4. đối tượng và phạm vi nghiên cứu của ựề tài
3.1.2.Ảnh hưởng của môi trường khoáng ựến khả năng tạo chồi từ mẫu
cấy ban ựầu
để ựảm bảo thành công ựối với nhân giống bằng phương pháp nuôi cấy mô, nhận thấy giai ựoạn quan trọng ựó là xác ựịnh môi trường nuôi cấy thắch hợp cho ựối tượng cần nhân giống. Các công bố về môi trường nhân giống loài cây Lan A. roxburghii (Wall.) Lindl. còn rất hạn chế. Do vậy, ựề tài thử nghiệm một số môi trường khoáng khác nhau: MS, VW, RE ựể nhân giống. Từ ựó chọn ra môi trường thắch hợp nhất ựể nuôi cấy loài Lan A. roxburghii
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 47
(Wall.) Lindl. Trong ựiều kiện nuôi cấy mô tế bào, hệ số nhân và chất lượng chồi phụ thuộc vào thành phần môi trường, nồng ựộ chất dinh dưỡng có trong môi trường nuôi cấy. Các nghiên cứu ở giai ựoạn này nhằm tìm ra ựược môi trường thắch hợp cho giai ựoạn tạo chồi từ mẫu cấy ban ựầu, giai ựoạn này có vai trò quyết ựịnh ựến hiệu quả của quá trình nhân giống. Kết quả ựược trình bày ở bảng 3.3 và hình 3.1.
Qua bảng 3.3 cho thấy: Các môi trường khoáng khác nhau, khả năng nhân nhanh chồi và chiều cao trung bình của chồi là khác nhau.
Trên môi trường RE cho hệ số nhân chồi thấp nhất, hệ số nhân chồi chỉ ựạt 1,06 lần xếp ở mức ỘcỢ và chiều cao cây ựạt 0,21cm ựược xếp ở mức ỘbỢ theo so sánh LSD. Qua quan sát hình thái, chồi phát triển chậm hơn, chồi có màu xanh nhạt và nhỏ.
Trên môi trường VW cho hệ số nhân chồi là 1,30 lần và chiều cao chồi ựạt 0,25cm ựược xếp ở mức ỘbỢ theo so sánh LSD. Qua quan sát hình thái chồi có màu xanh nhưng chồi yếu.
Bảng 3.3. Ảnh hưởng của môi trường khoáng khác nhau ựến khả năng tạo chồi từ mẫu cấy ban ựầu
CTTN Môi trường Hệ số nhân chồi (lần) Chiều cao TB của chồi (cm) Chất lượng chồi CT1 RE 1,06 c 0,21b + CT2 MS 1,49 a 0,42 a +++ CT3 VW 1,30 b 0,25 b ++ LSD 0,05 0,17 0,05 CV (%) 4,6 8,3
Ghi chú: Các công thức ựều ựược bổ sung (20g/L ựường+100ml/L nước dừa+6,5g/L thạch, pH 5,5)
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 48
a, b, c: so sánh theo giá trị khác biệt có nghĩa nhỏ nhất ở mức xác suất 95% +: Chồi sinh trưởng kém
++ : Chồi sinh trưởng ở mức ựộ trung bình +++: Chồi sinh trưởng ở mức ựộ khá ++++: Chồi sinh trưởng tốt, mập
Trên môi trường MS có hệ số nhân chồi ựạt cao nhất là 1,49 lần và chiều cao trung bình của chồi ựạt 0,42cm, ựược xếp ở mức ỘaỢ trong so sánh LSD. Qua quan sát hình thái, nhận thấy các chồi phát triển ựều và sinh trưởng mạnh hơn. Các kết quả của chúng tôi ựã phù hợp với nhiều tác giả khác khi nuôi cấy in vitro cho nhiều loài Lan khác nhau. Tác giả N. Ahamed Sherifvà cộng sự (2012) ựã sử dụng chồi ựỉnh và chồi bên của cây Lan A. elatus
Lindley làm vật liệu nuôi cấy trên môi trường MS. Zhou YuMei và cộng sự (2009) nghiên cứu xây dựng quy trình nhân nhanh giống cây Lan A.
formosanus trên môi trườngMS.
Từ kết quả nghiên cứu trên, chúng tôi ựã chọn môi trường MS làm môi trường cơ bản cho các quá trình nghiên cứu sau này của cây A. roxburghii (Wall.) Lindl.
Hình 3.1. Ảnh hưởng của môi trường khoáng khác nhau ựến khả năng tạo chồi từ mẫu cấy ban ựầu
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 49