Kết quả hình 4.12 cho thấy : vi khuẩn ORT phân lập được là gram âm (bắt mầu đỏ) và rất đa dạng hình thái khi kiểm tra trên kính hiển vi. Kết quả này cũng phù hợp với nghiên cứu trước đây cho rằng: ORT phân lập được là gram âm và đa hình thái (Van Empel and Hafez, 1999).
4.3.2. Xác định tính mẫn cảm của vi khuẩn với một số loại kháng sinh và thử nghiệm điều trị
4.3.2.1. Xác định tính mẫn cảm của vi khuẩn với một số loại kháng sinh
Xác định tính mẫn cảm của vi khuẩn ORT với một số loại kháng sinh, từ đó làm cơ sở cho việc đưa ra phác đồ điều trị có hiệu quả là việc làm cần thiết trong bối cảnh hiện nay. Vì vậy, sau khi phân lập và giám định được các chủng vi khuẩn ORT đang lưu hành trên đàn gà tại huyện Ba Vì, chúng tơi đã tiến hành làm kháng sinh đồ bằng kỹ thuật khoanh giấy khuyếch tán dựa theo nguyên lý Kirby – Bauer, đây cùng là kỹ thuật phổ biến nhất.
Ban đầu, chúng tôi tiến hành tăng sinh khuẩn lạc trên môi trường BHB, ủ 37ºC, 5% CO2 trong thời gian 24 - 48 giờ. Pha loãng canh khuẩn đến nồng độ thích hợp (so với độ đục chuẩn). Tiến hành hút 100µl canh khuẩn trên cấy láng đều trên môi trường Mueller Hinton đã chuẩn bị sẵn. Đặt 7 loại kháng sinh đã lựa chọn vào 7 vị trí khác nhau trên đĩa (đã được đánh dấu trước); ủ 37ºC, 5% CO2 trong thời gian 24 - 48 giờ rồi tiến hành đọc kết quả. Kết quả kiểm tra mức độ mẫn cảm với 7 loại kháng sinh của vi khuẩn ORT phân lập được trình bày ở bảng 4.9 và hình 4.13.
Bảng 4.9. Bảng tổng hợp kết quả thử tính mẫn cảm của ORT với một số loại kháng sinh
STT Tên kháng sinh Kết quả Số mẫu kiểm tra Số mẫu mẫn cảm Tỷ lệ (%) Số mẫu kháng Tỷ lệ (%) 1 Lincomycin 10 0 0,00 10 100,00 2 Amoxcicilin/ Clavulanic acid 10 10 100,00 0 0,00 3 Ampicillin 10 8 80,00 2 20,00 4 Tetracycllin 10 10 100,00 0 0,00 5 Cephalexin 10 0 0,00 10 100,00 6 Doxycycline 10 0 0,00 10 100,00 7 Erythromycin 10 6 60,00 4 40,00
Kết quả bảng 4.9 cho thấy: trong tổng số 10 mẫu ORT phân lập được kiểm tra, mức độ mẫn cảm nhất với 2 loại kháng sinh Amoxicillin/ Clavulanic acid và Tetracycline chiếm tỷ lệ 100% (10/10 mẫu); kết quả này cũng phù hợp với nghiên cứu trước đây (Võ Thị Trà An và cs., 2014). Tiếp đến là các loại kháng sinh Ampicillin chiếm tỷ lệ 80,00% (8/10 mẫu). Erythromycine là kháng sinh chuyên điều trị bệnh trên đường hô hấp; nhưng cho đến thời điểm kiểm tra, tỷ lệ mẫn cảm đã giảm xuống còn khoảng 60% (6/10 mẫu). Riêng 3 loại kháng sinh Cephalexin, Lincomycine và Doxycycline có tỷ lệ mẫn cảm thấp nhất (0%). Hiện tượng này có thể được giải thích như sau: do các loại kháng sinh trên đã được sử dụng thường xuyên trong một thời gian dài tại các trại nói chung và hộ gia đình nói riêng để điều trị các bệnh nhiễm khuẩn nói chung gây ra. Vì vậy, đã gây ra hiện tượng kháng thuốc của chủng vi khuẩn được kiểm tra hoặc chủng vi khuẩn được kiểm tra đã thu nạp được các plasmid kháng thuốc do hiện tượng truyền ngang giữa các loài vi khuẩn khác nhau gây nên.
