Mô phân sinh ngọn chồi của cây chuối bao gồm ba vùng: vùng trung tâm, vùng ngoại vi và vùng mô phân sinh lõi như được thấy ở lát cắt dọc qua mô phân sinh ngọn chồi của chuối Cau Mẵn (hình 3.1 và 3.2). Các tế bào của mô phân sinh ngọn này nói chung đang ở trạng thái phân chia và chưa phân hóa về mặt hình thái, có kích thước nhỏ, vách mỏng, tế bào chất đậm đặc, nhân to, hạch nhân đậm màu… Dưới ảnh hưởng của các chất điều hòa tăng trưởng thực vật ngoại sinh (môi trường CHP* có bổ sung IAA 0,17 mg/l; BA 2,5 mg/l và zeatin 1 mg/l), bên cạnh kiểu phát sinh hình thái thông thường (hình thành thân và lá), có sự thay đổi hình dạng của mô phân sinh ngọn chồi đồng thời với sự phân chia tế bào mạnh mẽ ở vùng bên (hình 3.3 - 3.6) và sự hình thành vùng tế bào mô phân sinh mới để phát triển các chồi mới (hình 3.7). Sự hình thành vùng mô phân sinh mới có thể xảy ra ở vùng nách lá hay biểu bì của thân và lá (hình 3.8 - 3.10).
Các quan sát dưới kính hiển vi điện tử truyền suốt (TEM) cho thấy mô phân sinh ngọn chồi ở chuối chia thành hai lớp, L1 và L2 (hình 3.11). Các tế bào của lớp L1 có nhân to, hạt tinh bột và không bào nhỏ hơn so với các tế bào của lớp L2 (hình 3.12A và 3.12B). Sau 4 tuần nuôi cấy trên môi trường CHP* với IAA 0,17 mg/l, BA 2,5 mg/l và zeatin 1 mg/l, các hạt tinh bột và không bào ở các tế bào của lớp L2 trở nên nhỏ hơn so với ở các tế bào lớp L1 (hình 3.12C và 3.12D). Đặc biệt, sự phân chia tế bào ở lớp L2 của vùng ngoại vi trở nên song song với bề mặt của mô phân sinh ngọn, trong khi trên môi trường CHP* (không có chất điều hòa tăng trưởng thực vật) sự phân chia này xảy ra một cách ngẫu nhiên (hình 3.13 và 3.14).
Trong trường hợp mẫu cấy hoa đực nonchuối Hột, sự phát sinh chồi trên môi trường MS có bổ sung IAA 0,17 mg/l và BA 2,5 mg/l xảy ra ở tế bào biểu bì của phần gốc cuống hoa hoa đực non sau 3 tuần nuôi cấy (hình 3.15 - 3.17). Đây là sự tạo mới chồi, khởi đầu bởi sự thành lập các trung tâm mô phân sinh ngọn chồi (hình 3.18), sau đó các trung tâm mô phân sinh ngọn chồi này tiếp tục phát triển để cho các chồi hoàn chỉnh sau 5 tuần nuôi cấy (hình 3.19 và 3.20).
Hình 3.1.Cấu trúc mô phân sinh ngọn chồi chuối Cau Mẵn qua lát cắt dọc, sau 6 tuần nuôi cấy khúc cắt mô phân sinh ngọn chồi từ cây trê
ờ * có bổ sung
in vitro n môi trư ng CHP IAA 0,17 mg/l và BA 2,5 mg/l.
Hình 3.2. Cấu trúc mô phân sinh ngọn chồi chuối Hột qua lát cắt dọc, sau 6 tuần nuôi cấy khúc cắt mô phân sinh ngọn chồi từ cây tr
ờ * có bổ sung
in vitro ên môi trư ng CHP IAA 0,17 mg/l và BA 2,5 mg/l.
35 mm
Hình 3.4. Cấu trúc mô phân sinh ngọn chồi chuối Hột qua lát cắt dọc, sau 4 tuần nuôi cấy khúc cắt mô phân sinh ngọn chồi từ cây tr ờ
* có bổ sung , à zeatin 1 mg/l.
in vitro ên môi trư ng CHP IAA 0,17 mg/l BA 2,5 mg/l v
Hình 3.3. Cấu trúc mô phân sinh ngọn chồi chuối Cau Mẵn qua lát cắt dọc, sau 4 tuần nuôi cấy khúc cắt mô phân sinh ngọn chồi từ cây tr
ờ * có bổ sung , à zeatin 1 mg/l.
in vitro ên môi trư ng CHP IAA 0,17 mg/l BA 2,5 mg/l v
12 mm
Hình 3.5.Chi tiết vùng trung tâm của mô phân sinh ngọn chồi chuối Cau Mẵn sau 4 tuần nuôi cấy khúc cắt mô phân sinh ngọn chồi từ cây tr ờ
* có bổ sung , à zeatin 1 mg/l.
in vitro ên môi trư ng CHP IAA 0,17 mg/l BA 2,5 mg/l v
Hình 3.6.Chi tiết vùng ngoại vi của mô phân sinh ngọn chồi chuối Cau Mẵn sau 4 tuần nuôi cấy khúc cắt mô phân sinh ngọn chồi từ cây trên môi tr ờ
* có bổ sung , à zeatin 1 mg/l.
in vitro ư ng
CHP IAA 0,17 mg/l BA 2,5 mg/l v
8mm
Hình 3.7. Sự phát triển chồi từ khúc cắt mô phân sinh ngọn chồi cây sau
6 tuầ ấ ờ * ớ , à zeatin 1 mg/l.
