Môn học: Phân tích vi sinh thực phẩm ĐỀ TÀI 10 : ĐỊNH TÍNH FAECAL STREPTOCOCCUS TRONG THỰC PHẨM

Môn học: Phân tích vi sinh thực phẩm ĐỀ TÀI 10 :ĐỊNH TÍNHFAECAL STREPTOCOCCUS TRONG THỰC PHẨM Môn học: Phân tích vi sinh thực phẩm ĐỀ TÀI 10 :ĐỊNH TÍNHFAECAL STREPTOCOCCUS TRONG THỰC PHẨM Môn học: Phân tích vi sinh thực phẩm ĐỀ TÀI 10 :ĐỊNH TÍNHFAECAL STREPTOCOCCUS TRONG THỰC PHẨM Môn học: Phân tích vi sinh thực phẩm ĐỀ TÀI 10 :ĐỊNH TÍNHFAECAL STREPTOCOCCUS TRONG THỰC PHẨM Môn học: Phân tích vi sinh thực phẩm ĐỀ TÀI 10 :ĐỊNH TÍNHFAECAL STREPTOCOCCUS TRONG THỰC PHẨM Môn học: Phân tích vi sinh thực phẩm ĐỀ TÀI 10 :ĐỊNH TÍNHFAECAL STREPTOCOCCUS TRONG THỰC PHẨM Môn học: Phân tích vi sinh thực phẩm ĐỀ TÀI 10 :ĐỊNH TÍNHFAECAL STREPTOCOCCUS TRONG THỰC PHẨM Môn học: Phân tích vi sinh thực phẩm ĐỀ TÀI 10 :ĐỊNH TÍNHFAECAL STREPTOCOCCUS TRONG THỰC PHẨM Môn học: Phân tích vi sinh thực phẩm ĐỀ TÀI 10 :ĐỊNH TÍNHFAECAL STREPTOCOCCUS TRONG THỰC PHẨM Môn học: Phân tích vi sinh thực phẩm ĐỀ TÀI 10 :ĐỊNH TÍNHFAECAL STREPTOCOCCUS TRONG THỰC PHẨM Môn học: Phân tích vi sinh thực phẩm ĐỀ TÀI 10 :ĐỊNH TÍNHFAECAL STREPTOCOCCUS TRONG THỰC PHẨM Môn học: Phân tích vi sinh thực phẩm ĐỀ TÀI 10 :ĐỊNH TÍNHFAECAL STREPTOCOCCUS TRONG THỰC PHẨM

ĐỀ TÀI 10 :

ĐỊNH TÍNH

FAECAL STREPTOCOCCUS TRONG THỰC PHẨM

GVHD: Cô NGUYỄN THỊ MỸ LỆ

Môn học: Phân tích vi sinh thực phẩm

DANH SÁCH NHÓM TRẦN TÚ ÁI

THÁI THANH PHƯƠNGNGUYỄN THỊ HỒNG SEN

NGUYỄN THỊ THU THẢO

HUỲNH TRẦN THỊ BÍCH TRÂMĐÁI NGỌC CHÂU

LÊ THANH THẢO

Nội dung đề tài :

Faecal

Quy trình phân

Ví dụ

Là các liên cầu khuẩn có nguồn gốc từ phân

Hình cầu hay hình oval kéo dài, gram dương

Không di động, không sinh bào tử, một số dòng có tạo vỏ nhầy

Hầu hết sống hiều khí tùy ý nhưng phát triển tốt trong điều kiện kỵ khí

Tiết bacteriocin trong quá trình tăng trưởng

- Sức đề kháng tốt, tồn tại trên nhiều địa điểm.

- Phù hợp để lấy mẫu thực phẩm hơn lấy mẫu nước mặt

- Luôn luôn hiện diện trong phân người và động vật

- Hiện diện trong phân với số lượng thấp hơn so với vi khuẩn

MỘT SỐ MÔI TRƯỜNG THƯỜNG DÙNG

ĐỂ XÉT NGHIỆM S.FAECAL

Canh thang Natri azit

- 20,0g Pepton

- 15,0g Đường glucoza - 5,0g NaCl

- 2,7g K2HPO4- 0,4g Natri azit

-15mg Bromocresol màu tía- 1l Nước cất

Cách pha:

•Cho tất cả (trừ natri azit) vào nồi rồi đun cho tan, lọc, chỉnh pH Hấp 121OC/15 phút.

•Natri azit: Pha trong nước cất, lọc vô khuẩn, đóng vào bình tối màu để bảo quản ở 4OC Cho vào canh thang đã hấp và để nguội (khoảng 50OC) tùy theo thể tích để đạt nồng độ cuối cùng là 0,04%.

Thạch TTC Natri azit (Thạch Slanetz

& Bartley)

- 20,0g Pepton

- 5,0g Cao nấm men- 2,0g Đường glucoza- 4,0g K2HPO4

- 0,4g Natri azit

- 0,1g Triphenyltetrazoium chlorit(TTC)

- 15,0g Agar

- 1l Nước cất- 7,2 (pH)

Canh thang azit etyl màu tía

- 20,0g Pepton

- 15,0g Đường glucoza- 5,0g NaCl

- 2,7g K2HPO4- 0,4g Natri azit

- 0,00083g Azit etyl màu tía

- 1000ml Nước cất

Môi trường và hóa chất

Môi trườngHóa chấtDung dịch Trypton

Soya (TSB)

