4. đối tượng và phạm vi nghiên cứu của ựề tài
3.4.2. Ảnh hưởng của một số loại phân bón khác nhau ựến sự sinh trưởng
phát triển cây Lan A. roxburghii (Wall.) Lindl.
Phân bón là một trong những yếu tố quan trọng quyết ựịnh ựến quá trình sinh trưởng, phát triển của cây trồng. Cây Lan rất nhảy cảm với yếu tố dinh dưỡng, nếu dinh dưỡng ựầy ựủ không những giúp cây trồng sinh trưởng, phát triển tốt mà còn cho năng suất, cũng như chất lượng cao.
Dựa vào kết quả nghiên cứu về loại giá thể thắch hợp, ựề tài ựã chọn loại giá thể rêu Sphagnum moss : dớn tổ quạ tỷ lệ (1:1) ựể tiếp tục nghiên cứu ảnh hưởng của một số loại phân bón khác nhau nhằm tìm ra loại phân bón
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 74
thắch hợp nhất cho sinh trưởng của cây lan con sau khi ra vườn ươm. Ảnh hưởng của phân bón lên sinh trưởng của cây lan con ựược thể hiện tại ở bảng 3.13 và hình 3.5.
Sau 12 tuần theo dõi về phun loại phân bón HVP ựã có các chỉ tiêu ựều thấp hơn so với phân bón Growmore và B1- Thái Lan cụ thể là: Chiều cao trung bình của cây chỉ ựạt 6,92cm, số lá trung bình ựạt 4,53 lá; số nhánh là 1,29 nhánh xếp ở mức ỘbỢ, số rễ mới trung bình xuất hiện 2,22 rễ xếp ở mức ỘcỢ. Cũng như hình thái, màu sắc của lá nhỏ và xanh nhạt.
Bảng 3.13. Ảnh hưởng của một số loại phân bón khác nhau ựến sự sinh trưởng phát triển của cây Lan A. roxburghii (Wall.) Lindl. (sau 12 tuần)
Chỉ tiêu theo dõi Loại phân bón Chiều cao TB của cây (cm) Số lá TB (lá) Số nhánh TB (nhánh ) HVP (30:10:10) 6,92 c 4,53 c 1,29 b Growmore (30:10:10) 7,21 b 4,89 b 1,61 b B1 -Thái Lan 7,53 a 5,24 a 1,86 a LSD 0,05 0,12 0,18 0,13 CV (%) 0,8 1,9 4,1
Ghi chú: a, b, c: so sánh theo giá trị khác biệt có nghĩa nhỏ nhất ở mức xác suất 95%).
Tại các công thức phun loại phân bón Growmore, nhận thấy cây sinh trưởng và phát triển khá tốt, thể hiện ở các chỉ tiêu như: chiều cao trung bình của cây ựạt 7,21cm; số lá trung bình ựạt 4,89; số nhánh trung bình là 1,61 nhánh; số rễ mới trung bình ựạt 2,36 rễ ựược xếp ở mức ỘbỢ trong so sánh
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 75
LSD. Về chất lượng cây qua quan sát nhận thấy cây tương ựối khỏe và lá xanh. 2,62 2,36 2,22 2 2,1 2,2 2,3 2,4 2,5 2,6 2,7
HVP (30:10:10) Growmore (30:10:10) B1 -Thái Lan
Loại phân bón S ố r ễ m ớ i T B x u ấ t h iệ n ( rễ ) Hình 3.5. Ảnh hưởng của một số loại phân bón ựến số rễ mới xuất hiện
của cây Lan A. roxburghii (Wall.) Lindl. (sau 12 tuần)
Với loại phân bón B1- Thái Lan cho cây sinh trưởng và phát triển tốt nhất so với hai loại phân bón trên. Chiều cao trung bình của cây ựạt cao nhất 7,53cm; số lá trung bình ựạt 5,24 lá; số nhánh trung bình là 1,86 nhánh và số rễ mới trung bình cũng ựạt cao nhất 2,62 rễ ựược xếp ở mức ỘaỢ trong so sánh LSD. Khi quan sát hình thái cây, chúng tôi cũng thấy phun loại phân bón này cây mập, bộ lá và rễ phát triển tốt hơn ở 2 loại còn lại.
Như vậy, ở giai ựoạn vườn ươm có thể sử dụng phân bón lá B1 ỜThái Lan phun 1tuần/lần với liều lượng 0,5g/L. Khi phun phân bón này cho cây sinh trưởng và phát triển tốt nhất, cây xanh khỏe và có bộ rễ mập và dài.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 76
Hình 3.6. Cây Lan A. roxburghii (Wall.) Lindl. nuôi cấy mô sinh trưởng
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 77
Từ các kết quả nghiên cứu thu ựược, chúng tôi ựi ựến ựề xuất quy trình nhân giống in vitro với loài Lan A. roxburghii (Wall.) Lindl. như sau:
Vật liệu nuôi cấy (1)
Chồi bên, chồi ựỉnh
Khử trùng mẫu (2)
NaOCl 3% + 15 phút
Tạo vật liệu khởi ựầu (3)
MS + 20g/L ựường + 100ml/L nước dừa + 2,0mg/L BA + 6,5g/L thạch, pH 5,5
(4 tuần)
Nhân nhanh cụm chồi (4)
MS + 20g/L ựường + 100ml/L nước dừa + 2,0mg/L BA + 1,0mg/L αNAA + 80g/L dịch nghiền khoai tây + 6,5g/L
thạch, pH 5,5 (8 tuần)
Tạo cây hoàn chỉnh in vitro (5)
MS + 20g/L ựường + 100ml/L nước dừa + 1,0g/L than hoạt tắnh + 0,6mg/L αNAA + 6,5g/L thạch, pH 5,5
(8 tuần)
Chuyển cây con in vitro ra vườn ươm (6)
Giá thể: rêu Sphagnum moss + dớn tổ quạ (1:1)
Bón phân B1 ỜThái Lan, phun 1tuần/lần với liều lượng 0,5 g/L (12 tuần)
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 78
Bước 1: Chọn nguyên liệu khởi ựầu
Chồi bên, chồi ựỉnh lấy từ cây mẹ trưởng thành nhằm hạn chế tối ựa mẫu nhiễm và sự biến dị soma về sau.
Bước 2: Khử trùng mẫu
Các mẫu cây ựược khử trùng bằng NaOCl 3% trong 15 phút có tỷ lệ sống cao nhất (65,5%).
Bước 3: Tạo vật liệu khởi ựầu (4 tuần)
Trên môi trường MS + 20g/L ựường + 100ml/L nước dừa + 2,0mg/L BA + 6,5g/L thạch, pH 5,5 cho hệ số nhân chồi ựạt 4,44 lần; chiều cao trung bình của chồi ựạt 2,53cm
Bước 4: Nhân nhanh cụm chồi (8 tuần)
Chồi hình thành trong bước (3) tiếp tục cấy chuyển sang môi trường MS + 20g/L ựường + 100ml/L nước dừa + 2,0mg/L BA + 1,0mg/L αNAA + 80g/L dịch nghiền khoai tây + 6,5g/L thạch, pH 5,5 cho hệ số nhân chồi cao nhất 21,83 chồi; chiều cao trung bình của chồi ựạt 4,31cm; chất lượng chồi tốt nhất, kéo dài tuổi thọ của chồi trong nhân nhanh.
Bước 5: Tạo cây hoàn chỉnh in vitro (8 tuần)
Tách các chồi từ cụm chồi cấy sang môi trường MS + 20g/L ựường + 100ml/L nước dừa + 1,0g/L than hoạt tắnh + 0,6mg/L αNAA + 6,5g/L thạch, pH 5,5 cho chiều cao trung bình của cây ựạt cao nhất 6,59cm; số lá trung bình 4,38 lá; số rễ trung bình ựạt 4,11 rễ.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 79
Cây con sau khi rút khỏi môi trường in vitro cần rửa sạch thạch bám vào rễ, sau ựó trồng vào khay hay chậu ựất nung với mật ựộ 5ừ5cm - Giá thể: rêu Sphagnum moss + dớn tổ quạ (1:1)
- độ ẩm giá thể: 70 Ờ 80% - độ ẩm không khắ: 90 Ờ 95% - Nhiệt ựộ nuôi trồng: 20-250C - Ánh sáng: độ che sáng > 70% - Tưới phun sương ựều 3 - 4 lần/ngày
- Bón phân B1 ỜThái Lan, phun 1tuần/lần với liều lượng 0,5g/L đã ựạt tỷ lệ cây sống cao nhất 88,17% và sinh trưởng phát triển tốt ở vườn ươm
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 80
KẾT LUẬN VÀ đỀ NGHỊ