Trong trường hợp dịch treo tế bào chuối Cau Mẵn có nguồn gốc mô sẹo từ hoa đực non, trên môi trường Ma*
3 đặc có bổ sung kinetin 0,1 mg/l, 2-iP 0,2
mg/l, zeatin 0,05 mg/l và NAA 0,2 mg/l, ở pH 5,3 (môi trường Ma3) và mật độ
tế bào ban đầu 15 l tế bào lắng /ml dịch treo tế bào, các phân chia không cân xứng xuất hiện sau 4 ngày nuôi cấy (hình 3.51). Các khối mô hình cầu biểu bì hóa xuất hiện sau 8 ngày và nhiều phôi hình cầu với dây treo hình thành sau 14 ngày (hình 3.52 và 3.53). Sau đó, một số phôi hình cầu phát triển thành phôi “núi lửa” với chỗ khuyết mà bên dưới là vị trí mô phân sinh ngọn chồi. Dưới kính hiển vi soi nổi, các phôi có dạng cầu, núi lửa và kim tự tháp được ghi nhận sau 21 đến 42 ngày nuôi cấy (hình 3.54). Xung quanh các phôi đầu tiên thường có nhiều phôi thứ cấp (hình 3.55).
Trong trường hợp dịch treo tế bào chuối Cau Mẵn có nguồn gốc cụm chồi tăng sinh cao, dưới kính hiển vi điện tử truyền suốt, sau 10 ngày nuôi cấy trên
môi trường Ma*
3 (không hormone) hay Ma*
3 có bổ sung kinetin 0,1 mg/l, 2-iP 0,2 mg/l, zeatin 0,05 mg/l (Ma3 loại NAA), ở pH 5,3 và mật độ tế bào ban đầu 15 l tế bào lắng/ml dịch treo tế bào, nhiều tế bào trở nên có nhân to, tế bào chất đậm đặc với sự hiện diện của hệ thống mạng nội chất, hệ thống Golgi và đặc biệt là các ti thể hình cầu. Trên môi trường Ma*3 có bổ sung kinetin 0,1 mg/l, 2-iP 0,2mg/l, zeatin 0,05 mg/l, số lượng ti thể hình cầu đặc biệt cao, nhân và hạch nhân to và tròn hơn so với trên môi trường Ma*
3 (hình 3.56 - 3.59). Các phân chia không cân xứng bắt đầu xuất hiện sau 14 ngày (hình 3.60), các khối mô hình cầu biểu bì hóa với dây treo sau 21 ngày (hình 3.61 và 3.62), và một tập hợp phôi hình cầu biểu bì hóa được thu nhận sau 28 ngày (hình 3.63). Sự biểu bì hóa của phôi hình cầu hình thành theo con đường sinh phôi soma tương tự sự biểu bì hóa của phôi hợp tử (hình 3.64 và 3.65).
Quá trình hình thành mô phân sinh ngọn chồi của phôi phát triển từ tế bào dịch treo có nguồn gốc cụm chồi tăng sinh cao chuối Cau Mẵn, trên môi trường Ma*3 có bổ sung kinetin 0,1 mg/l, 2-iP 0,02 mg/l và zeatin 0,05 mg/l, ở pH 5,3 và mật độ tế bào ban đầu 15 l tế bào lắng /ml dịch treo tế bào, bắt đầu bởi sự xuất hiện của các tế bào sẽ hình thành vùng trung tâm mô phân sinh ngọn với nhân to, tế bào chất đậm đặc ở giai đoạn phôi hình cầu sớm, sau 21 ngày nuôi cấy (hình 3.66A). Các tế bào này phát triển thành vùng trung tâm mô phân sinh ngọn vào giai đoạn phôi hình cầu muộn sau 28 ngày nuôi cấy (hình 3.66B và 3.66C), và mô phân sinh ngọn chồi vào giai đoạn phôi hình núi lửa sau 42 ngày nuôi cấy (hình 3.66D).
Sự hình thành phôi tử diệp với mô phân sinh ngọn (chồi và rễ) và hệ thống mạch được quan sát sau 14 ngày nuôi cấy phôi ở trạng thái núi lửa trên môi trường MS½, ở pH 5,7 (các phôi ở trạng thái núi lửa này được thu nhận sau 42 ngày nuôi cấy dịch treo tế bào có nguồn gốc cụm chồi tăng sinh cao chuối Cau Mẵn trên môi trường Ma*3 có bổ sung kinetin 0,1 mg/l, 2-iP 0,2 mg/l và zeatin 0,05 mg/l) (hình 3.67A). Trong một số trường hợp, cực rễ không xuất hiện (hình 3.67B).
Sự phân chia không cân xứng của tế bào dịch treo sau 4 ngày nuôi cấy Phôi hình cầu hình thành sau 8 ngày nuôi cấy.
hình thành sau 14 ngày nuôi cấy P ở các trạng thái khác nhau hình thành s 42 ngày nuôi cấy.
h 42 ngày. Hình 3.51 - 3.55. 3.51. . 3.52. 3.53. . 3.54. 3.55.
Phôi hình cầu với dây treo
hôi au
Phôi thứ cấp thành lập xung quan phôi xuất hiện trước (ở trạng thái núi lửa) sau
S phát sinh phôi t d ch treo t bào chu i Cau M n có ngu n g c mô s o trên môi trư ng Ma kinetin 0,1 mg/l, 2-iP 0,02 mg/l, zeatin 0,05 mg/l và NAA 0,2 mg/l, pH 5,3 và m t đ t bào ban đ u 15 l t bào l ng/ml d ch treo t bào.
