- Ngày sản xuất, hạn sử dụng của QC, calib, test thử, dung dịch pha loãng.
97Quy trình này nhằm hướng dẫn cho tất cả nhân viên tại PXN thực hiện kỹ thuật định
Quy trình này nhằm hướng dẫn cho tất cả nhân viên tại PXN thực hiện kỹ thuật định lượng Troponin T trên máy miễn dịch nhanh Veda-Lab một cách chính xác nhất.
2. Phạm vi áp dụng
Quy trình này được áp dụng tại PXN, khoa XN&CĐHA Trung tâm Y tế huyện Cam Lâm.
3. Trách nhiệm
- Tất cả nhân viên phòng xét nghiệm phải tuân thủ đúng theo quy trình. - Nhân viên quản lý chất lượng xét nghiệm có trách nhiệm kiểm tra giám sát. - Trưởng khoa có trách nhiệm quản lý chung.
4. Định nghĩa, thuật ngữ và chữ viết tắt
PXN: phòng xét nghiệm
XN&CĐHA: Xét nghiệm và Chẩn đốn hình ảnh
5. Nguyên lý
Troponin là đơn vị điều hòa co cơ bao gồm ba tiểu phần troponin T (TnT), troponin I (TnI) và troponin C (TnC). Trong đó TnC có cấu trúc tương tự TnC cơ vân nên chỉ TnT và TnI được xem là dấu ấn sinh học tim mạch đặc biệt trong bệnh nhồi máu cơ tim.
TnT được định lượng bằng phương pháp miễn dịch sandwich sử dụng cơng nghệ hóa phát quang hay điện hóa phát quang. TnT có trong mẫu thử đóng vai trị kháng ngun được kẹp giữa hai kháng thể, kháng thể thứ nhất là kháng thể đơn dòng đặc hiệu kháng TnT đánh dấu biotin, kháng thể thứ hai là kháng thể đơn dòng đặc hiệu kháng TnT đánh dấu ruthenium (chất có khả năng phát quang) tạo thành phức hợp miễn dịch kiểu sandwich. Cường độ phát quang tỷ lệ thuận với nồng độ TnT có trong mẫu thử.
6. Trang thiết bị và vật tư a) Thiết bị:
Máy miễn dịch nhanh Veda-lab Máy ly tâm b) Vật liệu: - Dụng cụ: + Ống nghiệm trắng + Ống nghiệm Serum + Bơm tiêm 5ml +Viết lông không phai + Micropipet, đầu cold - Hóa chất, sinh phẩm: + Test QC
+ Test Calib
+ Test định lượng Troponin T + Dung dịch pha loãng
- Mẫu bệnh phẩm: + Máu toàn phần
+ Huyết thanh hoặc huyết tương: Lấy 3 ml máu tĩnh mạch vào ống khơng có chất chống đơng hay ống có chất chống đơng là Li-/Na-heparin, Na-/K3-EDTA, hay citrate. Máu không vỡ hồng cầu. Sau khi lấy máu, đem ly tâm tách lấy huyết thanh hoặc huyết tương. + Bệnh phẩm ổn định: 11 ngày ở 15–25°C, 2 tháng ở 2–8°C, 3 năm ở (-15)–(-25) °C. + Bệnh phẩm chỉ rã đông 1 lần và phải để bệnh phẩm đạt nhiệt độ phịng trước khi phân tích. Để tránh hiện tượng bay hơi, bệnh phẩm, chất chuẩn, chất kiểm tra chất lượng nên phân tích trong vịng 2 h.
98
7. Kiểm tra chất lượng
- Ngày sản xuất, hạn sử dụng của QC, calib, test thử, dung dịch pha loãng.
- Huyết thanh, huyết tương không bị tán huyết.
8. An toàn:
Thực hiện an tồn khi tiếp xúc với hóa chất và bệnh phẩm.
9. Nội dung thực hiện
a) Mở máy: Ấn giữ nút nguồn sau máy 1-2 giây khi có tín hiệu “tis” thả tay ra b) Chạy máy:
- Bước 1: chạy blank + chọn mẫu blank + Bỏ que blank vào máy + Chọn blank Start + máy sẽ hiện kết quả đo - Bước 2: Chạy QC
+ chọn Chạy QC trên máy + cho test QC vào máy + Chọn QC Start + Máy sẽ hiện kết quả đo - Bước 3: chạy mẫu bệnh nhân
+ Chuẩn bị mẫu: huyết thanh, huyết tương hoặc máu toàn phần của bệnh nhân. + Chọn test Troponin T
+ Cho 25µl huyết tương, huyết thanh hoặc 50 µl máu tồn phần của bệnh nhân vào test thử sau đó cho tiếp 150µl dung dịch đệm vào test cần thử
+ Nhập tên bệnh nhân, số lot, hạn dung của test, chọn Immecdiate nếu ủ ở ngoài máy 20 phút
+ Cho mẫu vào khe đọc của máy + Bấm Start
+ Máy sẽ hiện kết quả đo
10. Diễn giải kết quả và báo cáo
Trị số bình thường: <0,01 ng/ml
11. Lưu ý
Huyết thanh hoặc huyết tương không bị tan huyết 12. Lưu trữ hồ sơ
- Ghi chép vào sổ lưu kết quả xét nghiệm theo quy định của khoa. - Lưu trên phần mềm His-one.
13. Tài liệu liên quan Tên tài liệu Tên tài liệu
Tờ hướng dẫn sử dụng máy Veda-lab Hướng dẫn sử dụng test Troponin T Hướng dẫn sử dụng máy ly tâm
14. Tài liệu tham khảo
- Quyết định 4401/QĐ-BYT ngày 09 tháng 11 năm 2012 về việc ban hành Quy trình kỹ thuật khám bệnh, chữa bệnh chuyên ngành Huyết hoc-Truyền máu-Miễn dịch-Di truyền - Quyết định số 7034/QĐ-BYT ngày 21 tháng 11 năm 2018 về việc ban hành tài liệu hướng dẫn quy trình kỹ thuật chun ngành hóa sinh.
99
- Quyết định số 5530/QĐ-BYT ngày 25/12/2015 của Bộ Y tế về việc hướng dẫn xây
dựng quy trình thực hành chuẩn trong quản lý chất lượng xét nghiệm.
- Quyết định 2429/QĐ-BYT, ngày 12 tháng 6 năm 2017 của Bộ trưởng Bộ Y tế về việc Ban hành Tiêu chí đánh giá mức chất lượng phịng xét nghiệm Y học.
BẢNG KIỂM QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG TROPONIN T