(A) Gi ẵ ứ, (D) Ch ộ ậ
in vitro
n nuôi c y trên môi trư ng CHP v i IAA 0,17 mg/l BA 2,5 mg/l v à Hương, (B) Cau M n, (C) S à Đen, (E) H t, (F) M t.
F E D C B A 5mm 5mm 5mm 5mm 5mm 5mm (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Hình 3.8 - 3.9.. Sự hình thành vùng trung tâm mô phân sinh ngọn chồi (mũi tên) từ khúc cắt mô phân sinh ngọn chồi chuối Hột cây sau 6 tuần nuôi cấy tr ờ * có
bổ sung , .
Vùng trung tâm mô phân sinh ngọn chồi hình thành ở nách lá. Vùng trung tâm mô phân sinh ngọn chồi hình thành từ trục thân.
3.8. 3.9.
in vitro ên môi trư ng CHP
IAA 0,17 mg/l BA 2,5 mg/l
Hình 3.10. Sơ kh i ch i (m i tên) h
ên môi trư ng CHP IAA 0,17 mg/l BA 2,5 mg/l.
ở ồ ũ ình thành từ trục thân chuối Hột sau 6 tuần nuôi cấy khúc cắt mô phân sinh ngọn chồi cây tr
ờ * có bổ sung , in vitro 30mm 60mm 6mm 60mm 3.8 3.9
20mm
L1 L2
Hình 3.11.Cấu trúc mô phân sinh ngọn chồi chuối Cau Mẵn qua lát cắt dọc, sau 4 tuần nuôi cấy khúc cắt mô phân sinh ngọn chồi cây tr
ờ * ớ ể ệ ử ề ố
in vitro ên môi trư ng CHP (quan sát dư i kính hi n vi đi n t truy n su t).
Hình 3.12. Chi tiết tế bào lớp L1 và L2 của mô phân sinh ngọn chồi chuối Cau Mẵn sau 4 tuần nuôi cấy khúc cắt mô phân sinh ngọn chồi cây ờ *
ổ ấ ề òa t ở ự ậ
(A), Tế bào lớp L1 của mô phân sinh ngọn chồi ở ờ * (B),
(C),
(D), Tế bào ớ ủ ọ chối ở ờ * ớ
IAA 0,17 mg/l, BA 2,5 mg/l và zeatin 1 mg/l (bột lạp và không bào nhỏ).
in vitro
N: nhân, n: nhân con, V: không bào, a: bột lạp.
trên môi trư ng CHP có hay không b sung ch t đi u h rư ng th c v t.
tăng trư ng trên môi trư ng CHP .
l p L2 c a mô phân sinh ng n tăng trư ng trên môi trư ng CHP v i ăng t
Tế bào lớp L1 của mô phân sinh ngọn chồi ởng ờ * ớ IAA 0,17 mg/l, BA 2,5 mg/l và zeatin 1 mg/l (bột lạp và không bào lớn).
Tế bào lớp L2 của mô phân sinh ngọn chồi ở ờ *
ộ ạ ớ
tăng trư trên môi trư ng CHP v i (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
tăng trư ng trên môi trư ng CHP (b t l p và không bào l n). 4 mm N n a A a 4 mm N n a v C b 4 mm n N D 4 mm B N
n n n
5
10 mm
10 mm
Hình 3.13. Sự phân chia ngẫu nhiên (mũi tên) của tế bào lớp L2 ở vùng ngoại vi của mô phân sinh ngọn chồi chuối Cau Mẵn sau 4 tuần nuôi cấy khúc cắt mô phân sinh ngọn chồi câyin vitrotrên môi trư ng CHP .ờ *
Hình 3.14.Sự phân chia theo h ớ ũi tên) của các tế bào lớp L2
ở vùng ngoại vi của mô phân sinh ngọn chồi chuối Cau Mẵn sau 4 tuần nuôi cấy khúc cắt mô phân sinh ngọn chồi cây ờ * có bổ sung IAA 0,17 mg/l, BA 2,5 mg/l và zeatin 1 mg/l.
ư ng song song (m
trên môi trư ng CHP
Hình 3.15 - 3.20.Sự phát si ồ ừ ự ố ộ ờ MS có bổ sung IAA 0,17 mg/l và BA 2,5 mg/l.
ự ớ ụ ồ ình thành ở phần gốc sau 6 tuần nuôi cấy.
ế ộ ụ ồ ừ ự ầ ấ
Lát cắt dọc qua phần gốc cuống hoa với sự hình thành vùng trung tâm mô phân sinh ngọn chồi sau 3 tuần nuôi cấy.
Lát cắt dọc qua phần gốc cuống hoa với sự hiện diện của nhiều trung tâm mô phân sinh ngọn chồi sau 4 tuần nuôi cấy.
Lát cắt dọc qua các chồi hình thành từ mẫ ấ ự sau 5 tuần nuôi cấy. Chi tiết các chồi hình thành từ mẫu cấy hoa ự ầ ấ
nh ch i t hoa đ c non chu i H t trên môi trư ng
3.15. 3.16.
Hoa đ c non v i c m ch i h
Chi ti t m t c m ch i t hoa đ c non sau 6 tu n nuôi c y.
u c y hoa đ c non
đ c non sau 5 tu n nuôi c y.
3.17. 3.18. 3.19. 3.20. 3.15 5mm 3.16 2mm 3.18 70 mm 3.19 1mm 3.17 40 mm 3.20 250mm