3.2 .Chỉ tiêu hóa sinh
3.2.1 .Xác định hàm lượng chất béo
3.2.2. Xác định hàm lượng tinh bột của tinh bột sắn, bắp
- Phƣơng pháp: Đo độ phân cực ewers
- Nguyên tắc: Phƣơng pháp gồm có hai phép xác định trung gian
Phần mẫu thử thứ nhất đƣợc thủy phân bằng axit clohydric loãng, sau khi làm trong và lọc, dùng phép đo độ phân cực để đo độ quay cực của dịch lọc.
Phần mẫu thứ hai đƣợc xử lý bằng etanol 40 % (thể tích) để chiết các đƣờng hịa tan và các polysaccarit có khối lƣợng phân tử thấp. Sau đó dịch lọc đƣợc thực hiện theo qui trình
- Thiết bị và dụng cụ: Theo bảng 1 phụ lục 1
- Phƣơng pháp đo: Tiến hành cân mẫu chính xác đến 0,001 g.
Xác định độ quay cực tổng số:
Cân 2,5g ± 0,05g (m1) mẫu thử rồi chuyển vào bình định mức. Thêm 25ml axit clohydric loãng và khuấy để mẫu đƣợc phân bố đồng đều. Thêm tiếp 25ml axit clohydric loãng.
Ngâm bình trong nồi cách thủy đang sơi và lắc liên tục hoặc ngâm bình trong nồi cách thủy đun sôi đƣợc trang bị bộ khuấy từ và khuấy ở tốc độ nhỏ nhất.
Để bình 15 phút ± 5 giây trong nồi cách thủy đun sôi và ngừng lắc hoặc khuấy trong khoảng thời gian ngắn trƣớc khi lấy bình ra. Thêm ngay 30ml nƣớc lạnh và làm nguội nhanh dƣới dòng nƣớc đến 20oC ± 2oC.
Thêm 5 ml dung dịch Carrez l và lắc trong 1 phút. Thêm 5 ml dung dịch Carrez II và lắc trong 1 phút.
Pha loãng bằng nƣớc đến vạch. Đồng hóa rồi lọc dung dịch qua phễu lọc và giấy lọc thích hợp. Nếu dịch lọc khơng hồn tồn trong thì lặp lại các thao tác, sử dụng mỗi loại dung dịch Carrez 10 ml.
Đo độ quay cực của dung dịch trong ống 200mm bằng máy đo độ phân cực.
Xác định độ quay cực của các chất hòa tan trong etanol 40% (thể tích)
Cân 5g ± 0,1g (m2) mẫu rồi chuyển vào bình định mức 100ml. Thêm khoảng 80 ml dung dịch etanol. Để yên bình 1 giờ ở nhiệt độ phòng; trong phòng thời gian này, lắc mạnh sáu lần để đảm bảo trộn kỹ mẫu thử với etanol. Thêm etanol đến 100ml, đồng hóa rồi lọc.
Dùng pipet lấy 50 ml dịch lọc (tƣơng đƣơng với 2,5g phần mẫu thử) vào bình định mức. Thêm 2,1 ml axit clohydric loãng và lắc mạnh.
Lắp sinh hàn hồi lƣu vào bình định mức và ngâm bình định mức trong nồi cách thủy đun sôi.
Lấy bình định mức ra khỏi nồi cách thủy sau 15 phút ± 5 giây. Để nguội đến 20o C ± 2oC.
Dùng dung dịch Carrez I và Carrez II để làm trong dung dịch rồi tiến hành tiếp. Đo độ quay cực của dung dịch.
Xác định hàm lƣợng chất khô: Xác định độ ẩm của mẫu thử, w0, theo phƣơng pháp nêu trong TCVN 9934 (ISO 1666). Sau đó, tính hàm lƣợng chất khơ, w1, của mẫu thử, dùng công thức sau đây: w = 100 – w
- Tính tốn kết quả: Tính hàm lƣợng tinh bột của mẫu thử tính theo chất khơ, w, bằng phần trăm khối lƣợng, sử dụng công thức sau đây:
w = [ ]
Trong đó
α1 là độ quay cực tổng số đo đƣợc trong ống 200mm, tính bằng độ;
α2 là độ quay cực của chất hòa tan trong etanol đo đƣợc trong, tính bằng độ;
m1 là khối lƣợng phần mẫu thử, tính bằng gam (g);
m2 là khối lƣợng phần mẫu thử, tính bằng gam (g);
w1 là hàm lƣợng chất khô của mẫu thử đƣợc xác định, tính theo phần trăm khối lƣợng;
α20
D là độ quay cực đặc trƣng của tinh bột tinh khiết đo đƣợc ở bƣớc sóng 589,3 nm, tính bằng độ.(Xem Bảng 14).
Bảng 12 Độ quay cực đặc trƣng của tinh bột tinh khiết
Loại tinh bột Độ quay cực D20(độ)
Tinh bột ngơ +184,6
Tinh bột mì +182,7
- Thẩm định kết quả: Hàm lƣợng tinh bột, % khối lƣợng, không nhỏ hơn 85%.