3 B, C OB
1.1.4.4.Ph−ơng pháp sinh khí in vitro (in vitro gas production technique)
Để đánh giá các thức ăn gia súc, bên cạnh các ph−ơng pháp đã đ−ợc dùng nhiều trong các phòng thí nghiệm: độ hoà tan nitơ in vitro, in sacco... gần đây một ph−ơng pháp mới gọi là kỹ thuật sinh khí in vitro (in vitro gas production) do Menke và Steingass (1988) [74]. Nguyên tắc của ph−ơng pháp sinh khí in vitro (in vitro gas production) là khi lên men yếm khí hydrat- cacbon và thức ăn trong dạ cỏ bởi vi sinh vật sẽ tạo ra axit béo bay hơi (VFA), COB
2B, CHB
4B và một l−ợng nhỏ hydro, axit béo bay hơi trong cả hai điều kiện in vivo và in vitro sẽ phản ứng với đệm bicarbonate để giải phóng ra COB
2B. Nh−
xơ (Scofield và cộng sự., 1994) [102]. L−ợng khí sinh ra khi ủ thức ăn với dịch dạ cỏ trong điều kiện in vitro vì thế có quan hệ chặt chẽ với tỷ lệ tiêu hoá và giá trị năng l−ợng của thức ăn (Menke và Steingass, 1988) [74]. Giống nh− các ph−ơng pháp in vitro khác, có một vài yếu tố nh−: khẩu phần của gia súc cho dịch dạ cỏ, kỹ thuật chuẩn bị mẫu, khối l−ợng mẫu, ph−ơng pháp lấy, xử lý và bảo quản dịch dạ cỏ...có thể ảnh h−ởng đến l−ợng khí sinh ra. (Menke và Steingass, 1988) [74].
Việc chuẩn bị mẫu và khối l−ợng mẫu dùng thí nghiệm đóng một vai trò quan trọng trong ph−ơng pháp sinh khí in vitro. Bởi vì thể tích của các xylanh thông dụng hiện nay đang đ−ợc dùng cho ph−ơng pháp này chỉ là 100 ml, khối l−ợng mẫu thức ăn cho vào chỉ nên là 200 - 300 mg, tuỳ thuộc vào loại thức ăn nghiên cứu (Menke và Steingass, 1988) [74]. Độ nghiền nhỏ của mẫu thức ăn cũng có ảnh h−ởng đáng kể đến l−ợng khí sinh ra. Độ nhỏ của hạt thức ăn tốt nhất là không lớn hơn 1mm ( Menke và Steingass, 1988) [74]. Các nghiên cứu đ−ợc tiến hành nhằm xem xét ảnh h−ởng của ph−ơng pháp bảo quản dịch dạ cỏ đến l−ợng khí sinh ra cho thấy không có ph−ơng pháp nào là tốt nhất và có ý nghĩa thực tế trong sử dụng (Menke và Steingass, 1988) [74]. L−ợng khí sinh ra là do lên men cả phần chất nền hoà tan và không hoà tan (Pell và Scofield, 1993) [93]. T−ơng quan giữa l−ợng khí sinh ra và hàm l−ợng NDF (neutral detergent fibre) (RP
2
P
= 0,99) (Pell và Scofield, 1993) [93], và giữa l−ợng khí sinh ra với chất khô mất đi in sacco (RP
2
P
= 0,90) (Prasad và cộng sự, 1994) [95].
Đây là một ph−ơng pháp tỏ ra rất hứa hẹn và là một công cụ hữu ích ở các n−ớc đang phát triển bởi vì đây là ph−ơng pháp không đòi hỏi nhiều lao động, trang thiết bị và rẻ tiền. Tuy nhiên, ph−ơng pháp này chỉ sử dụng để đánh giá thức ăn thô, còn với thức ăn giàu protein thì sử dụng ph−ơng pháp này không đ−ợc chính xác.