4. đối tượng và phạm vi nghiên cứu của ựề tài
1.2.5.1. Hoạt tắnh sinh học của A roxburghii(Wall.) Lindl
Trên thế giới việc xác ựịnh các chất có hoạt tắnh sinh học bằng các phương pháp khác nhau ở Lan kim tuyếnựã ựược rất nhiều nhà khoa học sử dụng.
He CN và cộng sự (2005) ựã sử dụng phương pháp sắc ký phân lập ựược 5 hợp chất là: p-Hydroxybenzaldehyde (I), ferulic acid (II), quercetin (III), daucosterol (IV), cirsilineol (V).
Trong Lan kim tuyến còn chứa các hợp chất chống oxy hóa là dẫn xuất của phenol như: 8Ờhydroxybenzylquercetin, isorhamnetinỜ7ỜOỜβỜDỜ glucopyỜranoside, isorhamnetinỜ3ỜOỜβỜDỜglucopyranoside, kaempferolỜ3Ờ
OỜβỜDỜglucopyranoside, kaempferolỜ7ỜβỜDỜglucopyranoside, 5ỜhydroxyỜ 3', 4', 7ỜtrimethoxyflavonolỜ3ỜβỜDỜrutinoside, isorhamnetinỜ3ỜβỜD rutinoside và quercetinỜ7ỜOỜβỜDỜ[6''ỜOỜ(transỜferuloyl)]Ờglucopyranoside các hoạt chất này có khả năng tự tìm ra gốc tự do DPPH.
Theo nghiên cứu của Chun-Nian He và cộng sự (2006), trong A. roxburghii (Wall.) Lindl. có chứa quercetin-7-O-β-D-[6''-O-(trans-feruloyl)]- glucopyranoside (compound 1), 8-C-p-Hydroxybenzylquercetin (compound
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 20
2), isorhamnetin-7-O-β-Dglucopyranoside (compound 3), isorhamnetin-3-O- β-D-glucopyranoside (compound 4), kaempferol-3-O-β-Dglucopyranoside (compound 5), kaempferol-7-O-β-D-glucopyranoside (compound 6), 5- hydroxy-3',4',7- trimethoxyflavonol-3-O-β-D-rutinoside (compound 7), and isorhamnetin-3-O-β-D-rutinoside (compound 8).
Liying Huang và cộng sự (2007) dùng các phương pháp sắc ký HPLC/APCI/MS ựã nhận dạng và xác ựịnh ựược 3 hợp chất là ergosterol, stigmasterol và β-sitosterol với nồng ựộ ựo ựược lần lượt là 0,5 Ờ 150ộg/ml với hệ số tương quan r = 0,9999 ergosterol, 5 Ờ 400ộg/ml với hệ số r = 0,9999 stigmasterol và 10 - 2000ộg/ml với hệ số r = 0,9998 β-sitosterol.
Liying Huang và cộng sự (2007) cũng dùng phương pháp sắc ký LC- APCI-IT-MS ựã phân tắch và phân lập ựược hai hợp chất là Oleanolic acid (OA) và axit ursolic (UA) rất quan trọng có trong A. roxburghii(Wall.) Lindl và ựã ựược sử dụng như một loài thuốc truyền thống của Trung Quốc với nồng ựộ tương ứng lần lượt là 0,5 Ờ 80 (r = 0.9992) và 0,5 Ờ 50ộg/ml (r = 0,9989).
Mei-Hua Han và cộng sự (2008) ựã tách chiết ựược 2 ester mới là sorghumol 3-O-Z-p-coumarate và sorghumol 3-O-E-p-coumarate, và một alkaloid mới là Anoectochine từ toàn bộ cây A. roxburghii cùng với triterpenoid, sorghumol.
Theo Cai Jin Ờ yan và cộng sự (2008) sử dụng phương pháp sắc ký ựể xác ựịnh các hợp chất có trong tinh dầu và petrol ether (PE) chiết xuất từ cây Lan kim tuyến (A. roxburghii) và ựã xác ựịnh ựược tổng số 72 hợp chất trong ựó có 69 hợp chất ựược xác ựịnh từ PE.
Li Chun-yan và cộng sự (2009) dùng phương pháp sắc ký lỏng (HPLC) và phương pháp Soxhlet ựể xác ựịnh hai axit ferulic và axit cinnamic có trong
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 21
cây Lan kim tuyến với kết quả tương ứng lần lượt là 4,0 Ờ 110,0ộg/ml với hệ số tương quan r = 0,9985 và 2,5 Ờ 50ộg/ml với hệ số tương quan r = 0,9995, bằng phương pháp Soxhlet xác ựịnh ựược 0,189mg/g axit ferulic, 0,091mg/g axit cinnamic.
Theo Hu Guo-hai và cộng sự (2010), dùng phương pháp phân tắch quang kế ngọn lửa (FAAS) ựể ựánh giá và xác ựịnh hàm lượng của các nguyên tố vi lượng (Zn, Mn, Cu, Fe, Ni, Co, Cr, Cd, Pb) có trong Lan kim tuyến nuôi trồng và Lan kim tuyến trong tự nhiên. Kết quả cho thấy ựã xác ựịnh ựược sự có mặt của các nguyên tố vi lượng là 99,8% với giá trị RSD = 0,66%. Các nguyên tố Fe, Mn, Zn, Co và Cu trong Lan kim tuyến nuôi trồng thấp hơn so với các nguyên tố này ở Lan kim tuyến trong tự nhiên. Tuy nhiên nguyên tố Cr trong Lan kim tuyến nuôi trồng lại cao hơn so với Lan kim tuyến trong tự nhiên.
Zhong Tian-hua và cộng sự (2011) ựã xác ựịnh các axit amin tự do có trong Lan kim tuyến bằng phương pháp sắc ký anion ựã xác ựịnh ựược 17 axit amin với nồng ựộ từ 0,23 Ờ 3,37 pmol có ựường tuyến tắnh với cao ựiểm 2 Ờ 3 và giá trị RSDs của 5 ựường có giá trị từ 0,96 Ờ 4,2%.
Liying Huang và cộng sự (2011) ựã nghiên cứu sử dụng HSCCC (high- speed counter-current chromatography) tách chiết và tinh sạch ựược ergosterol và stigmasterol là hai hợp chất sterol chủ yếu của A. roxburghii
(Wall) Lindl. với nhiều hoạt tắnh sinh học quan trọng. Nhóm nghiên cứu ựã tách chiết ựược 36,5mg ergosterol và 43,6mg stigmasterol từ 100g of A. roxburghii với ựộ tinh khiết 92,0 Ờ 95,5%.
Xiao Ờ Xue Wang và cộng sự (2011) bằng phương pháp cộng hưởng từ và phương pháp sắc ký lỏng cộng ựầu dò khối phổ (NRM/LRC-MS PDS) ựã xác ựịnh ựược 13 hợp chất cùng cấu trúc phân tử của các hợp chất là: pỜ
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 22
hydroxybenzaldehyde (1), transỜ4Ờhydroxycinnamic acid (2), transỜ3Ờ hydroxycinnamic acid (3)ố, transỜ2Ờ hydroxycinnamic acid (4), IsorhamnetinỜ 3ỜO-[6ỖỖỜ rhamnosyl(1→6)] glucopyranoside (5), 5Ờhydroxyferulic acid (6), 3, 5ỜdihydroxyỜ3‟, 4‟, 7Ờ trimethoflavone (7), 5, 6, 3‟, 4‟ - tetrahydroxyỜ7, 5‟-trimethoflavonolỜ3‟ỜOỜglucoside (8)ố, 5, 4‟ỜdihydroxyỜ6, 7, 3‟Ờ trimethoflavone (9), Quercetin (10), Kaempferol (11), Isorhamnetin (12), Quercetin 3, 4‟Ờdimethyl ether (13), trong ựó các hợp chất 3, 4, 6, 8, 11 là các hợp chất ựược phân lập lần ựầu tiên.