- Các kết quả chứng minh mối liên quan giữa việc knockdown duch
6. Các phương pháp khảo sát và đánh giá mô hình bệnh Parkinson trên mô hình ruồi giấm
ruồi giấm
Sự ra đời của công nghệ chuyển gen đã đóng góp nhiều công cụ hữu ắch cho việc phát triển mô hình thắ nghiệm bệnh Parkinson trên động vật (ruồi giấm, chuột (rat, mouse , động vật linh trưởng (kh Ầ giúp nghiên cứu chuyên sâu hơn về cơ chế gây bệnh mà không ảnh hưởng đến các quy định về đạo đức sinh học. Tuy nhiên, vẫn chưa có mô hình nào được chứng minh có thể tái hiện đầy đủ các triêu chứng của bệnh này trên người vì đây là một bệnh đa rối loạn bao gồm giảm khả năng khứu giác, rối loạn giấc ngủ, rối loạn tiêu hóa, rối loạn khả năng tự chủ, rối loạn khả năng vận động, suy giảm nhận thứcẦ Do đó, các mô hình th nghiệm ch thể hiện một phần triệu chứng của bệnh cũng như các phương pháp đánh giá ch phân t ch được một khắa cạnh tác động nào đó của bệnh lên mô hình. Dù vậy, rất nhiều nghiên cứu đã được tiến hành và sử dụng nhiều phương pháp đánh giá khác nhau nhằm kiểm tra tác động của bệnh lên mô hình. Những nỗ lực này đã thu được nhiều kết quả tốt và ngày càng được hoàn thiện hơn về mô hình cũng như phương pháp nhằm cung cấp các công cụ hiệu quả nhất cho công tác nghiên cứu.
Ruồi là một mô hình được chọn để nghiên cứu các hành vi phức tạp trong hệ vận động để có thể định lượng những thay đổi đáp ứng lại một tác nhân nào đó. Sự thay đổi này có thể theo dõi từ giai đoạn ấu trùng bậc ba đến giai đoạn ruồi trưởng thành.
Ở giai đoạn ấu trùng, khả năng di động của ấu trùng sẽ được đo bằng cách cho chúng di chuyển trong một đĩa petri và ghi hình lại bằng máy quay. Sau đó, dữ liệu sẽ được phân tắch bằng phần mềm hoặc bằng các phương pháp thống kê khác như: khảo sát quãng đường di chuyển, khảo sát thời gian di chuyểnẦ
Khả năng leo trèo của ruồi trưởng thành (climbing assay được đo bằng cách dùng một máy quay có độ phân giải cao để ghi hình lại các hoạt động của ruồi. Dụng cụ để ruồi leo trèo là một cột thủy tinh cao 30cm, đường kắnh 2cm. Chiều cao của cột được chia thành nhiều vạch, cách nhau cm. Trước khi đặt ruồi vào ống, ruồi sẽ được
- 24 -
ngắt cánh để loại trừ khả năng bay của ruồi. Mỗi lần leo của ruồi sẽ được tắnh trong khoảng 20-30 giây, sau đó th nghiệm sẽ được lặp lại bằng cách đập nhẹ ống thủy tinh để các con ruồi quay trở lại vị trắ xuất phát.
Ngoài ra, người ta còn khảo sát khả năng bay của ruồi bằng cách cho những con ruồi vào một cái hộp và ghi lại hoạt động bay của chúng.
Sau đó, dữ liệu ghi nhận được sẽ được phân tắch bằng các phần mềm như D S Dynamic Image Analysis System hay Ftrack, theo dõi hoạt động của một con ruồi; Ctrax, theo dõi hoạt động của nhiều con ruồi một lúc.
Dữ liệu sẽ được phân tắch thành nhiều dạng, hoặc ghi lại đường đi của ruồi hoặc vẽ lại thành biểu đồ nhằm đánh giá sự khác biệt giữa các dòng được nghiên cứu.