: Chiều mũi tên chỉ hướng tra mẫu 1 phôi, bổ sung puromycin với nồng độ
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 KẾT QUẢ KIỂM TRA NỒNG ĐỘ TINH TRÙNG
3.2.2.1. Kết quả sau 24 giờ sàng lọc bằng puromycin
a. Kết quả quan sát dưới kính hiển vi của cả 2 phương pháp SMGT và vi tiêm
Ở cả hai phương pháp SMGT và vi tiêm, sau 24h sàng lọc, chúng tơi quan sát thấy có sự khác biệt giữa các giếng của lô ĐC và lô TN, giữa các giếng được bổ sung nồng độ puromycin khác nhau. Quan sát dưới kính hiển vi chúng tơi thấy như sau:
- Ở các giếng không bổ sung puromycin ở cả lô TN và lô ĐC, tế bào vẫn tăng trưởng tốt (hình 3.2):
Hình 3.2: Tế bào lơ ĐC và TN sau 24h sàng lọc không bổ sung puromycin
(1: tế bào sống; 2: tế bào chết)
- Ở nồng độ puromycin 1 àg/ml:
+ Ở lô ĐC, tế bào chết khá nhiều, các tế sống sót chỉ cịn khoảng 1/3 so với giếng không bổ sung puromycin (hình 3.3).
1
Hình 3.3: Tế bào lơ ĐC sau 24h sàng lọc bổ sung puromycin nồng độ 1 àg/ml
(1: tế bào sống; 2: tế bào chết)
+ Ở lơ TN, quan sát dưới kính hiển vi chúng tơi thấy, có sự khác nhau giữa cỏc phụi: một số phụi cú một số tế bào chết tuy nhiên mật độ tế bào không thay đổi; một số phôi số lượng tế bào chết rất nhiều (hình 3.4):
Hình 3.4: Tế bào lơ TN sau 24h sàng lọc có bổ sung puromycin nồng độ 1 àg/ml
(1: tế bào sống; 2: tế bào chết)
A: một số phơi, tế bào chết ít, vẫn tăng sinh bình thường B: Một số phơi, tế bào chết nhiều
- Ở nồng độ puromycin nồng độ 2àg/ml: 1 2 A B 2 1 2 1
+ Ở các giếng ĐC tế bào chết rất nhiều, số lượng tế bào giảm nhiều lần so với trước khi bổ sung puromycin, chỉ cịn một vài tế bào sống sót (hình 3.5).
Hình 3.5: Tế bào lơ ĐC sau 24h sàng lọc có bổ sung puromycin nồng độ 2 àg/ml
(1: tế bào sống; 2: tế bào chết)
+ Ở các giếng TN: một số phơi tế bào có chết nhưng khơng nhiều như ở giếng ĐC và vẫn còn nhiều tế bào bám dưới đáy giếng nuôi cấy; một số phôi tế bào chết rất nhiều tương tự như lơ ĐC (hình 3.6).
Hình 3.6: Tế bào lơ TN sau 24h sàng lọc có bổ sung puromycin nồng độ 2 àg/ml
(1: tế bào sống; 2: tế bào chết)