàn phần khoảng 10±2% - 528 gà thịt Lương Phượng ngày tuổi thí nghiệm (TN) bố trí ngẫu nhiên vào nghiệm thức, TN gồm lô (lô 1: ðC, không bổ sung chế phẩm, kháng sinh; lô 2; 3; bổ sung bột XTL mức 0,15; 0,30; 0,45%; lô 5: 100 ppm oxytetracycline + 50 ppm tylosine, 12 gà /lô, lần lặp lại ), TN gồm lô (lô 1: ðC, không bổ sung chế phẩm, kháng sinh; lô 2; 3; 4; bổ sung bột diterpen lacton mức 0,15; 0,30; 0,45; 0,60%; lô 6: 100 ppm oxytetracycline + 50 ppm tylosine), 12 gà /lô, lần lặp lại) Khẩu phần ăn lô thỏa i mãn nhu cầu dinh dưỡng giai ñoạn sinh trưởng Bên cạnh đó, 480 heo thịt 90 ngày tuổi (Yorkshire x Landrace x Duroc) TN có thiết kế bố trí ngẫu nhiên vào nghiệm thức gồm lô (lô 1: ðC, không bổ sung chế phẩm, kháng sinh; lô 2; 3; bổ sung bột XTL (TN 1) bột diterpen lacton (TN 2) mức 0,15; 0,30; 0,45%; lô 5: 100 ppm oxytetracycline + 50 ppm tylosine), heo /lô, lần lặp lại Khẩu phần ăn lô thỏa mãn nhu cầu dinh dưỡng giai ñoạn sinh trưởng Các tiêu theo dõi cho TN gà, heo gồm thức ăn tiêu thụ hàng ngày, tăng trọng bình qn giai đoạn sinh trưởng, hệ số tiêu tốn thức ăn, tỷ lệ chết loại thải, tiêu sinh hóa máu (glucose, protein tổng số, almumin, globulin), tiêu vi sinh có phân trước sau sử dụng chế phẩm (Tổng VSVHK, coli form, E coli, Salmonella), tồn dư kháng sinh thịt, gan Kết thúc thí nghiệm chọn loại chế phẩm liều bổ sung thích hợp để thử nghiệm mơ hình gà, heo quy mơ pilot với 1010 gà 456 heo thương phẩm - Sử dụng bột XTL phần gà ni thịt Lương Phượng cải thiện sức sản xuất, nâng cao hiệu sử dụng thức ăn giảm tỷ lệ chết gà, ñồng thời hồn tồn thay sử dụng kháng sinh phần Ở mức bổ sung 0,45% ñã cải thiện 7,5-8,0% tăng trọng, 6,7-7,8% hiệu sử dụng thức ăn, 4,4-5,0% chi phí thức ăn giảm 3,6-5,9% tỷ lệ chết so với không bổ sung Tương tự, sử dụng bột XTL phần heo nuôi thịt ñã cải thiện sức sản xuất, nâng cao hiệu sử dụng thức ăn giảm tỷ lệ chết heo hồn tồn thay sử dụng kháng sinh phần Ở mức bổ sung 0,30% bột XTL ñã cải thiện 7,0-9,0% tăng trọng, 4,0-7,0% hiệu sử dụng thức ăn, 3,7-6,1% chi phí thức ăn giảm 5,5-5,6% tỷ lệ chết so với không bổ sung Trong mơ hình sản xuất gà, heo, sử dụng chế phẩm diterpen lacton chiết xuất từ XTL bảo đảm sản phẩm khơng tồn dư kháng sinh mà cịn có xu hướng cải thiện tăng trọng chi phí tiền thức ăn, thuốc thú y cho ñơn vị sản phẩm ii SUMMARY OF RESEARCH CONTENT Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees (Acanthaceae) is a medicinal plant traditionally used for the treatment of cold, fever, laryngitis and several infectious diseases ranging from malaria to dysentery and diarrhea in China, India and other south east Asian countries The plant is claimed to possess immunological, antibacterial, antiinflammatory and hepatoprotective properties The contents of diterpenoids like andrographolide is the main criteria for monitoring the quality of A paniculata.It has multiple pharmacological properties such as antihepatotoxic, anti-HIV, anticancer, hypoglycemic and hypotensive activities After 1975, A paniculata was use quite popular like antibiotic in Vietnam, but now it is not almost use for treatment aims and does not claim in Vietnamese pharmacopoeia In this report, we want to restore its value in home by means of study on diterpen lactone compounds from Andrographis paniculata Nees for supplementing in foods of broiler poultry and fattener pig The obtained results were as follows: - Surveying and collecting eleven samples of A paniculata from four areas: HCM City, Long An, Binh Duong and Dong Thap provinces The result showed that the samples collected at Dong Thap and Long An were beter than those of other areas - Standardizating of raw material base on Chinese pharmacopea and WHO monographs on selected medicinal plants with the yield of diterpen lactone no lower than 6.0% by means of the colourimetric method - Isolating and identifying andrographolide in yield of 2,4g with purify of 99,8% - Preparing half product with yield of diterpen lactone higher than 50% at laboratorial scale - Four extracts of water, MeOH, EtOH and DCM-MeOH at concentration of 20mg per disc, respectively, showed antibacterial activity on gram-positive bacteria, especially MRSA However, andrographolide as a main diterpen lactone of A paniculata is negative effect on both gram – positive and gram - negative bacteria at concentration of 10mg per disc - The aqueous extract (1 g/kg, p.o.), diterpen lactone extract (200 mg/kg, p.o.) and active component andrographolide (5-20 mg/kg, i.p.) increased phagocytic index of cyclophosphamide-induced immunosuppressive mice Andrographolide (5-20 mg/kg, i.p.) increased hepatic glutathione content decreased by cyclophosphamide The results revealed that Andrographis paniculata could be a source for natural medicines which have immunostimulating effect - Estabishing production of Andrographis paniculata powder and its quality standard with diterpen lactone yield of 8,82-9,52% - Estabishing production of diterpen lactone powder and its quality standard with diterpen lactone yield of 10 ± 2% - 528 one day chicks belong two trials were collected and randomized in to treatments The trial had treatments (T1: control without AP and antibiotic; T2, T3, T4: as control plus 0.15, 0.3, 0.45% APP; T5: as control plus 100ppm iii oxytetracycline + 50ppm tylosine; 12 head/pen, pens/treatment The trial had treatments (T1: control without DLP and antibiotic; T2, T3, T4, T5: as control plus 0.15, 0.3, 0.45, 0.6% DLD; T6: as control plus 100ppm oxytetracycline + 50ppm tylosine; 12 head/pen, pens/treatment) The basal diet was the same in all treatments and met all the poultry requirements In addition, 480 ninety day old crossed pigs belong two the same design trials were collected and randomized in to treatments Each trial had treatments (T1: control without APP and antibiotic; T2, T3, T4: as control plus 0.15, 0.3, 0.45% APP (in trial 1) or DLP (in trial 2); T5: as control plus 100ppm oxytetracycline + 50ppm tylosine; head/pen, pens/treatment The basal diet in the treatments was the same and met all the pig requirements The parameter recorded both of poultry and pig trial were feed intake, weight gain, feed efficiency, mortality, diarrhea, blood biochemical parameters, harm-full organism in feces, antibiotic residue in meat and liver The best product would be chosen to carry out a pilot trial with scale of 1010 broiler poultry and 456 fatterner pigs - Using APP or DLP in broiler diet not only improved growth, feed efficiency, reduced mortality but could replaced completely antibiotic as growth promoter in diet Poultry fed the diet of 0.45% ADP or DLP improved 7.5-8.0% weight gain 6.7-7.8% feed efficiency, 4.4-5.5 feed expense, reduced 3.6-5.9% in compared to control diet Similarly, using APP or DLP in fatterner diet not only improved growth, feed efficiency, reduced mortality but could replaced completely antibiotic as growth promoter in diet Pigs fed the diet of 0.30% ADP or DLP improved 7.0-9.0% weight gain 4.0-7.0% feed efficiency, 3.7-6.1 feed expense, reduced 5.5-5.6% in compared to control diet In the poultry and pig pilot scale, using DLP in diet not only ensured no antibiotic residue in meat but had a trend to improve weight gain and feed expense iv MỤC LỤC TRANG Tóm tắt đề tài (tiếng Việt tiếng Anh) i Mục lục v Danh sách chữ viết tắt vi Danh sách bảng vii Danh sách hình, biểu đồ xi I TỔNG QUAN TÀI LIỆU II NỘI DUNG NGHIÊN CỨU .8 2.1 Khảo sát thực trạng thu thập mẫu 2.2 Xây dựng quy trình chiết tách diterpen lacton tồn phần từ XTL 2.3 Nghiên cứu tác dụng sinh học (kháng khuẩn, miễn dịch) diterpen lacton 10 2.4 ðiều chế sản phẩm dạng bột ñể bổ sung vào thức ăn heo, gà 12 2.5 Thử nghiệm sử dụng chế phẩm heo, gà 12 III PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 3.1 Phương pháp thu thập phân tích mẫu 15 3.2 ðịa ñiểm thí nghiệm 16 3.3 Thu thập xử lý số liệu 16 IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 16 4.1 Khảo sát thực trạng thu thập mẫu 16 4.2 Tiêu chuẩn hóa nguyên liệu 18 4.3 Xây dựng quy trình chiết tách diterpen lacton toàn phần từ XTL 19 4.3.1 ð.tính, đ lượng diterpen lacton andrographolid từ ngun liệu .19 4.3.2 Nghiên cứu quy trình chiết xuất phân lập diterpen lacton 21 4.3.3 Tiêu chuẩn hoá bán thành phẩm .24 4.3.4 Tiêu chuẩn hóa andrographolid làm chuẩn 24 4.4 Nghiên cứu tác dụng sinh học nhóm diterpen lacton 26 4.5 ðiều chế sản phẩm dạng bột ñể bổ sung vào thức ăn heo, gà 31 4.5.1 Quy trình sản xuất sản phẩm dạng bột thô .31 4.5.2 Quy trình điều chế chế phẩm bột diterpen lacton 31 4.6 Thử nghiệm sử dụng chế phẩm heo, gà 40 4.6.1 Thử nghiệm gà 40 4.6.2 Thử nghiệm heo 52 V KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ .63 5.1 Kết luận 63 5.2 ðề nghị 64 TÀI LIỆU THAM KHẢO .64 v BẢNG GHI CHÚ CÁC CHỮ VIẾT TẮT, KÝ HIỆU QUY ƯỚC, KÝ HIỆU DẤU, ðƠN VỊ VÀ THUẬT NGỮ Chữ viết tắt Nghĩa tiếng Việt ACN Acetonitil DCM (CH2Cl2) Diclorometan DMSO Dimethylsulfoxid ðC ðối chứng EtOH Etanol HCl Acid clohydric MeOH Metanol IR Infrared kl/tt Khối lượng/thể tích GSH Glutathione MRSA Methicillin Resistant Staphylococcus aureus MIC Minimum Inhibit Concentration Min Minimum Max Maximum SKLM Sắc ký lớp mỏng SKLHNC Sắc ký lỏng hiệu cao VSVHK Vi sinh vật hiếu khí UV Ultra violet WHO World Health Organisation XTL Xuyên tâm liên DðTQ Dược ñiển Trung Quốc MOS Mannanoligosaccharides KPCS Khẩu phần sở TTTĂ Hiệu