ĐỊNH TINH VIBRIO CHOLERAE TRONG THỰC PHẨM

BỘ CÔNG THƯƠNG BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP.HCM TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP.HCM KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM GVHD: NGUYỄN THỊ MỸ LỆ NGUYỄN THỊ MỸ LỆ SVTH: NHÓM 8 NỘI DUNG Hình ảnh về Vibrio cholerae dưới kính hiển vi sau khi được nhuộm màu 1 Giới thiệu về Vibrio Cholerae 1 Phân loại khoa học Giới (regnum): Bacteria Ngành (phylum): Proteobactreia Lớp (class): Gamma proteobacteria Bộ (ordo): Vibrionales Họ (familia): Vibrionaceae Chi (genus): Vibrio Loài (species): V.cholerae Giới thiệu về Vibrio Cholerae 1 - Thuộc giống Vibrio - Phẩy khuẩn gram âm, kỵ khí tùy nghi, có khả năng di dộng - Phát triển ở nhiệt độ 42 0 C, có thể tồn tại cả ở nước mặn và nước ngọt - Phát triển nhanh trong thực phẩm ở nhiệt độ thường và trong thực phẩm giữ lạnh - đông lạnh nhưng ở điều kiện khô không sống quá 48h - Rất nhạy với nhiệt nên loại bỏ dễ dàng bằng đun nấu. V. cholerae gây bệnh dịch tả do vệ sinh kém, nguồn nước ô nhiễm, nhưng cũng có thể gây ngộ độc thực phẩm. Các chủng V.cholerae gây dịch chủ yếu thuộc 2 nhóm huyết thanh O1 và O139 Cholerae lên men không sinh khí, có khả năng làm dịch hóa gelatin Có khả năng khử nitrat thành nitrit và phân giải trytophan thành indol Vibrio cholerae phát triển được ở vùng có nồng độ muối cao 3% Có khả năng lên men đường glucose, sucrose,mannose, khử lysine Cách thức sinh trưởng của Vibrio cholerae Cách thức sinh trưởng: Quy trình phân tích 2 [...]... kháng huyết thanh V cholerae theo bảng 1 và bảng 2 Bảng 2 – Phân biệt các kiểu chủng huyết thanh chủng V cholerea O1 Đọc kêt quảKháng Kháng Kháng Dung dịch Kết luận nguyên huyết Phát hiện hoặc khônghuyết thanh đượcsinh phát hiện muối V.cholera trong thanh Inada Ogawa lý 25 g mẫu V Cholerae O1 + - - Chủng Inaba V Cholerae O1 - + - Chủng Ogawa V Cholerae O1 + + - Chủng Hikojima V .Cholerae O1 - - - Chủng... Nhuộm gram V Cholerae là vi khuẩn gram âm, hình cong dạng dấu phẩy TN sinh hóa khẳng định Mt đục Cấy vi khuẩn từ TSA vào một ống canh thang trypton 1% NaCL Ủ ở nhiệt độ 420C trong 18 – 24h V cholera phát triển được ở nhiệt độ 420C làm môi trường đục Mt đầu TN sinh hóa khẳng định  TN cacbonhydrat Phản ứng dương tính khi môi trường có màu vàng, âm tính khi môi trường giữ nguyên màu đỏ V Cholerae cho... hành phân tích Tiến hành phân tích V Cholerae trên TCBS Bước 4 TN sinh hóa sơ bộ TN sinh hóa khẳng định Thử nghiệm sinh hóa Kháng huyết thanh www.themegallery.com TN sinh hóa sơ bộ - Chọn ít nhất 3 khuẩn lạc nghi ngờ trên TCBS để cấy sang môi trường không chọn lọc TSA 2% NaCl - Ủ ở nhiệt độ 370C trong 18 – 24h - Khuẩn lạc mọc trên môi trường này được sử dụng để thực hiện các thử nghiệm sinh hóa TN... ngưng kết ở giọt nước muối Tóm tắt thử nghiệm kháng huyết thanh V cholerae theo bảng 1 và bảng 2 Bảng 1 – Phân biệt V cholerea O1 và V cholerae non – O1 Kháng nguyên Kháng huyết thanh đa giá O1 Dung dịch muối sinh lý Kết luận Chủng có kết quả sinh hóa tương tự V cholera + - V Cholerae O1 Chủng có kết quả sinh hóa tương tự V cholera - - V Cholerae non – O1 Chủng có kết quả sinh hóa tương tự V.cholera +... 6; 8 và 10% V cholera phát triển được trong ống canh thang có nồng độ NaCl là 0%, 1%, 3% và làm đục môi trường TN sinh hóa sơ bộ  TN lên men – oxy hóa Cấy khuẩn lạc từ môi trường TSA vào 2 ống môi trường bán lỏng Hugh – Leifson glucoza hoặc O/F glucoza Phủ khoảng 1 – 2 ml dầu khoáng vô trùng vào một trong 2 ống Ủ các ống nghiệm ở nhiệt độ 370C trong 1 – 2 ngày V cholerae lên men glucoza làm môi trường... nghiên cứu  Xác định V cholerae bằng phản ứng hóa sinh Phương pháp nghiên cứu Thử nghiệm Oxidase Thử nghiệm indole Lên men Glucose Lên men Frutose Lên men Mannose Lên men Lactose Lên men Arabinose H2S + + + + + - Thử nghiệm Urease(c) - Enzyme (Catalase, Lysine và Orithine decarboxylase) + Enzyme (Arginine dihydrolase) - NaCl 3% + - Phương pháp nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu  Xác định V cholerae bằng... tính và lactoza, cellobiza, Lên men đường manniton arabinoza âm tính (+) vàng hoặc vàng với bong bóng khí, (-) đỏ TN sinh hóa khẳng định  TN decacboxylaza/ dehydrolaza → lysine (+), arginine (-), ornithine (+), control (-) TN sinh hóa khẳng định  TN ure TN sinh hóa khẳng định  Thử nghiệm ONPG Có thể dùng đĩa ONPQ thay cho thuốc thử ONPQ Hòa tan khuẩn lạc nghi ngờ vào ống nghiệm chứa 0,2 ml nước muối