phương pháp Ixekuzt
Hàm lượng tinh bột được xác định dựa trên nguyên tắc: Dưới tác dụng của axít, tinh bột bị thuỷ phân tạo thành đường glucoza. Xác định hàm lượng đường glucoza tạo thành rồi nhân với hệ số 0,9 ta được hàm lượng tinh bột.
(C6H12O5)n + n H2O n C6H12O6
162,1 18,02 180,12 162,1
F = = 0,90 180,12
Thuỷ phân tinh bột trong nguyên liệu Hà thủ ô đỏ bằng axít HCl. Sau đó xác định hàm lượng đường khử mới tạo thành bằng phương pháp Ixekuzt. Cách tiến hành cụ thể như sau:
Cân 2g nguyên liệu Hà thủ ô đỏ đã được nghiền nhỏ và biết trước độ ẩm. Chuyển nguyên liệu Hà thủ ô đỏ vào cốc thủy tinh cùng với 100ml nước cất, dùng đũa thuỷ tinh đảo đều để loại bỏ đường tan trong khoảng 45 – 60 phút. Sau đó lọc tinh bột bằng phễu có giấy lọc và rửa tinh bột nhiều lần bằng nước cất. Chuyển phễu lọc sang bình cầu 250 ml, dùng đũa thuỷ tinh chọc thủng giấy lọc, chuyển tinh bột
xuống bằng nước cất (chính xác 100ml). Hút 10ml dịch thuỷ phân và 2 ml HCl 6N vào bình cầu, lắp hệ thống ống sinh hàn. Đặt bình cầu vào nồi cách thuỷ đun ở nhiệt độ 70 – 800C trong khoảng 2,5 – 3 giờ, thỉnh thoảng lắc đều. Sau khi kết thúc thuỷ phân tinh bột, làm nguội bình, trung hoà dung dịch thuỷ phân bằng NaOH 10%, với chất chỉ thị là phenolphtalein đến khi có mầu hồng thì dừng lại. Sau đó thêm CH3COOH 10% đến khi mất mầu hồng để dung dịch thuỷ phân đã được trung hoà có độ axít yếu. Chuyển toàn bộ dung dịch sang bình định mức 100ml, thêm nước cất đến vạch định mức của bình. Đảo đều, lọc dung dịch – dung dịch lọc trong suốt để định lượng đường khử (glucoza).
Định lượng đường khử bằng phương pháp Ixekuzt: Lấy 2 bình tam giác: bình 1 (mẫu đối chứng), bình 2 (mẫu thí nghiệm):
+ Cho vào bình 1 chính xác 10ml nước cất, bình 2 chính xác 10ml dịch chiết đường. Cho vào mỗi bình 10ml nước cất, 10ml K3Fe(CN)6 0,05N. Đun sôi 1 phút trên bếp điện, để nguội. Cho vào mỗi bình 10ml hỗn hợp KI + ZnSO4, 10ml CH3COOH 10%.
+ Chuẩn độ bằng Na2S2O3 0,05N cho đến khi có màu vàng rơm. Thêm 3 giọt dung dịch tinh bột (dung dịch chuyển màu xanh), chuẩn độ tiếp cho đến khi có màu trắng sữa hoàn toàn. Ghi thể tích Na2S2O3 0,05N đã dùng. Kết quả được tính theo công thức: a . V . 104 X = x 0,9 m1 . (100 – W) . V1 Trong đó: X: Hàm lượng tinh bột, %
a: Số mg đường khử (tra bảng trong tài liệu) V: Thể tích dịch chiết đường đã định mức (100ml) V1: Thể tích dịch chiết đường lấy để phân tích (10ml) m: Khối lượng mẫu Hà thủ ô đỏ, g
W: Độ ẩm của mẫu Hà thủ ô đỏ, % 0,9: Hệ số chuyển tinh bột thành đường