sử dụng thức ăn tă Thức ăn tt Tăng trọng BDL Bột Diterpen Lacton vi DANH SÁCH BẢNG STT Trang Tên bảng Danh sách bảng số liệu Bảng 2.1 10 Hiệu suất chiết cao Xuyên tâm liên từ dung môi khác Bảng 4.1 17 Các mẫu khảo sát Bảng 4.2 18 So sánh tiêu khảo sát với tiêu chuẩn dược ñiển Trung quốc WHO Bảng 4.3 19 Các tiêu tiêu chuẩn nguyên liệu thân, XTL Bảng 4.4 19 Bảng giá trị ñộ ẩm nguyên liệu Bảng 4.5 20 Kết phản ứng màu A1, C Bảng 4.6 20 Thứ tự vết sắc ký lớp mỏng XTL Bảng 4.7 21 Hàm lượng diterpen lacton toàn phần dược liệu Bảng 4.8 22 Khối lượng cao chiết dung môi chiết Bảng 4.9 22 Khối lượng diterpen lacton thô trung bình dung mơi chiết Bảng 4.10 22 Hàm lượng diterpen lacton mẫu chiết EtOH Bảng 4.11 23 Hàm lượng diterpen lacton mẫu chiết CH2Cl2 - MeOH Bảng 4.12 23 Hàm lượng diterpen lacton mẫu chiết Bảng 4.13 23 Các tiêu bột bán thành phẩm diterpen lacton Bảng 4.14 24 Kết khảo sát hai phương pháp tách chiết Bảng 4.15 25 Các tiêu andrographolid làm chất chuẩn làm việc Bảng 4.16 26 Các tiêu sản phẩm dạng bột thô Bảng 4.17 26 Tác dụng kháng khuẩn cao XTL Bảng 4.18 27 Nồng ñộ ức chế tối thiểu MIC cao XTL ñối với S aureus MRSA Bảng 4.19 27 Ảnh hưởng dịch chiết nước XTL, cao diterpen lacton andrographolid số lượng bạch cầu tỷ lệ % bạch cầu Bảng 4.20 28 Ảnh hưởng dịch chiết XTL, cao diterpen lacton andrographolid KL gan, lách, tuyến ức, tuyến thượng thận Bảng 4.21 29 Ảnh hưởng dịch chiết nước XTL, cao diterpen lacton, andrographolid số thực bào Bảng 4.22 30 Ảnh hưởng cyclophosphamid hàm lượng glutathione gan chuột Bảng 4.23 30 Ảnh hưởng andrographolid hàm lượng gluthathion gan chuột Bảng 4.24 31 Các tiêu sản phẩm dạng bột thô vii Bảng 4.25 32 Thống kê hàm lượng dịch chiết quy mô pilot (20,15 kg), lần chiết Bảng 4.26 33 Thống kê hàm lượng dịch chiết quy mô pilot (20,1 kg), lần chiết Bảng 4.27 34 Thống kê hàm lượng dịch chiết quy mô pilot (20,25 kg), lần chiết Bảng 4.28 36 Dịch chiết lần ñược gom chung lại, loại màu than hoạt tính Bảng 4.29 37 Kết trộn thủ cơng (trộn cao với tinh bột mì với tỉ lệ 1: 1) Bảng 4.30 37 Các tiêu ñộ tinh khiết bột chiết XTL trộn thủ công Bảng 4.31 38 ðộ ẩm chế phẩm Bảng 4.32 38 Hàm lượng diterpen lacton toàn phần chế phẩm Bảng 4.33 39 Giới hạn nhiễm khuẩn theo DðVN III, phụ lục PL-182 (Dạng uống) Bảng 4.34 39 Tiêu chuẩn chế phẩm bột diterpen lacton Bảng 4.35 40 Khả sinh trưởng gà thí nghiệm Bảng 4.36 41 Hiệu sử dụng thức ăn gà thí nghiệm Bảng 4.37 42 Tỷ lệ chết loại thải gà thí nghiệm Bảng 4.38 42 Hàm lượng vi sinh vật phân gà thời ñiểm 10 tuần tuổi Bảng 4.39 43 Dư lượng kháng sinh thịt gà thời ñiểm 70 ngày tuổi Bảng 4.40 44 Một số tiêu sinh hóa máu thời điểm 70 ngày Bảng 4.41 45 Khối lượng tăng trọng gà thí nghiệm thời ñiểm Bảng 4.42 46 Hiệu sử dụng thức ăn số tiêu khác gà TN Bảng 4.43 47 Ảnh hưởng yếu tố thí nghiệm tới số tiêu sinh hóa máu Bảng 4.44 48 Ảnh hưởng yếu tố thí nghiệm tới số tiêu vi sinh vật Bảng 4.45 48 Ảnh hưởng tương tác yếu tố thí nghiệm tới hàm lượng coliform Bảng 4.46 49 Kết qủa phân tích kháng sinh thịt gan gà thí nghiệm Bảng 4.47 50 Kết qủa phân tích kháng sinh thịt gan gà thí nghiệm Bảng 4.48 51 Kết qủa phân tích kháng sinh thịt gan gà mơ hình Bảng 4.49 52 Khối lượng tăng trọng heo thí nghiệm Bảng 4.50 53 Hiệu qủa sử dụng thức ăn số tiêu khác heo thí nghiệm Bảng 4.51 54 Hàm lượng vi sinh vật phân heo thời ñiểm 202 ngày Bảng 4.52 54 Sự diện salmonella phân heo thời ñiểm 202 ngày Bảng 4.53 55 Một số tiêu sinh hóa máu thời điểm 202 ngày Bảng 4.54 55 Kết phân tích kháng sinh Bảng 4.55 56 Khối lượng tăng trọng heo thí nghiệm viii 4.6.2.3 Kết thực mơ hình chăn ni heo sử dụng chế phẩm Bảng 4.61 Một số tiêu kỹ thuật mơ hình STT Chỉ tiêu theo dõi Mơ hình Quy trình hữu A Thơng số ban đầu (trước cho ăn thức ăn thí nghiệm) Ngày bắt ñầu theo dõi 15/01/2010 15/01/2010 Giống heo Y x L xD Y x L xD Số 224 232 Tỷ lệ ñực /cái 0,44 0,47 Khối lượng heo 92 ngày (kg/con) 26,45±1,85 27,36±1,34 Chế phẩm BDL phần (%) 0,30 - - 0,1 9/5/2010 9/5/2010 (*) Kháng sinh oxytetracyclin (%) B Thông số sản xuất Ngày xuất bán Thời gian nuôi (tuần) 16 16 Số xuất bán (con) 214 222 Tỷ lệ nuôi sống (%) 4,46 4,31 Khối lượng heo 204 ngày (kg/con) 92,46 ±4,35 91,45 ±3,66 Tăng trọng gñ 92-204 ngày (g/con/ngày) 589 572 Thức ăn tiêu thụ (kg /con) 197,2 194,5 Tiêu tốn thức ăn (kg thức ăn/kg tt) 2,98 3,02 10 ðơn giá thức ăn (ñ/kg) 7215 7295 11 Chi phí thú y (đ) 540000 599000 12 Chi phí tiền thức ăn, thuốc thú y (ñ/kg tt) 24138 24729 (*) Ngưng sử dụng kháng sinh 10 ngày trước bán Kết thực mơ hình heo trình bày bảng 3.46 Trước tiến hành thí nghiệm, yếu tố giống, khối lượng, tỷ lệ ñực /cái điều kiện chăm sóc ni dưỡng nhóm heo mơ hình heo quy trình chăn ni hữu bảo đảm tính đồng Trong nhóm mơ hình, thức ăn bổ sung BDL với mức 0,30%, mức có tác dụng tốt tới sức sản xuất heo qua thí nghiệm dinh dưỡng Trong nhóm quy trình hữu kháng sinh oxytetacycline ñược sử dụng phần với liều 100 ppm để phịng bệnh kích thích sinh trưởng Thời gian ngưng sử dụng kháng sinh 10 ngày trước xuất bán Kết thí nghiệm cho thấy tiêu sản xuất heo ăn phần bổ sung 0,15% BDL có xu hướng cải thiện so với heo ăn phần có bổ sung kháng sinh liều phịng bệnh kích thích sinh trưởng Tuy nhiên sai khác chưa có ý nghĩa thống kê (P>0,05) Khối lượng tăng trọng heo có xu hướng cải thiện nhóm mơ hình sử dụng 0,30% BDL phần (tương ứng 92,46 kg/con 589 g/con/ngày so với 91,45 kg/con 572 61 g/con/ngày) Tương tự, hệ số chuyển hóa thức ăn tỷ lệ hao hụt có xu hướng tương đương nhóm heo (2,98 so với 3,02 kgtă /kgtt 4,46 so với 4,31%) Tuy nhiên, chi phí tiền thức ăn thuốc thú y cho kg tăng trọng nhóm heo mơ hình giảm thấp 3,0% so với nhóm heo chăn ni theo quy trình hữu (24.138 24.729 ñ/kgtt) Nguyên nhân giảm ñáng kể chi phí thuốc thú y, đơn giá thức ăn nhóm heo mơ hình thấp so với nhóm heo chăn nuôi hữu Bảng 4.62 Kết phân tích kháng sinh thịt gan heo mơ hình (ppm) Kháng sinh Mơ hình Quy trình hữu Mẫu khảo sát (mẫu) Mẫu tồn dư (mẫu) 0 Trung bình KPH KPH Min - - Max - - Mẫu khảo sát (mẫu) Mẫu tồn dư (mẫu) KPH Trung bình KPH 0,15 Min KPH 0,15 Max KPH 0,15 Oxytetracyclin thịt gà (ppm) Oxytetracyclin gan gà (ppm) KPH : Không phát Không phát kháng sinh tồn dư mẫu thịt gan gà thuộc nhóm mơ hình tuần giai đoạn 10 tuần tuổi có sử dụng kháng sinh để phịng bệnh Tương tự, nhóm quy trình hữu, khơng phát tồn dư kháng sinh thịt heo ðối với gan heo, có phát tồn dư kháng sinh tỷ lệ mẫu có tồn dư thấp (17%) hàm lượng tồn dư không cao (0,15 ppm) Thời gian không sử dụng kháng sinh trước xuất bán nguyên nhân quan trọng làm giảm thiểu tồn dư kháng sinh thịt gan heo Nhận xét: Sử dụng chế phẩm BDL chiết xuất từ Xuyên tâm liên phần heo ni thịt mơ hình sản xuất khơng thay hồn tồn kháng sinh mà cịn có xu hướng cải thiện tăng trọng chi phí tiền thức ăn, thuốc thú y cho ñơn vị sản phẩm 4.6.3 Ưu khả ứng dụng vào sản xuất dạng sản phẩm Trong ñiều kiện thí nghiệm, ảnh hưởng loại chế phẩm (bột XTL thơ bột diterpen lacton) tới tính sản xuất heo, gà thương phẩm Theo ñó, sử dụng bột XTL hay bột diterpen lacton với tỷ lệ 0,45% phần gà 0,3% phần heo hồn tồn thay kháng sinh phần mà khơng có ảnh hưởng tới sức sản xuất Bên cạnh đó, tăng trọng; hiệu sử dụng thức ăn, tiền chi phí thức ăn tỷ lệ hao hụt heo, gà ñược cải thiện tương ứng 7,5-8,5%; 6,7-7,8%; 4,4-6,1% 5,5-5,9% so với không bổ sung chế phẩm kháng sinh phần Tuy nhiên, ñiều kiện sản xuất, sử dụng chế phẩm bột diterpen lacton phần thuận lợi ưu sau: 62 - Giảm ñáng kể khối lượng nguyên liệu sử dụng: theo kết khảo sát, tỷ lệ diterpen lacton nguyên liệu XTL 7,89%, hiệu suất chiết xuất diterpen lacton ñạt 89,45% hàm lượng diterpen lacton cao ñặc 74,63% Như 100 kg nguyên liệu sản sản xuất ñược 9,45 kg diterpen lacton dạng cao ñặc (100 x 0,0789 x 0,8945 /0,7463) Khối lượng ñã giảm 10 lần so với sử dụng nguyên liệu - Chi phí vận chuyển, chi phí kho chứa sở sản xuất giảm ñi nhiều sử dụng chế phẩm diterpen lacton so với bột thô XTL thô thể tích khối lượng giảm khoảng 10 lần - Tính ổn định sản phẩm diterpen lacton ñiều kiện bảo quản sở sản xuất tốt so với sản phẩm bột XTL thô Với bột thành phẩm ditrpen lacton, chiếm thể tích ít, ñược bảo quản kho lạnh với thuốc thú y 40C (kho lạnh phổ biến sở chăn nuôi nhà máy sản xuất thức ăn) Ở ñiều kiện chất lượng sản phẩm có tính ổ định cao Trong bột thơ XTL, tích lớn, bảo quản kho thường ñiều kiện nhiệt độ mơi trường Do khơng tránh khỏi bị nhiễm nấm (đặc biệt aflatoxin), mốc, chuột, trùng cắn phá thời gian bảo quản không bảo ñảm an toàn sử dụng phần heo, gà - Sử dụng bột diterpen lacton dễ trộn vào thức ăn hỗn hợp so với bột thô XTL đồng hất kích cỡ so với ngun liệu thức ăn chăn ni có phần - Giá thành sản phẩm sản phẩm diterpen lacton thấp khoảng 20% so với sản phẩm loại tị trường chấp nhận (38.000đ /kg so với 48.000đ /kg) - Chính lý nên xây dựng mơ hình phạm vi ñề tài ñã sử dụng bột diterpen lacton không sử dụng bột thô XTL V KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 5.1 Kết luận ðã khảo sát thực trạng thu thập 11 mẫu ñịa bàn Tp HCM, Long An, Bình Dương, ðồng Tháp Kết cho thấy mẫu thu hái ðồng Tháp Long An tốt so với nơi khác Tiêu chuẩn hóa ngun liệu dựa dược điển Trung Quốc WHO Trong ño hàm lượng diterpen lacton tồn phần 6,0% theo phương pháp đo quang ðã lựa chọn EtOH 96% dung môi hợp lý dùng chiết xuất ñiều chế bột bán thành phẩm diterpen lacton xây dựng quy trình sản xuất áp dụng quy mơ pilot ðiều chế bột bán thành phẩm với hàm lượng diterpen