- So sánh về mức độ tương đồng về ADN giữa chủng Hib từ bệnh nhi VMN và chủng Hib từ trẻ khỏe mạnh dưới 5 tuổ
CCCGGG G G G C C C
4.4.2. Tỷ lệ phân bố genotype của các chủng Hib gõy VMN
102 chủng Hib chúng tôi phõn lập từ nhiều bệnh nhi mắc VMN ở nhiều vùng khác nhau thuộc khu vực miền Bắc được thăm khám và điều trị tại bệnh viện Nhi Trung ương. Do đó, những chủng Hib trong nghiên cứu này đã được xác định có nguồn gốc khác nhau về địa lý. Tuy nhiên, kết quả phân tích bằng kỹ thuật PFGE cho thấy hầu hết những chủng vi khuẩn này được phõn bố vào ba nhóm genotype chớnh, đó là A (48,4%), B (20,1%), C (21,7%) và những chủng riêng lẻ không xếp loại chỉ chiếm 5,9%. Tương tự, nghiên cứu của Anna Skoczyn´ska về đặc điểm vi khuẩn Hib gây VMN tại Ba Lan thu được 233 chủng Hib từ 64 trung tâm, đại diện cho Ba Lan trong vòng 8 năm (1997 – 2004). Những chủng vi khuẩn này, sau khi phân tích bằng kỹ thuật PFGE cho thấy những chủng Hib gây VMN tập trung chủ yếu vào nhóm genotype A (97,4%) và một số ít genotype riêng lẻ C, D, E, F[4] (chỉ chiếm 2,6%) [98]. Điều này gợi ý cho thấy những chủng Hib gõy VMN luôn tập trung vào một vài nhúm genotype nhất định cho dù có phõn lập ở nhiều vùng khác nhau.
Yếu tố thời gian phõn lập Hib cũng được đánh giá trong nghiên cứu của chúng tôi. Kết quả cho thấy thời gian phõn lập cũng không ảnh hưởng nhiều
đến sự biến đổi genotype của các chủng vi khuẩn Hib: những chủng kiểu A được phân lập vào thời gian từ 2004 đến 2007 có liên quan gần với các chủng phân lập trong khoảng thời gian từ 2001 – 2003, nhưng chỉ có thể có liên quan (liên quan xa) với kiểu A2 mặc dù thời gian phân lập các chủng Hib
thuộc kiểu A và A2 như nhau (2004-2007). Có lẽ, kiểu A2 gồm những chủng có khả năng sinh β-lactamase trong khi kiểu A và A1 không có khả năng sinh enzym này. Như vậy, trong thời gian 6 năm, những chủng vi khuẩn Hib gây
bệnh có thể có biến đổi chút ít về gen nhưng không nhiều, chúng vẫn luụn cú mối liên quan gần với nhau. Hiện tượng khác nhau từ 4-6 band (liên quan xa hay có thể có liên quan) lại xảy ra ở những chủng khác nhau về khả năng sinh enzym β-lactamase, do đó có thể nghĩ đến việc một số chủng Hib nhận thêm đoạn gen sinh β-lactamase theo cơ chế của transposon [12], [109] hoặc cú thêm những phân đoạn của plasmid mang gen β-lactamase nên làm biến đổi kiểu gen của vi khuẩn Hib. Bởi vì, hiện tượng này xảy ra sẽ đã làm thay đổi vị trí cắt của enzym giới hạn SmaI.
Đánh giá khả năng gõy bệnh của vi khuẩn Hib, hầu hết những nghiên cứu đã xác định vai trò độc lực của Hib phần lớn dựa vào cấu trúc vỏ polysaccharide của vi khuẩn này và typ sinh học (biotype). Trong đó, typ huyết thanh b và typ sinh học I, II đóng vai trò gõy bệnh chủ yếu. Tuy nhiên, một số nghiên cứu hiện nay cũng đã xác định sõu hơn vai trò độc lực của Hib. Những yếu tố độc lực khác phải được kể đến như: yếu tố bám (pili), khả năng sống sót trong môi trường cơ thể với những chất dinh dưỡng đặc trưng và khả năng xõm nhập vào tế bào. Cụ thể, những gen có vai trò độc lực của Hi bao gồm: vùng gen Cap mã hóa vỏ polysaccharide, nhúm gen hif mã hóa yếu tố bám pili, nhóm gen hmw1 và hmw2 mã hóa yếu tố bám có trọng lượng phõn tử lớn và nhúm gen quy tổng hợp enzym tryptophanase. Vì vậy, những chủng
lực, dẫn đến kết quả cho thấy những chủng Hib gây VMN với kiểu genotype có tính tập trung vào một số ớt nhúm genotype nhất định (trong đó những genotype ở mỗi nhóm có liên quan với nhau hoặc giống nhau hoàn toàn về gen) cũng phù hợp với khoa học [39]. Ngoài ra, cũng có thể kết luận rằng tại cùng một khu vực nghiên cứu (các tỉnh miền Bắc Việt Nam), những chủng
Hib đã tồn tại và luân chuyển trong cộng đồng.
Chú thích: [4] Genotype A, B, C... được quy ước và đặt cho phân loại PFGE của
từng nghiên cứu. Vì vậy, genotype A hoặc B của nghiên cứu này khác với genotype A hoặc B của nghiên cứu khác)
