38thành các tế bào mầm (germ cells).

Một phần của tài liệu tạo dòng ruồi giấm chuyển gen uch -l1 nhằm ứng dụng trong nghiên cứu và hướng tới sàng lọc thuốc chữa bệnh parkinson (Trang 59)

thành các tế bào mầm (germ cells).

Trứng ruồi sau khi vi tiêm sẽ được cho trở lại môi trường có chứa thức ăn để đảm bảo quá trình phát triển của trứng.

Mỗi kén ruồi sẽ được nuôi trong mỗi ống môi trường khác nhau, để chúng nở thành ruồi trưởng thành (hoặc chờ cho đến khi kén nở thành ruồi trưởng thành thì bắt trinh nữ)

Toàn bộ thế hệ F0 sẽ có màu mắt trắng.

Mỗi con cái F0 sẽ được giao phối với ba con đực yw (đây là những dòng ruồi hoang dại mang đột biến mắt trắng) và mỗi con đực F0 sẽ được giao phối với ba con cái yw. Chọn các ruồi thế hệ F1 có kiểu hình mắt đỏ.

4.2.Xác định nhiễm sắc thể mang gen mục tiêu

Nhờ vào nhân tố chuyển vị P, gen mục tiêu cùng với marker ch thị có thể chèn ngẫu nhiên vào nhiễm sắc thể I (hay nhiễm sắc thể giới tắnh) hoặc II hoặc III (việc chuyển gen vào nhiễm sắc thể thứ thường rất hiếm gặp . Do đó, ta cần phải ác định vị trắ nhiễm sắc thể mà gen mục tiêu được chèn vào, điều này có vai trò cực kì quan trọng trong các thắ nghiệm khảo sát về sau.

Đồng thời như đã đề cập ở trên, ở ruồi thường xảy ra hiện tượng trao đổi chéo nên các dòng ruồi có nhiễm sắc thể mang gen mục tiêu cần phải nhanh chóng đi kèm với một nhiễm sắc thể có balancer tương đồng với nó, có như vậy mới ức chế được hiện tượng tái tổ hợp xảy ra.

Để thực hiện mục đ ch này, thế hệ ruồi F1 có kiểu hình mắt màu cam nhạt sẽ được lai với dòng double-balancer, ch ng hạn như dùng w; Sp/CyO; TM3/TM6B. Cần lưu ý là nên sử dụng ruồi đực để lai vì dễ nhận biết vị trắ gen được chèn vào và tránh tình trạng trao đổi chéo Ờ nếu hiện tượng trao đổi chéo xảy ra thì chúng ta sẽ mất đoạn gen được chèn vào.

Một phần của tài liệu tạo dòng ruồi giấm chuyển gen uch -l1 nhằm ứng dụng trong nghiên cứu và hướng tới sàng lọc thuốc chữa bệnh parkinson (Trang 59)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(127 trang)