Cơ chất mà có khả năng cung cấp tất cả các chất dinh dưỡng cho vi sinh vật là cơ chất lí tưởng. Tuy nhiên, nhiều chất dinh dưỡng có thể ở dưới mức tối ưu thậm chí không có trong cơ chất, vì vậy cần bổ sung thêm các chất dinh dưỡng từ bên ngoài khi pha chế môi trường lên men. Trong phần này chọn tỷ lệ cám gạo: trấu: bã đậu nành theo tỷ lệ 2:1:1 và độ ẩm 55%, pH 5 và các nồng độ dinh dưỡng X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8. Các bước tiếp theo thực hiện như mục 3.3.6. Cấy dịch huyền phù bào tử
A. niger với mật độ 0,8*108 bào tử/g vào các môi trường chuẩn bị ở trên.
Sau 28 giờ nuôi cấy, thu dịch chiết enzyme từ canh trường, đem xác định hoạt tính và hàm lượng enzyme amyase thu được. Kết quả phân tích phương sai ANOVA cho thấy sự khác nhau giữa các nghiệm thức là có ý nghĩa.
Đồ thị 4.6 Biểu diễn hoạt tính amylase và hàm lượng protein từ canh trường nuôi cấy
Hoạt lực amylase cao nhất thu được ở nồng độ môi trường dinh dưỡng X2. Nhưng hàm lượng protein thu được hơi thấp hơn so với môi trường có nồng độ dinh dưỡng X1, nên ở môi trường X2, hoạt tính riêng của amylase là cao nhất so với các mức môi trường còn lại. Điều này có lẽ là do A. niger không chịu được áp suất thẩm thấu cao từ môi trường nuôi cấy nên ở những môi trường có nồng độ dinh dưỡng quá sẽ cao ảnh hướng đến khả năng sinh trưởng và phát triển của nấm A.niger, vì thế mà ảnh hưởng đến khả năng tạo enzyme của chúng.
Yêu cầu cơ bản đối với thành phần môi trường dinh dưỡng nuôi nấm sợi tạo amylase cũng giống như yêu cầu đối với môi trường nuôi vi sinh vật tạo enzyme là tính hoàn thiện. Vì vậy, để tăng cường sự sinh trưởng của vi sinh vật cũng như tăng khả năng tạo enzyme mong muốn, ngoài các thành phần dinh dưỡng có trong cơ chất, môi trường nuôi cấy sẽ được bổ sung thêm các chất khoáng vi lượng và đa lượng vốn là những cấu tử không thể thiếu cho sinh trưởng và phát triển của vi sinh vật.
Nồng độ khoáng bổ sung vào môi trường phải vừa đủ, vì nếu thấp sẽ không đủ cho nhu cầu của vi sinh vật, còn nếu cao, vi sinh vật sẽ sinh trưởng kém do không chịu được áp suất thẩm thấu.