- Xỏc ủịnh sự tăng sinh khối callus trong mụi trường lỏng lắc bằng cỏch cõn trọng lượng callus trước và sau khi nuụi cấy, từ ủú tớnh hệ số tăng sinh
1. Phụi vụ tớnh cam Sành trờn MT bổ sung 1mg/l GA3 và 0,2 mg/l NAA sau 2 tuần nuụi cấy 2 Phụi vụ tớnh cam Sành trờn MT bổ sung 1mg/l GA3 và 0,2 mg/l NAA sau 5 tuần nuụi cấy
2. Phụi vụ tớnh cam Sành trờn MT bổ sung 1mg/l GA3 và 0,2 mg/l NAA sau 5 tuần nuụi cấy 3. Phụi bất thường cam Valencia trờn MT bổ sung 0mg/l GA3 và 0,3 mg/l NAA sau 2 tuần nuụi cấy 4. Phụi bất thường cam Valencia trờn MT bổ sung 0mg/l GA3 và 0,3 mg/l NAA sau 5 tuần nuụi cấy
3 4
GA3 (mg/l) (mg/l)
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nụng nghiệp…………… 83
3.4.2.2. Ảnh hưởng của cỏc chất bổ sung hữu cơ ủến nảy mầm của phụi vụ tớnh tớnh
Cỏc chất bổ sung hữu cơ như nước dừa, malt extract (ME)… ủược gọi là cỏc chất cú thành phần khụng xỏc ủịnh, khi bổ sung vào mụi trường nuụi cấy sẽ kớch thớch sinh trưởng của mụ tế bào [52]. Tulecke (1961) và Pollard (1961) ủó xỏc ủịnh cỏc thành phần khỏc nhau trong nước dừa gồm cú cỏc axit amin, axit hữu cơ, axit nucleic, cỏc loại ủường, vitamin, chất ủiều hoà sinh
trưởng như cỏc chất cú hoạt tớnh cytokinin, muối khoỏng và cỏc loại ủường
rượu. Nồng ủộ nước dừa thớch hợp cho nuụi cấy thực vật in vitro thường từ 5
ủến 15% và chất lượng nước dừa cũng thay ủổi tuỳ thuộc tuổi của quả dừa
hoặc ngay giữa cỏc quả dừa cựng tuổi.
Cụng bố ủầu tiờn về sử dụng nước dừa trong nuụi cấy mụ thuộc về Van Overbeek và cộng sự. Sau ủú, tỏc dụng tớch cực của nước dừa trong mụi
trường nuụi cấy mụ, tế bào thực vật ủó ủược nhiều tỏc giả ghi nhận. Nước dừa
ủó ủược xỏc ủịnh là rất giàu cỏc hợp chất hữu cơ, chất khoỏng và chất kớch
thớch sinh trưởng. Nước dừa ủó ủược sử dụng ủể kớch thớch phõn hoỏ và nhõn nhanh chồi ở nhiều loài cõy. Thụng thường nước dừa ủược xử lý ủể loại trừ
cỏc protein. Tuy nhiờn, tồn dư protein trong nước dừa khụng gõy ảnh hưởng
ủến sinh trưởng của mụ hoặc tế bào nuụi cấy [10]. Trong nghiờn cứu này,
chỳng tụi sử dụng nước dừa tươi (khụng qua xử lý) ủể bổ sung vào mụi
trường nuụi cấy nhằm xỏc ủịnh ảnh hưởng của nước dừa ủến tỉ lệ nảy mầm
của hạt.
Bờn cạnh ủú, ME cũng cú ảnh hưởng tớch cực ủối với sự phỏt triển của mụ tế bào in vitro ở nồng ủộ từ 0,5 – 1 g/l. Cỏc thành phần trong ME rất phức tạp bao gồm hỗn hợp cỏc vitamin và axit amin, là nguồn cung cấp nitơ hữu cơ phong phỳ [52]. ðối với ME, ủõy là chất bổ sung phổ biến trong cỏc nghiờn
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nụng nghiệp…………… 84
cứu về phỏt sinh phụi soma, nhưng theo một số bỏo cỏo của cỏc tỏc giả ủi
trước cho thấy nú cũn cú tỏc dụng tốt cho nảy mầm của phụi vụ tớnh.
Vỡ vậy, chỳng tụi tiến hành thớ nghiệm nghiờn cứu so sỏnh ảnh hưởng của ME và nước dừa trong giai ủoạn nảy mầm của phụi vụ tớnh ở hai giống
cam. Kết quả thớ nghiệm ủược trỡnh bày trờn bảng 3.13.
Bảng 3.13. Ảnh hưởng của nước dừa và ME ủến tỷ lệ nảy mầm của phụi vụ tớnh ở cam Sành và cam Valencia
Nước dừa (%) ME (g/l) Giống ðối chứng 5 10 15 20 0,05 0,1 0,5 1 Cam Sành 59,8a 61,3b 76,2ab 71,0bc 58,9c 60,5e 70,1e 66,3e 58,7 e Cam Valencia 62,2b 66,5ab 79,3c 69,2bc 59,1a 64,1e 69,5e 63,8e 61,7e
a, b, c : Cỏc yếu tố sai khỏc nhau cú ý nghĩa với mức ý nghĩa α= 0,05