Cồn 900 và 700

Enterococcus agar DD creatine 0,5%

BHI Brain heartinfusion 6,5% NaCl

HCL 10%

  Thuốc thử catalase

  Que thử oxydase

an Enterococcus Faecalis grow on a trypticase soy agar plate

Xuất hiện sau 24 giờ ủ bệnh (A): Streptococcus agalactiae (Streptococcus nhóm B (GBS) và (B) Enterococcus faecalis trên GBSDA, (C) GBS và (D) Enterococcus faecalis trên Strepto B ID ® chromogenic thạch và (E) GBS và (F) Enterococcus faecalis trên CNA

Chuẩn bị dịch pha loãng 10-1, 10-2, 10-3

Trải lên MT Enterococcus agar

10-1 10-2 10-3 10-4 10-5

101 102 103 104 105

Ống nuôi cấy ban đầu (ống gốc)

Pha loãngĐộ pha loãng

Bước 1:

Chuẩn bị

Bước 3:

Đếm khuẩn lạc

Sử dụng hệ số pha loãng tương ứng với các hộp petri có từ 25-250 khuẩn lạc điển hình để tính kết quả Dựa vào tỷ lệ phần trăm số khuẩn lạc dương tính, ta sẽ suy ra kết quả cuối cùng.

Đếm kết quả

• Đếm tất cả khuẩn lạc mọc trên môi trường• Khuẩn lạc mọc loang tính là 1 khuẩn lạc

• Chọn đĩa có số khuẩn lạc 25 – 250 để tính kết quả

1

Dịch pha loãng 10-1, 10-2, 10-3 …

canh Azide Glucose(9 ống)

Môi trường dịch thể Rothe

Cấy chuyền sang môi trường dịch thể Litsky

nhuộm Gram Tra bảng MPN

chuẩn bị mẫu và pha loãng 10-1, 10-2, 10-3 …

Cấy chuyền mẫu sang môi trường dịch thể Lisky Ủ ở 44- 45 độ C trong 24 giờ Nếu canh trường trong ống nghiệm bị đục và xuất hiện màu đỏ tía thì kết quả kiểm nghiệm là dương tính

Ví dụ

Nguồn khảo sát: Viện tinh khiết và Sinh học ứng dụng, Đại học Bahauddin Zakaria Multan (NA, IAB) và Trường

Khoa học sinh học, Đại học Punjab, New Campus, Lahore (ARS)

Tóm tắt 

Phân tích vi khuẩn của nước bơm tay để xác định chất lượng và mức độ ô nhiễm trong nước từ các địa phương khác nhau của Multan.

100 mẫu máy bơm nước đã được nghiên cứu cho tổng số liên cầu khuẩn (TS) và phân liên cầu khuẩn (FS). 80% các mẫu dương tính với tổng số liên cầu, 40% trong số đó là trong khoảng 3-10, 46% trong khoảng 10-100,10% là trong khoảng 100-1000,và 4% là từ 1000-1500 liên cầu khuẩn/ml.

Phương pháp lấy mẫu

- Mẫu nước được thu thập trong 300ml vô trùng sạch sẽ, dán nhãn.  

- Mẫu nước với nhiệt độ đã được tìm thấy là trong khoảng 24-29°C và độ pH dao động giữa 7,29-8,69.

- Mẫu được xử lý trong vòng 2 giờ hoặc trong tủ lạnh ở 5-7°C.

Cách tiến hành

Phương pháp MPN

• Cho vào ba ống 10ml azide dextrose nước dùng (BBL) được thêm 10ml nước mẫu, trong khi hai bộ khác, mỗi bộ 3 ống chứa nước dùng được thêm 5ml với 1ml và mẫu nước 0.1ml, tương ứng.

• Ủ ở 35 ± 0.5°C (24-48h).

• Độ đục được ghi nhận lại và xử lý bằng bảng MPN • 5ml azide dextrose nước thịt được tiêm với 1 ml.• Lắc đều và ủ ở 44,5°C 48h. 

• Thử sinh hóa: Đối với thử sinh hóa thu được bằng cách phát

triển các khuẩn lạc màu hồng hoặc màu đỏ từ đĩa vào canh trường đậu nành trypticase.

• Kết quả: Các ống cho thấy tăng trưởng được coi là dương

tính với liên cầu khuẩn phân. 

Bảng I Tỷ lệ của tổng số liên cầu khuẩn và liên cầu khuẩn phân trong nước từ các tầng ngậm nước sâu.

Thử nghiệm tính nhạy cảm kháng khuẩn

Phân liên cầu khuẩn từ môi trường thạch liên cầu KF có sọc trên thạch dinh dưỡng 24h. Chuẩn bị canh

trường trong 1 ml dung dịch vô trùng 0,1% peptone. Ủ ở 37 ° C trong 24

giờ.

KẾT QUẢ

Tổng số liên cầu khuẩn (TS) và phân liên cầu khuẩn (FS)

- MPN dao động từ 3 -> 2400/ml. Tổng số và phân các liên cầu khuẩn chiếm 80% và 67% tổng số các mẫu.

- Mẫu dương tính 40% có liên cầu khuẩn trong khoảng 10, 46% trong phạm vi của 10-100, 10% là trong khoảng 100-1000 và 4% là từ 1000-1500 liên cầu khuẩn/ml

3 Trên tổng số phân liên cầu khuẩn 51% mẫu đã có một loạt các 1-10, 40% trong khoảng 10-100, và 7,5% là trong khoảng 100-1000 mỗi ml. Chỉ có một mẫu cho MPN> 2400

KẾT QUẢ

Giá trị của MPN tính cho TS và FS là 81 và 57, tương ứng. Tỷ lệ của FS: TS là ước tính là 10:14. Do đó theo chúng tôi điều tra 67% mẫu không phải là của uống chất lượng

 Điều này có nghĩa rằng nước ở đây bị ô nhiễm và không thích hợp cho sử dụng.

Thank Your’s listening!