: Chiều mũi tên chỉ hướng tra mẫu 1 phôi, bổ sung puromycin với nồng độ
B: Có bổ sung puromycin với các nồng độ khác nhau
3.3.1.1. Đối với phương pháp SMGT
Chúng tôi tiến hành ấp trứng thu được sau khi tiến hành thí nghiệm SMGT đến khi nở, thu được 10 gà con. Các gà con được đánh số và theo dõi sự phát triển qua các giai đoạn khác nhau.
Hình 3.21: Gà con chuyển gen bằng phương pháp SMGT 1 tuần tuổi
Qua theo dõi, so sánh với gà ĐC, chỳng tôi thấy, những chú gà chuyển gen bằng phương pháp SMGT phát triển bình thường. Quan sát bằng mắt thường, chúng tơi nhận thấy khơng có gì khác biệt giữa gà con bình thường và gà con chuyển gen.
Sau đó, chúng tôi tiến hành lấy máu và kiểm tra sự có mặt của gen chuyển bằng phản ứng PCR. Kết quả thu được thể hiện trờn hỡnh 3.22:
Hình 3.22: Kết quả điện di sản phẩm multiplex PCR của ADN thu được từ
máu gà chuyển gen bằng phương pháp SGMT
Giếng 1: ĐC (-): nước
Giếng 2: ĐC (+):vector transposon Sleeping Beauty có mang gen eGFP Giếng 3: Marker 2 kb
Giếng 4: ĐC sinh học (ĐCSH): ADN từ phôi gà không chuyển gen
Giếng 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 14: Mẫu máu ADN từ 10 gà con chuyển gen Như vậy, trong các mẫu máu được kiểm tra bằng phản ứng PCR đã xuất hiện băng có kích thước 418 bp của đoạn gen mã hóa eGFP. Tất cả các mẫu máu gà đều xuất hiện băng 321bp nhờ cặp mồi đặc hiệu khuếch đại gen ribosome 18S, chứng tỏ các ADN thu được đều đảm bảo chất lượng. Sự có mặt của gen eGFP trong ADN genom của gà với cặp mồi đặc hiệu khuếch đại đoạn gen eGFP có kích thước 418 bp được tìm thấy trong các mẫu máu của gà con số 2, 6, 9 và 10. Điều này chứng tỏ rằng, gen chuyển ổn định trong genom của gà đến giai đoạn 2 tuần tuổi. Tỉ lệ chuyển gen thành công là 4/10.