3.4.2. Kết quả thử nghiệm chế phẩm BT với ấu trùng ruồi nhà
3.4.2.1. Thử hoạt tính diệt ấu trùng ruồi nhà Musca domestica của chế phẩm BT trong phịng thí nghiệm
Để đánh giá hoạt tính sinh học của chủng vi khuẩn MSS8.4 nuôi cấy trên môi trƣờng làm từ dịch thủy phân bã bia đối với ấu trùng ruồi nhà chúng tơi đã tiến hành thí nghiệm với ấu trùng ruồi nhà tuổi 2. Các thí nghiệm đƣợc tiến hành trong cùng một điều kiện nhiệt độ, ánh sáng thơng thƣờng, bố trí thí nghiệm nhƣ mục 2.3.3.2.4 (chƣơng 2. Vật liệu và phƣơng pháp nghiên cứu). Kết quả thí nghiệm đƣợc trình bày ở Bảng 3.16, hình 3.30.
Bảng 3.16. Kết quả thử hoạt tính diệt ấu trùng ruồi nhà Musca domestica của chế phẩm BT
Chế phẩm 24 giờ 48 giờ 72 giờ 96 giờ 120 giờ 144 giờ
CPĐK l1 C1 0/10 1/10 2/10 2/10 2/10 2/10 C2 0/10 1/10 3/10 4/10 4/10 4/10 C3 2/10 5/10 5/10 5/10 5/10 5/10 C4 0/10 1/10 1/10 1/10 1/10 2/10 C5 0/10 2/10 2/10 4/10 5/10 5/10 CPĐK C1 0/10 0/10 0/10 1/10 1/10 1/10
2/4/2014 C2 0/10 3/10 4/10 4/10 6/10 6/10 C3 0/10 0/10 0/10 1/10 2/10 2/10 CPĐK 15/4/2014 C1 0/10 0/10 0/10 2/10 3/10 4/10 C2 0/10 0/10 1/10 2/10 4/10 4/10 C3 1/10 1/10 3/10 3/10 5/10 7/10 C4 0/10 2/10 2/10 5/10 6/10 8/10 C5 0/10 0/10 0/10 1/10 3/10 4/10
Quá quá trình thử hoạt tính cho thấy, những ấu trùng chết do ăn chế phẩm BT có biểu hiện tồn thân có màu đen. Đối với những ấu trùng đã đóng kén mà trƣớc đó có ăn chế phẩm thì kén có màu đen đặc, theo dõi những kén này khơng có hiện tƣợng nở thành ruồi, điều này chứng tỏ chế phẩm BT có hoạt tính gây chết ngay cả khi ấu trùng đã đóng kén.
Hình 3.30. Thử hoạt tính diệt ấu trùng ruồi nhà của chế phẩm Bt quy mơ phịng thí nghiệm
3.4.2.2. Mơ hình thử nghiệm chế phẩm BT diệt dịi ruồi nhà quy mơ pilot
Sinh khối chủng MSS8.4 sau khi lên men đƣợc thuhồi bằng cách kết tủa, bổ sung phụ gia rồi tiến hành đông khô ở nhiệt độ thấp, áp suất cao thu đƣợc chế phẩm
diệt dòi ruồi nhà dạng bột (chỉ tiêu kỹ thuật đạt 4000AI/mg). Tiến hành thử hoạt tính diệt ấu trùng ruồi M. dometisca của chế phẩm quy mơ phịng thí nghiệm. Kế thừa kết quả thử hoạt tính của protein độc tố Cry2 trong phần 3.4.3.1 thành lập các công thức thử nghiệm nhƣ sau:
Công thức 1: 1g bột chế phẩm + 100 ml nƣớc vô trùng + 500 g bã bia + 50 ấu trùng dịi tuổi 2.
Cơng thức 2: 1,5g bột chế phẩm + 100 ml nƣớc vô trùng + 500 g bã bia + 50 ấu trùng dịi tuổi 2.
Cơng thức 3: 2 g bột chế phẩm +100 ml nƣớc vô trùng + 500 g bã bia + 50 ấu trùng dịi tuổi 2.
Cơng thức đối chứng: 100 ml nƣớc vô trùng + 500 g bã bia + 50 ấu trùng dịi tuổi 2.
Bố trí thí nghiệm: Bột chế phẩm đƣợc hịa trong 100 ml nƣớc vơ trùng, sau
đó trộn đều vào 500 gbã bia, hỗn hợp này đƣợc chứa trong các khay sắt, thả vào mỗi khay 50 ấu trùng dòi tuổi 2, đậy vải màn lên khay để ngăn ruồi ngồi mơi trƣờng đẻ
trứng vào. Các khay đƣợc đặt ở nhiệt độ 28–350C. Tỷ lệ ấu trùng ruồi nhà chết đƣợc xác định 5 ngày thử nghiệm, thí nghiệm đƣợc lặp lại 3 lần. Kết quả thử nghiệm đƣợc trình bày ở hình 3.31 và Bảng 3.17:
Bảng 3.17. Hoạt tính diệt ấu trùng ruồi của chế phẩm BTqui mô pilot ST T Công thức
thử nghiệm
Số ấu trùng Musca
domestica ban đầu
Tỷ lệ ấu trùng chết sau 5 ngày(%) 1 Côngthức1 150 53,33 2 Côngthức2 150 73,33 3 Côngthức3 150 84,67 4 CôngthứcĐC 150 0,67