ự ừ ị ế ố ẵ ồ ố ẹ ờ * có bổ sung ở ậ ộ ế ầ ế ắ ị ế 3 m 3.51 3.52 130 mm 3.53 1mm 200 mm 3.54 3.55
Hình 3.56.
Hình 3.57 - 3.59.
3.57. 3.58. 3.59.
Chi tiết tế bào dịch treo chuối Cau Mẵn có nguồn gốc cụm chồi t ng sinh cao sau 10 ngày nuôi cấy trên môi trường Ma * (không hormon).
Tế bào với nhân to và tròn, tế bào chất ậm ặc và mật ộ ti thể hình cầu cao. ă
đ đ đ
3
* có bổ sung
Vùng tế bào với sự hiện diện của hệ thống Golgi và c ti thể hình cầu. Vùng tế bào với sự hiện diện của ti thể và mạng nội chất.
c
Các ảnh ược chụp dưới kính hiển vi iện tử truyền suốt
N, nhân; n, nhân con; v, không bào; m, ti thể; G, hệ thống Golgi; er, mạng lưới nội chất. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
đ đ
Chi ti t t bào d ch treo chu i Cau M n có ngu n g c c m ch i tăng sinh cao sau 10 ngày nuôi c y trên môi trư ng Ma kinetin 0,1 mg/l, 2-iP 0,2 mg/l, zeatin 0,05 mg/l (các nh đư c ch p dư i kính hi n vi đi n t truy n su t).
ế ế ị ố ẵ ồ ố ụ ồ ấ ờ ả ợ ụ ớ ể ệ ử ề ố 3 á G m N er v N 2 mm 2 mm N N n n m 3.56 3.57 3.58 3.59 m m 1 mm 1 mm m m
Hình 3.60.Sự phân bào (A) và phân chia không cân xứng (B) của tế bào dịch treo có nguồn gốc cụm chồi t ng sinh cao chuối Cau Mẵn sau 14 ngày nuôi cấy
trường Ma * có bổ sung kinetin 0,1 mg/l, 2-iP 0,2 mg/l và zeatin 0,05 mg/l
ă trên môi
.
3
Hình 3.61.
Hình 3.62.
Phôi hình cầu sớm hình thành từ tế bào dịch treo có nguồn gốc cụm chồi t ng sinh cao chuối Cau Mẵn sau 21 ngày nuôi cấy trên môi trường Ma * có bổ sung kinetin 0,1 mg/l, 2-iP 0,2 mg/l và zeatin 0,05 mg/l.
Phôi hình cầu sớm hình thành từ tế bào dịch treo có nguồn gốc cụm chồi t ng sinh cao chuối Cau Mẵn trên môi trường Ma * (không hormon)
ă ă . 3 3 6 mm 6 mm 60mm 60mm 3.60A 3.60B 3.61 3.62
Hình 3.63 - 3.64.
3.63. 3.64. Hình 3.65.
Phôi hình cầu với biểu bì hóa hình thành từ dịch treo tế bào có nguồn gốc cụm chồi t ng sinh cao chuối Cau Mẵn sau 28 ngày nuôi cấy trên môi trường Ma * có bổ sung kinetin 0,1 mg/l, 2-iP 0,02 mg/l và zeatin 0,05 mg/l.
Các phôi hình cầu với biểu bì hóa.
Chi tiết một phôi hình cầu với sự biểu bì hóa. Phôi hợp tử chuối Hột 30 ngày tuổi.
ă 3 3.63 3.64 3.65 60mm 110 mm 180 mm
Hình 3.66.
(A), B), C), D),
Quá trình hình thành mô phân sinh ngọn chồi của phôi phát triển từ tế bào dịch treo có nguồn gốc cụm chồi t ng sinh cao chuối Cau Mẵn trên môi trường Ma * có bổ sung kinetin 0,1 mg/l, 2-iP 0,02 mg/l và zeatin 0,05 mg/l.
Phôi hình cầu sớm với sự hiện diện của tế bào sẽ hình thành vùng trung tâm mô phân sinh ngọn chồi sau 21 ngày nuôi cấy.
( Phôi hình cầu muộn với sự hiện diện của vùng trung tâm mô phân sinh ngọn chồi sau 28 ngày nuôi cấy.
( Chi tiết vùng trung tâm mô phân sinh ngọn chồi của phôi giai oạn
( hình núi lửa với sự hiện diện của mô phân sinh ngọn chồi sau 42 ngày nuôi cấy ă đ hình cầu muộn. Phôi . 3 C B A D 50 mm 80 mm 30 mm 100 mm
Hình 3.67.
(A)
(B)
, Phôi tử diệp với mô phân sinh ngọn chồi, vùng trung tâm mô phân sinh ngọn rễ và hệ thống mạch. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
, Phôi ở trạng thái tử diệp với hệ thống mạch không ược thành lập.đ
Phôi ở trạng thái tử diệp phát triển từ phôi hình núi lửa chuối C ẵ
ể ừ ế ị ồ ố ụ ồ ấ
ờ
au M n (phát tri n t t bào d ch treo có ngu n g c c m ch i tăng sinh cao) sau 14 ngày nuôi c y trên môi trư ng MS ½.
A B