4. đối tượng và phạm vi nghiên cứu của ựề tài
3.1.3.Ảnh hưởng của chất ựiều tiết sinh trưởng BA ựến khả năng tạo chồ
chồi từ mẫu cấy ban ựầu
BA là một chất ựiều tiết sinh trưởng nhân tạo thuộc nhóm Cytokinin, là nhóm ựược sử dụng rộng rãi nhất trong kỹ thuật nuôi cấy mô hiện nay. Tác dụng chủ yếu của nó là kắch thắch sự phân chia tế bào, thúc ựẩy sự hoạt ựộng của chồi bên. Nồng ựộ sử dụng khác nhau tùy ựối tượng thực vật nuôi cấy, các kết quả nghiên cứu cho thấy: ở nồng ựộ 22ộM thắch hợp với sự phát triển chồi ở Cymbidium aloifolium, nhưng ựối với Dendrobium aphyllum và
Dendrobium moschatum nồng ựộ thắch hợp nhất cho sự phát triến của chồi lại là 44ộM (N.R.Nayak và cộng sự, 1997). để tìm nồng ựộ phù hợp của BA lên sự tạo chồi ban ựầu cho mẫu cấy cây Lan A. roxburghii (Wall.) Lindl., trong thắ nghiệm này chúng tôi bố trắ 7 nồng ựộ khác nhau: 0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5 và 3,0mg/L. Sau 8 tuần nuôi cấy kết quả ựược trình bày ở bảng 3.4.
Qua kết quả thu ựược ở bảng 3.4 cho thấy: hệ số nhân chồi dao ựộng từ 1,49 ựến 4,44 lần. Hệ số nhân chồi ựược xếp theo thứ tự từ cao xuống thấp trong so sánh (LSD) là a, b, c, d, e cho thấy. Ở nồng ựộ 2,0mg/L có hệ số nhân chồi ựạt cao nhất là 4,44 lần ở mức ỘaỢ. Trong khi ựó ở công thức không bổ sung (đ/C) có hệ số nhân chồi ựạt thấp nhất là 1,49 lần xếp ở mức ỘeỢ; ở nồng ựộ 2,5mg/L có hệ số nhân chồi là 3,6 lần ở mức ỘbỢ; ở nồng ựộ 3,0mg/L và 1,5mg/L có hệ số nhân chồi tương ứng là 2,61 và 2,65 lần ở mức ỘcỢ; ở nồng ựộ 0,5mg/L và 1,0mg/L có hệ số nhân chồi tương ứng là 2,15 và 2,36 lần ở mức ỘdỢ.
đối với chỉ tiêu chiều cao trung bình của chồi cho thấy: Tất cả các công thức có bổ sung BA ựều cho kết quả cao hơn công thức không bổ sung BA vào môi trường nuôi cấy. Chiều cao trung bình của chồi dao ựộng từ 0,38cm ựến 2,53cm và ựược xếp vào các nhóm phân mức a, ab, c, trong so sánh (LSD). Trong ựó: Ở nồng ựộ 1,0 Ờ 2,5mg/L có chiều cao trung bình của chồi
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 50
ựạt cao nhất là 2,21 Ờ 2,53cm ở nhóm ỘaỢ; công thức (đ/C) không bổ sung BA có chiều cao trung bình của chồi thấp nhất là 0,38cm ở mức ỘcỢ; ở nồng ựộ 0,5mg/L có chiều cao trung bình của chồi là 2,05cm ở mức ỘbcỢ. Nồng ựộ 3,0mg/L có chiều cao trung bình của chồi là 1,75cm ở mức ỘbỢ. Ở nồng ựộ BA từ 1,0 ựến 2,5mg/L chồi mập, lá xanh thẫm.
Bảng 3.4. Ảnh hưởng của chất ựiều tiết sinh trưởng BA ựến khả năng tạo chồi từ mẫu cấy ban ựầu
CTTN Nồng ựộ BA (mg/L) Hệ số nhân chồi (lần) Chiều cao TB của chồi (cm) Chất lượng chồi CT1(đ/C) 0,0 1,49 e 0,38 c + CT2 0,5 2,15 d 2,05 ab ++ CT3 1,0 2,36 d 2,21 a +++ CT4 1,5 2,65 c 2,32 a +++ CT5 2,0 4,44 a 2,53 a ++++ CT6 2,5 3,60 b 2,43 a +++ CT7 3,0 2,61 c 1,75 b + LSD 0,05 0,21 0,33 CV (%) 4,3 4,7
Ghi chú: đ/C: Nền môi trường MS + 20 g/L ựường + 100ml/L nước dừa + 6,5g/L thạch, pH 5,5.
a, b, c, d: so sánh theo giá trị khác biệt có nghĩa nhỏ nhất ở mức xác suất 95%. +: Chồi sinh trưởng kém
++ : Chồi sinh trưởng ở mức ựộ trung bình +++: Chồi sinh trưởng ở mức ựộ khá
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 51
++++: Chồi sinh trưởng tốt, mập
Tuy nhiên khi tăng nồng ựộ BA vượt quá 2,5mg/L chất lượng chồi có xu hướng giảm, chồi gầy, lá xanh nhạt và bị dị dạng (loại kém).
Từ phân tắch trên cho thấy: nồng ựộ BA thắch hợp nhất ựể bổ sung vào môi trường MS + 20g/L ựường + 100ml/L nước dừa + 6,5g/L thạch, pH 5,5 với mục ựắch tạo chồi từ mẫu cấy ban ựầu là 2,0mg/L. Trong môi trường này có hệ số nhân chồi ựạt 4,44 lần, chiều cao trung bình của chồi ựạt 2,53cm chồi mập, xanh thẫm.