3.3.1. Mẫu thí nghiệm
Mẫu thí nghiệm là phân và phủ tạng (hạch amidan, gan, lách, hạch màng treo ruột và hồi tràng) của lợn ốm và chết bị tiêu chảy có các triệu chứng của bệnh do vi khuẩn Salmonella.
Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… 24
3.3.2. Các loại mơi trường thơng thường và đặc hiệu dùng để ni cấy, phân lập và giám ñịnh vi khuẩn Salmonella lập và giám định vi khuẩn Salmonella
Mơi trường sử dụng trong nghiên cứu là những loại môi trường chế sẵn ở dạng tổng hợp, khi dùng pha theo công thức của các hãng Eiken, Oxoid, Biorad, Merk....
- Mơi trường nước thịt: dùng để kiểm tra sự phát triển của vi khuẩn. - Môi trường BPW, RV: dùng ñể tăng sinh vi khuẩn Salmonella.
- Mơi trường thạch thường: dùng để kiểm tra hình thái, màu sắc khuẩn lạc của vi khuẩn Salmonella.
- Môi trường thạch máu (Blood Agar Base): dùng ñể giữ giống và kiểm tra khả năng dung huyết của vi khuẩn Salmonella.
- Môi trường thạch DHL: là mơi trường đặc biệt dùng để ni cấy, phân lập vi khuẩn Salmonella .
- Mơi trường TSI: dùng để giám ñịnh khả năng sinh H2S và lên men ñường glucose.
- Mơi trường LIM: dùng để giám định khả năng sinh Indol và khả năng di ñộng của vi khuẩn Salmonella.
- Mơi trường BHI (Brain Heart Infusion) dùng để ñịnh typ và giữ giống vi khuẩn.
3.3.3. Các loại hóa chất
- Các loại đường: Glucoza, Mantol, Lactoza, Sorbitol, Dextroze, Sucroze, Galactoze, Manitol, Arabinoze ñể thử phản ứng lên men ñường.
- Thuốc nhuộm Gram, dung dịch Kovac’s, dung dịch Andrader. - Giấy tẩm kháng sinh (do hãng Oxoid của Anh sản xuất).
3.3.4. Các loại kháng huyết thanh chuẩn ñể ñịnh typ vi khuẩn Salmonella
Kháng huyết thanh chuẩn (do hãng Denka Seiken Co., Ltd, Tokyo, Nhật Bản sản xuất) dùng ñể ñịnh typ kháng nguyên O và H của vi khuẩn Salmonella.
3.3.5. Các loại hóa chất, Primer và chủng vi khuẩn dùng cho phản ứng PCR
Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… 25
TAE (Tris-Acetic-EDTA), nhuộm ñiện di (Gel loading buffer), nhuộm DNA (Ethidium Bromide).
- Các chủng vi khuẩn dùng làm ñối chứng dương gồm: S. choleraesuis, S. typhimurium, S. enteritidis do Viện Thú y Nhật Bản cung cấp.
3.3.6. Dụng cụ, trang thiết bị máy móc phịng thí nghiệm
ðĩa petri, lam kính, ống nghiệm, bình tam giác, pipet, micropipet, ống hút, que cấy, ñèn cồn, nồi hấp khử trùng, tủ lạnh, lị vi sóng, kính hiển vi……