lacton 50% quy mơ phịng thí nghiệm Phân lập xác ñịnh cấu trúc andrographolid thu ñược 2, 4g với ñộ tinh khiết 99,8% Các loại cao XTL có tác dụng ức chế S aureus MRSA lại khơng có tác dụng E coli, Salmonella typhimurium, Shigella spp Streptococcus pyogenes Riêng andrographolid thành phần hợp chất hợp chất diterpen lacton XTL khơng thể tính kháng khuẩn nồng ñộ khảo sát ðiều cho thấy phức tạp chế kháng khuẩn XTL việc chữa bệnh tiêu chảy, kiết lỵ lâm sàng Dịch chiết nước (1g/kg, uống), cao diterpen lacton (200 mg/kg, uống) andrographolid (5-20 mg/kg, tiêm phúc mơ) có tác dụng làm tăng số thực bào chuột bị gây suy giảm miễn dịch Ngoài ra, andrographolid (5-20 mg/kg, tiêm phúc mô) làm tăng hàm lượng glutathion bị giảm cyclophosphamid Kết thu nhận từ 63 ñề tài sở cho định hướng nghiên cứu sử dụng Xuyên tâm liên trồng Việt Nam cho dạng bào chế thuốc có tác dụng hỗ trợ ñiều trị ung thư theo hướng tăng cường miễn dịch Xây dựng quy trình điều chế chế phẩm bột thơ tiêu chuẩn hóa chế phẩm với hàm lượng diterpen lacton toàn phần 8% Xây dựng quy trình điều chế chế phẩm bột diterpen lacton tiêu chuẩn hóa chế phẩm với hàm lượng diterpen lacton toàn phần khoảng 10±2% Sử dụng bột Xuyên tâm liên chế phẩm diterpen lacton chiết xuất từ Xuyên tâm liên phần gà nuôi thịt Lương Phượng ñã cải thiện sức sản xuất, nâng cao hiệu sử dụng thức ăn giảm tỷ lệ chết gà, đồng thời hồn tồn thay sử dụng kháng sinh phần Ở mức bổ sung 0,45% ñã cải thiện 7,58,0% tăng trọng, 6,7-7,8% hiệu sử dụng thức ăn, 4,4-5,0% chi phí thức ăn giảm 3,61-5,90% tỷ lệ chết so với không bổ sung 10 Sử dụng bột Xuyên tâm liên chế phẩm diterpen lacton chiết xuất từ Xuyên tâm liên phần heo ni thịt cải thiện sức sản xuất, nâng cao hiệu sử dụng thức ăn giảm tỷ lệ chết heo hoàn tồn thay sử dụng kháng sinh phần Ở mức bổ sung 0,30% ñã cải thiện 7,78-8,50% tăng trọng, 5,23-7,0% hiệu sử dụng thức ăn, 4,04-6,10% chi phí thức ăn giảm 5,55-5,60% tỷ lệ chết so với không bổ sung 11 Ứng dụng sản xuất chế phẩm diterpen lacton cho chăn nuôi công nghiệp có nhiều ưu so với sản xuất chế phẩm bột xuyên tâm liên thô 5.2 ðề nghị - Kính đề nghị Hội đồng cơng nhận kết thí nghiệm - ðề nghị cho tiến hành dự án sản xuất thử nghiệm chế phẩm diterpen lacton VI TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ Y tế Quyết ñịnh số 46 /2007/Qð-BYT ngày 19 tháng 12 năm 2007 Bộ trưởng Bộ Y tế) V/v ban hành Quy ñịnh giới hạn tối đa nhiễm sinh học hóa học thực phẩm Võ Văn Chi (1999) Tự ñiển thuốc Việt Nam NXB Y học, 1354-1355 Võ Văn Chi, Trần Hợp (1999) Cây cỏ có ích Việt Nam, NXB Giáo Dục, Tập2, 207208 Nguyễn Mạnh Cường, Trần Văn Sung (1997), Tạp chí Dược học, 1, pp.13-14 2Phạm Hoàng Hộ, Cây cỏ Việt Nam, NXB Trẻ, Quyển III, 2000, 60 Hội ñồng Dược ñiển (2002) Dược ñiển Việt Nam III NXB Y học Nguyễn Thị Thu Hương, Phạm Thị Mỹ Loan (2007) - Tác dụng Sâm Việt nam ðinh lăng thực nghiệm suy giảm miễn dịch Tạp chí Dược liệu, 12 (3+4), 119-123, Lã Văn Kính, ðặng Thị Hạnh, Bùi Văn Miên Nguyễn Ngọc ðiền (2001) Nghiên cứu giải pháp sản xuất chế biến thịt lợn, gà an tồn Báo cáo khoa học Bộ Nơng nghiệp PTNT 2000-2001, Tiểu ban Chăn nuôi-Thú y, phần dinh dưỡng thức ăn chăn nuôi (các báo cáo bổ sung) 64 Lã Văn Kính, Nguyễn Ngọc ðiền, Vương Nam Trung (2005) Nghiên cứu giải pháp sản xuất chế biến thịt lợn, gà an tồn giai đoạn Báo cáo tổng kết nghiệm thu ñề tài, Sở Khoa học –Cơng nghệ TP HCM 10 Lã Văn Kính, Phạm Tất Thắng, Vương Nam Trung, ðoàn Vĩnh, Nguyễn Văn Phú (2001) Nghiên cứu ảnh hưởng việc bổ sung axit hữu phần ăn heo sau cai sữa Báo cáo tổng hợp ñề tài cấp nhà nước KHCN 08-06 Trang 23 11 Phan Ngọc Kính (2001) Sử dụng chế phẩm vi sinh vật hữu hiệu (EM) chăn ni lợn thịt Tạp chí Chăn ni (4): 5-7 12 Nguyễn Viết Tựu, Nguyễn Kim Hương, Trịnh Nguyệt Hồng, Trần Thị Trung Trinh (1985) Nghiên cứu hóa học Xuyên tâm liên trồng TP.HCM Kỷ yếu cơng trình nghiên cứu dược liệu 1979-1985 - Phân viện dược liệu TP.HCM, trang 32-34 13 Viện dược liệu (2004) Cây thuốc ñộng vật làm thuốc Việt Nam NXB Khoa học Kỹ thuật, Tập II, 1138-1143 14 Viện Dược liệu - Bộ Y Tế (2006) - Phương pháp nghiên cứu tác dụng dược lý thuốc từ dược thảo, 151-158, 171-183, 377-387 15 Akbarsha, M.A P Murugaian (2000) Aspects of the male reproductive toxicity/male antifertility property of andrographolide in albino rats: Effect on the testis and the cauda epididymidal spermatozoa J Phytother Res 14(6): 432-435 16 Akbarsha, M.A., B Manivannan., K.S Hamid B Vijayan (1990) Antifertility effect of Andrographis paniculata Nees in male albino rat Indian J Exp Biol 28: 421-426 17 Akowuah G.A., Zhari I., Norhayati I and Mariam A (2006) HPLC and HPTLC densitometric determination of andrographolides and antioxidant potential of