Với mẫu ban đầu là mẫu rắn: Hàm lượng polyphenol tổng tính theo acid gallic trong nguyên liệu được tính như sau:
xỵ./.m
1000.™
Trong đó X: nồng độ polyphenol tổng tính theo acid gallic trong dung dịch mẫu đem phân tích, ppm.
V: thể tích định mức cho dung dịch thí nghiệm, ml. f: hệ sơ" pha lỗng.
m: khơi lượng mẫu thí nghiệm, g.
G: hàm lượng polyphenol tổng tính theo acid gallic có trong ngun liệu chè tươi (%).
Hàm lượng polyphenol tổng tính theo acid gallic có trong ngun liệu (tính theo khơi lượng chất khơ):
_ ơ * 1 0 0 ~
ỈOO-ĨV
Trong đó: G’: hàm lượng polyphenol tổng tính theo acid gallic có trong ngun liệu (tính theo % chất khơ).
G: hàm lượng polyphenol tổng tính theo acid gallic có trong ngun liệu (tính theo % lá chè tươi).
Phu luc 2: Xây dưng đường chuẩn caffeine:
Tiến hành phân tích caffeine với hệ thơng sắc kí lỏng cao áp gồm: bơm LC-10AS, đầu dị quang phổ SPD-6AV, máy ghi Chromatopac CR 6A và sử dụng cột ET 250/8/4 Nucleosil® 120-5 Ci8.
Báng 0-2: Thời gian lưu và diện tích peak của các mẫu chuẩn caffeine: Nồng
độ
Thời gian lưu (phút) Thời gian lưu trung bình (phút)
Diện tích peak Diện tích peak trung bình 10 5.682 5.669 245,051.000 252,862.667 10 5.632 255,696.000 10 5.693 257,841.000 20 5.660 5.651 498,579.000 505,150.667 20 5.680 505,146.000 20 5.612 511,727.000 30 5.695 5.698 754,441.000 793,922.667 30 5.702 799,577.000 30 5.698 827,750.000 40 5.677 5.677 982,268.000 1,012,898.667 40 5.680 1,027,112.000 40 5.673 1,029,316.000 50 5.662 5.650 1,277,436.000 1,285,534.667 50 5.640 1,266,941.000 50 5.648 1,312,227.000 60 5.633 5.638 1,549,622.000 1,540,751.333 60 5.638 1,547,529.000 60 5.643 1,525,103.000 70 5.628 5.625 1,776,575.000 1,821,723.333 70 5.630 1,881,243.000 70 5.617 1,807,352.000 PHỤ LỤC
80 5.650 5.639 2,387,435.000 2,333,895.667
80 5.660 2,388,298.000
80 5.608 2,225,954.000
Độ hâ'p thu của các dung dịch chuẩn
Hình 0-1 : Diện tích peak của các chuẩn caffeine ở các nồng độ khác nhau Nhìn đồ thị trên ta
thấy, độ hấp thu của các dung dịch chứa caffeine ở các nồng độ khác nhau chỉ tuyến tính khi nồng độ của caffeine dao động trong khoảng từ Oppm đến 70ppm. Do đó đường chuẩn của caffeine như sau:
Nồng độ (ppm)
Hình 0-2: Đường chuẩn caffeine.
Đường chuẩn caffeine
Vậy phương trình đường chuẩn của caffeine là: Y = 25801 * X
Trong đó: