3.2 .Chỉ tiêu hóa sinh
3.2.1 .Xác định hàm lượng chất béo
3.2.3. Xác định hàm lượng chất xơ
- Phƣơng pháp: Scharrer
- Nguyên tắc: Sau khi sản phẩm đã đƣợc nghiền và tách béo (nếu cần), đem đun sôi với hỗn hợp axit axetic, axit nitric và axit tricloaxetic (thuốc thử Scharrer). Gạn tách và rửa cặn không tan trên cốc lọc. Sấy và cân cặn khơng tan, sau đó xác định lƣợng mất đi khi nung.
- Thiết bị và dụng cụ: Theo bảng 1 phụ lục 1. - Cách tiến hành:
Chuẩn bị mẫu thử:
Sấy khô sơ bộ: Đối với các sản phẩm có hàm lƣợng ẩm q cao khơng thể trộn hoặc nghiền chúng thì tiến hành làm khơ sơ bộ trƣớc ở nhiệt độ phù hợp. Trong trƣờng hợp đó cần cân trƣớc khi sấy khô và cân lại ngay trƣớc khi chuẩn bị mẫu thử.
Sản phẩm khơng cần nghiền: Sản phẩm có 95% khối lƣợng lọt rây khơng cần nghiền trƣớc khi xác định. Trộn thật đều trƣớc khi lấy lƣợng mẫu cân.
Sản phẩm cần nghiền: Sản phẩm có ít hơn 95% khối lƣợng lọt rây bắt buộc phải nghiền. Nghiền mẫu thí nghiệm sao cho có ít nhất 95 % khối lƣợng lọt rây.
Xác định hàm lƣợng chất khô của mẫu thử bằng phƣơng pháp phù hợp.
Cân chính xác đến 1mg một khối lƣợng của mẫu thử đã đƣợc chuẩn bị tƣơng đƣơng với 0,05g đến 0,15g xơ thơ (khoảng 1g đến 3g mẫu có hàm lƣợng xơ thơ 5% khối lƣợng). Đối với những sản phẩm có hàm lƣợng xơ thơ thấp, đặc biệt là những loại có hàm lƣợng xơ thơ ít hơn 1% khối lƣợng thì lấy lƣợng mẫu cân là 3g.
Chuyển lƣợng mẫu cân vào bình thủy phân, cho vào đó 1/3 tổng thể tích thuốc thử Scharrer. Thơng thƣờng tổng thể tích tính bằng mililit thuốc thử Scharrer về số gấp 20 lần khối lƣợng tính bằng gam của lƣợng mẫu cân.
Dùng một que thủy tinh để phá vỡ các cục lớn tạo thành. Que này sẽ đƣợc giữ lại trong bình thủy phân. Tráng rửa cẩn thận thành bình phía trong để chuyển hết phần sản phẩm cịn bám trên thành bình xuống bằng 2/3 thể tích thuốc thử Scharrer cịn lại. Lắc bộ phận ngƣng lạnh. Đem bình đun nóng trong khoảng 3 phút± 0,5 phút phải sôi, giữ cho bình sơi trong vịng 30 phút ± 1 phút, khơng đƣợc khuấy hoặc lắc trong khi sôi.
+ Tách và rửa cặn
Sau thời gian sơi quy định, chuyển tồn bộ dung dịch sang cốc lọc đã đƣợc chuẩn bị sẵn và lọc dƣới áp suất thấp, dùng bình hút và bơm hút thủy lực.
Tráng rửa bình và que thủy tinh bằng 50ml đến 70ml nƣớc cất (nhiệt độ trong khoảng 950C đến 1000
C) làm nhiều lần, chuyển hoàn toàn phần cặn không tan sang cốc lọc bằng một đũa thủy tinh có bịt mũ cao su. Tiến hành rửa cho đến khi nƣớc lọc hồn tồn trung tính, thử bằng giấy quỳ. Thƣờng dùng 300ml đến 40 ml nƣớc để rửa.
Sau khi rửa, tháo bơm hút đổ ngay các chất trong bình hút, dùng axeton đổ đầy cốc lọc 3 lần và để dung môi tự thấm qua lớp cặn theo nguyên lý trọng lực. Nếu thao tác này quá mất thời gian, có thể dùng một lực hút nhẹ sao cho tốc độ thẩm lậu của dung môi không vƣợt quá 1 giọt/giây.
Tráng rửa 2 lần bằng ete etylic, tách ete bằng cách lọc dƣới áp suất thấp, dùng bình hút và bơm hơi hút thủy lực.
+ Sấy khơ: Sấy khơ cốc lọc có chứa xơ thơ trong tủ sấy ở nhiệt độ 1300C ± 20C. Để nguội tới nhiệt độ phịng trong bình hút ẩm rồi đem cân nhanh với độ chính xác 0,5mg.
Lặp lại bƣớc tiến hành này cho đến khi sự khác nhau về khối lƣợng giữa 2 lần cân liên tiếp không quá 1mg. Thƣờng tiến hành sấy khô trong khoảng 1 giờ.
+ Nung: Sau khi sấy khô, đem nung cặn đã sấy khơ trong lị nung ở nhiệt độ 5500C ± 250C trong 30 phút. Đặt cốc lọc lên một đĩa chịu lửa và làm nguội đến nhiệt độ phịng trong bình hút ẩm. Cân nhanh chính xác đến 0,5mg. Lặp lại bƣớc tiến hành này cho đến khi khối lƣợng ổn định.
Tiến hành ít nhất hai lần xác định trên cùng một mẫu thử. - Tính tốn kết quả:
Hàm lƣợng xơ tính bằng phần trăm theo khối lƣợng sản phẩm đƣợc tính bằng cơng thức:
Đối với sản phẩm không cần nghiền:
(m1 – m2) x
Đối với sản phẩm cần phải nghiền
(m1 – m2) x
mO là khối lƣợng của lƣợng mẫu cân , tính bằng gam;
m1 là tổng khối lƣợng của cặn khô và cốc lọc sau khi sấy , tính bằng gam; m2 là tổng khối lƣợng của cặn khô và cốc lọc sau khi nung , tính bằng gam;
MS là hàm lƣợng chất khơ của sản phẩm đã đƣợc xác định; Là hàm lƣợng chất khô của mẫu thử đã đƣợc xác định.
Hàm lƣợng xơ thô biểu thị theo hàm lƣợng chất khô của sản phẩm: Hàm lƣợng xơ thơ tính bằng phần trăm theo hàm lƣợng chất khơ của sản phẩm đƣợc tính theo cơng thức:
Trong đó m0, m1, m2, Ms có ý nghĩa nhƣ đã nêu.
Trƣờng hợp sấy khô sơ bộ: Nếu tiến hành sấy khô sơ bộ, hàm lƣợng xơ thơ tính bằng phần trăm theo khối lƣợng sản phẩm nhận đƣợc tính bằng cách nhân kết quả tính với tỷ số.
Trong đó:
m4 là khối lƣợng của mẫu ẩm ban đầu trƣớc khi sấy khô sơ bộ, tính bằng gam m5 là khối lƣợng của chính mẫu đó sau khi sấy khơ sơ bộ, tính bằng gam.
- Thẩm định kết quả: Hàm lƣợng chất xơ, % khối lƣợng, không lớn hơn 0,2%.