Andrographis paniculata Journal of Food Composition and Analysis, 19, 2-3, 118-126 18 Chan W.R., Taylor D.R., Willis C R and Bodden R L (1971) The structure and stereochemistry of neoandrographolide, a diterpen glucoside from Andrographis paniculata Nees Tetrahedron, 27, 21, 5081-5091 19 Chiou W.F., Lin J.J and Chen C F (1998) Andrographolide suppresses the expression of inducible nitric oxide synthase in macrophage and restores the vasoconstriction in rat aorta treated with lipopolysaccharide British Journal of Pharmacology, 125, 327 – 334 20 Du Q., Jerz G., Winterhalter P (2003) Separation of andrographolide and neoandrographolid from the leaves of Andrographis paniculata using high-speed countercurrent chromatography Journal of Chromatography A, 984,147-151 21 Dua V.K., Ojha V.P., Roy R., Joshi B.C., Valecha N., Devi C.U., Bhatnagar M.C., Sharma V.P and Subbarao S.K (2004) Anti-malarial activity of some xanthones isolated from the roots of Andrographis paniculata Jounal of Ethnopharmacology, 95, 2-3, 247251 22 Duke, j.a E.S Ayensu (1985) Medicinal plants of China Vol.1 Algonac, Mich, Publications, 705 23 Economic Research Service (ERS) (1996) Bacterial foodborne disease Agricultural economic report N0 741 Washington D.C, USA 24 Iinstitute of Medicine (IOM) (1998) Antimicrobial resistance: Issues and options National Academy Press, Washington D.C 65 25 Hissin P.J., Hilf R (1976) - A fluorometric method for determination of oxidized and reduced glutathione in tissues Anal Biochem., 74, 214-226 26 Huong N.T.T., Matsumoto K., Nham N.T., Quang N.H., Duc N.M., Yamasaki K., Watanabe H (1996) - Effects of Vietnamese ginseng on the phagocytosis in vitro and in vivo Phytomedicine, 4, 341-346 27 Jain D.C., Gupta M.M., Saxena S., Kumar S (2000) LC analysis of hepatoprotective diterpenoids from Andrographis paniculata Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 22, 705–709 28 Kumar R.A., Sridevi K., Kumar N.V., Nanduri S and Rajagopal S (2004) Anticancer and immunostimulatory compounds from Andrographis paniculata Journal of Ethnopharmacology, 92, 2-3, 291-295 29 Kumaran K.S., Thirugnanasambantham P., Viswanathan S., Murphy M.S.R (2003), "An HPLC for estimation of andrographolide in rabbit serum", India Journal of Pharmacology, 35, pp.109-112 30 Gaind K.N., Dar R.N and Kaul R.N (1963), Ind J Pharm., 25, pp.225–226 31 Mathivanan R., Edwin S.C., Amutha R and Viswanathan K (2006) Panchagavya and Andrographis paniculata as Alternatives to Antibiotic Growth Promoter on Broiler Production and Carcass Characteristics International Journal of Poultry Science (12): 1144-1150, 2006 ISSN 1682-8356 32 Maiti P.C., Kanji S.K and Chatterjee R (1959), "Studies in kalmegh extracts", Ind J Pharm., 21, pp.169 33 Martz W (1992) Plants with a reputation against snakebite Toxicon, 30, 10, 1131-1142 34 Mishra S.K., Sangwan N.S and Sangwan R.S (2007) Andrographis paniculata (Kalmegh): A Review Pharmacognosy Reviews, Vol 1(2), 283-298 35 Patarapanich C., Laungcholatan S., Mahaverawat N., Chaichantipayuth C and Pummangura C.(2007), "HPLC determination of active diterpene lactones from Andrographis paniculata Nees planted in various season and regions in Thailand", Thia J Pharm Sci., 31, pp.91-99 36 Pharmacopoeia of The People’s Republic of China (2005) People’s Medical Publishing House, Vol I, 121 37 Pharmacopoeia of The People’s Republic of China (1997) Chemical Industry press Beijing, China, Vol I, 83-84 38 Pholphana N., Rangkadilok N., Thongnest S., Ruchirawat S., Ruchirawat M., Satayavivad J (2004), "Determination and Variation of three active diterpenoids in Andrographis paniculata", Phytochem.Anal., 15, pp.365-371 39 Pinye Z., Nuanbing P and Weijie J (1984), J Pharm Anal., 4, pp.34–36 40 Qizhen D., Jerz G., Winterhalte P (2003) Separation of andrographolide and neoandrographolide from the leaves of Andrographis paniculata using high-speed counter-current chromatography Journal of Chromatography A, 984, 147–151 41 Rajani M., Shrivastava N., Ravishankara M.N., A rapid method for isolation of Andrographolide from Andrographis paniculata Nees Pharmaceutical Biology, 38, 3, 204-209 66 42 Rao Y.K., Vimalamma G., Rao C.V and Tzeng Y.M (2004) Flavonoids and andrographolides from Andrographis paniculata, Phytochemistry, 65, 16, 2317-2321 43 Reddy V.L.N, Reddy S.M., Ravikanth V., et al (2005) A new BIS-Andrographolide Ether from Andrograhis paniculata Nees and evaluation of anti-HIV activity Natural Product Research, 19, 3, 223-230 44 Reyes B.A.S., Bautista N.D., Tanquilut N.C., Anunciado R.V., Leung A.B., Sanchez G.C., Magtoto R.L., Castronuevo P., Tsukamura H and Maeda K.I (2006) Anti-diabetic potentials of Momordica charantia and Andrographis paniculata and their effects on estrous cyclicity of alloxan-induced diabetic rats Journal of Ethnopharmacology, 105, 12, 196-200 45 Ruengsitagoon W., Anuntakarun K and Aromdee C (2006) Flow injection spectrophotometric determination of andrographolide from Andrographis paniculata , Talanta, 69, 4, 900-905 46 Sengupta S.P., Banerjee S.and Chakravarty D (1949), Ind J Pharm 11, pp.77–78 47 Sheeja K., Kuttan G (2006) – Ameliorating effects of Andrographis paniculata extract against cyclophosphamide-induced toxicity in mice Asian Pac J Cancer Prev., 7(4), 609614 48 Singha P.K., Roy S and Dey S (2003) Antimicrobial activity of Andrographis paniculata Fitoterapia, 74, 7-8, 692-694 49 Sithisomwongse, N., J Phengchata S Cheewapatana (1989) Acute and chronic toxicity of Andrographis paniculata Nees J Thai Pharm Sci 14(2): 109-117 50 Srivastava S.K., Bose P.C., Ray G.K and Mukherjee B.(1959), Ind J Pharm 21, pp.229– 230 51 Srivastava A., Misra H., Verma R.K., Gupta M.M.(2004), "Chemical Fingerprinting of Andrographis paniculata using HPLC, HPTLC and Densitometry", Phytochem Anal., 15, pp.280-285 52 Sujikara, l (2000) Andrographis paniculata A paper presented at an International Conference on Tropical Agriculture for better health and environment at Kasetsart University, Kampaengsaen, Nakornpathom, 29 Nov.-1 Dec 2000 Thailand pp 53 Talukdar P.B., Banerjee S., Chatterjee P.K., Dutta A.K (1968) Studies on the Estimation of Andrographolide in Andrographis paniculata (Nees) Ind J Chem, 6, 359–363 54 Thai Hebal Pharmacopoeia (1995) Prachachon Co Ltd., Bangkok ,Vol I 55 Tipakorn N.(2002) Effects of Andrographis paniculata (Burm.F.) Nees on performance, mortality and coccidiosis in broiler chickens Doctoral Dissertation, Georg-AugustUniversity, Gottingen, Germany 56 Tripathi R., Mohan H and Kamat J.P (2007) Modulation of oxidative damage by natural products Food Chemistry, 100, 1, 81-90 57 World Health Organization (2002) WHO monographs on selected medicinal plants Geneva,vol 2, 12-24 58 Xu Y., Marshall R.L and Mukkur T.K.S (2006) An Investigation on the Antimicrobial Activity of Andrographis paniculata Extracts and Andrographolide in vitro Asian Journal of Plant Sciences, 5(3), 527 – 530 67 59 Zaidan, M.R.S., Noor Rain, Badrul, Adlin, Norazah & Zakiah (2005) In vitro screening of five local medicinal plants for antibacterial activity using disc diffusion method Tropical Biomedicine, 22(2), 165 – 170 60 Mathivanan R, and Kalaiarasi K 2007 Panchagavya and Andrographics paticulata as alternatives to antibiotic growth promoters on haematocological, serum biochemical parameters and immune status of broilers The Journal of Poultry Science, 44: 198-204, 2007 61 Sapcota, D., R Islam and A.K Medhi, 2005 Efficacy of Andrographis paniculata in ameliorating aflatoxicosis in broilers Ind Vet J., 82: 529-532 62 Khajarern et al., 2005 Effects of dietary substitution of andrographis powder for a mixed AGPs on growth performance of nursery piglets Proceedings AHAT/BSAS Conference in Khon Kaen Thailand Vol II T115 CHỦ TRÌ ðỀ TÀI CƠ QUAN CHỦ TRÌ ðỀ TÀI 68 PHỤ LỤC ðối chiếu với chuẩn sắc ký lớp mỏng Hình a Sắc ký mỏng tinh thể thu ñược xem tia UV254 sau phun thuốc thử màu KT : Kết tinh A1 A+KT : Kết tinh A1 chấm chung với andrographolid chuẩn A : Andrographolid chuẩn Nhận xét : SKLM cho thấy A1 trùng với andrographolid chuẩn ðiểm nóng chảy Nhiệt độ nóng chảy 229 ºC Bảng a So sánh nhiệt độ nóng chảy A1 andrographolid ðiểm nóng chảy ( C) A1 229 Andrographolid [27,35] 226-230 Phổ tử ngoại UV mAU 225 200 150 100 324 50 225.0 Hình 3.12 Phổ UV andrographolid A1 250.0 275.0 300.0 nm Hình 3.23 Phổ UV Bảng b So sánh phổ tử ngoại A1 andrographolid λmax (nm) A1 Andrographolid [35] 203 224 206 226 Phổ hồng ngoại IR 100.0 %T 90.0 80.0 70.0 3651.0 3751.3 3853.5 60.0 418.5 484.1 777.3 640.3 459.0 696.3 736.8 509.2 815.8 1159.1 553.5 893.0 1134.1 715.5 1267.1 1348.1 873.7 657.7 572.8 1647.1 1294.1 1112.9 1417.6 1458.1 920.0 1087.8 1367.4 2678.9 3093.6 50.0 40.0 2868.0 2979.8 2958.6 2848.7 2927.7 3319.3 30.0 20.0 1674.1 3398.3 10.0 1201.6 906.5 1074.3 1012.6 1220.9 981.7 1031.8 0.0 4000.0 3500.0 3000.0 2500.0 2000.0 Mau A BMKN sang 12 / / 2008 1728.1 1750.0 1500.0 1250.0 1000.0 750.0 500.0 1/cm Hình b Phổ IR A1 Bảng c So sánh phổ hồng ngoại A1 andrographolid IR (cm-1) Nhóm chức -OH -CH2C =O (Vòng lacton) C=C =CH2- A1 Andrographolid [35] 3398,3 2868,0 1728,1 1674,1 906,5 3450 2880 1730,0 1674,1 906,5 Sắc ký lỏng ghép phối phổ LC - MS Hình c Sắc ký lỏng ghép khối phổ LC-MS A1 Bảng d So sánh khối phổ MS A1 andrographolid [M + H]+ A1 Andrographolid [27,41] 351 351 Phổ 1H_ NMR Hình d Phổ 1H_NMR andrographolid Hình e Phổ 1H_NMR A1 Bảng e So sánh mũi tương tác A1 andrographolid δH, ppm Số thứ tự A1 Andrographolid [20] 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 1,80 (H, m) 1,28 (H, m) 1,78 (2H, m) 3,38 (H, m) _ 1,32 (H, m) 1,28 (H, m) 1,90 (H, m) 2,04 (H, m) 2,42 (H, m) _ 1,91 (H, dd 9,4 ; 5,0) _ 2,58 (2H, m) 6,83 (H, dd 6,7 ; 5,4) _ 5,00 (H, d 6,0) 4,46 (H, dd 10,2 ; 6,1) _ 4,87 (H, o) 1,28 (3H, s) 4,12 (H, d 11,5) 3,35 (H, d 11,5) 0,74 (3H, s) 1,82 (H, m) 1,26 (H, m) 1,79 (2H, m) 3,42 (H, m) _ 1,30 (H, m) 1,26 (H, m) 1,85 (H.m) 2,01 (H, m) 2,42 (H, m) _ 1,98 (H, dd.) _ 2,57 (2H, m) 6,92 (H, dd.) _ 4,97 (H, d.) 4,45 (H, dd.) _ 4,89 (2H, s) 1,23 (H, s) 4,17 (H, d.) 3,31 (H, d.) 0,74 (3H, s) Ghi : m = multiplet (mũi ña), s = singlet (mũi ñơn), d = doublet (mũi ñôi), o = overlapped picks (xen phủ) Thành phần thực liệu phần thức ăn gà thịt STT Nguyên liệu thô (kg) 0-5 tuần tuổi 6-10 tuần tuổi Bắp 679 725,3 Bột sị 14,5 14,4 Premix vi khống 2,5 2,5 Lysine 1,7 0,8 Methionine 2,7 1,8 Dầu nành 15,0 15,0 NaCl 4,7 4,8 Kenzym 1,0 1,0 Dicalcium phosphate 12,2 13,7 10 Khô nành US 48% 236,7 190,7 11 Bột cá 60% 30,0 30,0 Tổng 1000 1000 Giá trị dinh dưỡng (%) Vật chất khơ 87,12 87,1 Năng lượng trao đổi (kcal /kg) 3050 3050 Protein 19 17 Lysine 1,10 0,90 Thành phần thực liệu phần thức ăn heo thịt STT Nguyên liệu (kg) Giai ñoạn 25-60 kg Giai ñoạn 60-95 kg Bắp 500 500 Tấm gạo 90,2 56,1 Cám gạo 105 238,8 Cám mỳ 60 32,9 Khơ đậu nành 187,8 117,8 Bột sò 15,7 12,7 L-Lysine 2,5 2,4 Muối ăn 4,4 4,1 Bột cá 25 25 10 DCP 6,9 7,7 11 Premix Khoangvitamin 2,5 2,5 Giá trị dinh dưỡng VCK (%) 87,22 86,87 ME (Kcal/kg) 3250 3150 Protein (%) 17,0 15,0 0,9 0,75 (*) Lysine (%) (*) Giá trị ước tính, axít khác tính tỷ lệ tương đối so với lysine theo NRC, 1998 Bài báo khoa học Phạm Nguyễn Thùy An, Nguyễn Ngọc Ẩn, Trần Cơng Luận, 2008 – Xác định hàm lượng hợp chất diterpen lacton tác dụng kháng khuẩn Xuyên tâm liên (Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees Tạp chí Y học TP.HCM, tập12, phụ số 4, 124-130 Lê Minh Triết, Dương Thị Công Minh, Nguyễn Thị Thu Hương, Trần Công Luận, 2008 – Tác dụng Xuyên Tâm liên (Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees, Acanthaceae) thực nghiệm gây suy giảm miễn dịch cyclophosphamid Tạp chí Y học TP.HCM, tập12, phụ số 4, 142-147 Trần Công Luận, Nguyễn Trọng Bằng, Hứa Thị Như Cẩm, Phùng Thế ðồng, 2009 – Phân lập xây dựng quy trình định lượng diterpen lacton Xuyên tâm liên kỹ thuật sắc ký lỏng hiệu cao Tạp chí Y học TP.HCM, phụ tập 13, số 1, 46-54 Vương Nam Trung Trần Công Luận 2010 Sản xuất sử dụng chế phẩm Diterpen Lacton chiết xuất từ Xuyên tâm liên bổ sung vào thức ăn chăn nuôi Phần Xây dựng quy trình sản xuất chế phẩm Diterpen Lacton chiết xuất từ Xuyên tâm liên Tạp chí chăn ni tháng 11/2010, trang 36-42 Vương Nam Trung Trần Công Luận 2010 Sản xuất sử dụng chế phẩm Diterpen Lacton chiết xuất từ Xuyên tâm liên bổ sung vào thức ăn chăn nuôi Phần Nghiên cứu sử dụng chế phẩm Diterpen Lacton chiết xuất từ Xuyên tâm liên ñể thay kháng sinh phần heo, gà thương phẩm Tạp chí chăn ni tháng 12/2010, trang 2-9 Hướng dẫn khóa luận tốt nghiệp: ðại học Phạm Nguyễn Thùy An (2006) Phân lập Andrographolid xác định hàm lượng diterpen lacton Xuyên tâm liên (Andrographis paniculata Nees) với tác dụng kháng khuẩn chúng Chun ngành sinh hóa, ðH Khoa học tự nhiên Nguyễn Ngọc Ẩn (2007) Khảo sát khả kháng vi khuẩn gây bệnh prebiotic Xuyên tâm liên (Andr ographis paniculata (Burm.f.) Nees) Thiều Thị Nhàn (2007) Xây dựng quy trình ñịnh lượng hàm lượng diterpen lacton andrographolid Xuyên tâm liên (Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees) phương pháp ño quang phương pháp sắc ký lớp mỏng kết hợp với ño quang Lê Văn Tài (2007) Nguyên cứu ñiều kiện chiết xuất andrographolid từ Xuyên tâm liên (Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees) ñiều kiện Việt Nam Nguyễn Trọng Bằng (2008) Xây dựng qui trình ñịnh lượng diterpen lacton có xuyên tâm liên kỹ thuật sắc kí lỏng hiệu cao Khoa Dược- ðH Y Dược Tp HCM Võ Thế Lâm (2009) Hồn thiện quy trình tách chiết định lượng diterpen lacton Xuyên tâm liên (Andrographis paniculata (Burm f.) Nees) Thạc sỹ Nguyễn Sen (2010) Nghiên cứu quy trình chiết xuất sử dụng nhóm họat chất diterpen lacton từ Xuyên tâm liên (Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees) thay kháng sinh phần gà Lương Phượng Chuyên ngành sinh hóa, ðH Khoa học tự nhiên Nguyễn Thị Yến (2010) Nghiên cứu quy trình chiết xuất sử dụng nhóm họat chất diterpen lacton từ Xuyên tâm liên (Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees) thay kháng sinh phần heo thịt thương phẩm Chuyên ngành chăn nuôi, ðH Nông Lâm TP HCM