Hình 4.13. Kết quả kiểm tra tính mẫn cảm của vi khuẩn ORT đối với các loại kháng sinh trên thạch
1) Kháng sinh Lincomycine; 2) Amoxicilln/Clavulanic acid; 3) Ampicillin; 4) Tetracycllin; 5)Cephalexin;
Với kết quả thu được trong phịng thí nghiệm của nghiên cứu này có thể đưa ra khuyến cáo cho cán bộ thú y cơ sở: Amoxicillne và Tetracycline là hai loại kháng sinh đặc hiệu có thể dùng trong q trình điều trị với vi khuẩn ORT, ngồi ra có thể sử dụng kháng sinh Ampicillin, Erythromycine để điều trị trong trường hợp gà bị nhiễm vi khuẩn ORT. Tuy nhiên, cần có chiến lược và biện pháp cụ thể để hướng dẫn người chăn nuôi và các chủ trang trại sử dụng kháng sinh có ý thức và thận trọng, tránh hiện tượng vi khuẩn kháng đồng thời với nhiều loại kháng sinh khác nhau. Có như vậy, việc sử dụng kháng sinh trong điều trị bệnh mới đem lại hiệu quả cao như mong đợi.
Kết quả hình 4.13 cho thấy: Đo đường kính của vịng vô khuẩn, đem so với bảng tiêu chuẩn đánh giá mức độ mẫn cảm và kháng kháng sinh theo nhà sản xuất giấy thử kháng sinh để xác định mức độ mẫn cảm của vi khuẩn với kháng sinh thì 2 loại kháng sinh Amoxicilln/Clavulanic acid và Tetracycllin vi khuẩn có độ mẫn cảm lớn nhất. Tiếp theo là kháng sinh Ampicillin nhưng bên trong vòng trịn khơng được trong/thuần (khơng phát hiện thấy khuẩn lạc mọc bên trong vịng trịn vơ khuẩn). Cuối cùng là kháng sinh Erythromycin; có vịng trịn vơ khuẩn nhỏ nhất nhưng bên trong vòng trịn vơ khuẩn khơng phát hiện thấy khuẩn lạc mọc (kích thước vịng vơ khuẩn vẫn đạt ngưỡng mẫn cảm nhưng mẫn cảm yếu). Ba loại kháng sinh còn lại: Cephalexin, Lincomycine và Doxycycline đã bị vi khuẩn ORT kháng lại (khuẩn lạc vẫn phát triển bình thường xung quanh tấm kháng sinh).
4.3.2.2. Thử nghiệm điều trị
Dựa trên kết quả xác định khả năng khả năng mẫn cảm với kháng sinh của chủng vi khuẩn ORT phân lập được, chúng tôi chọn ra ba loại kháng sinh thuộc các nhóm khác nhau có độ mẫn cảm cao sau đó sử dụng các sản phẩm tương đương với các loại kháng sinh đã chọn sau khi đã xác định đỗ mẫn cảm để điều trị bệnh. Mỗi loại kháng sinh chúng tôi điều trị cho 20 con gà nhiễm ORT. Ngoài sử dụng ba loại kháng sinh khác nhau để điều trị, đi kèm với mỗi loại kháng sinh chúng tôi sử dụng các chất bổ trợ giống nhau. Các chất bổ trợ đi kèm như: Paragum giúp hạ sốt cho gà, Bromecin giúp làm giãn phế quản và long đờm, Gluco K-C cung cấp năng lượng và điện giải cho gà. Qua điều trị kết quả thu được được tổng hợp và trình bày thơng qua bảng 4.10.
Bảng 4.10. Kết quả sử dụng một số kháng sinh điều trị bệnh do ORT gây ra Loại kháng sinh Loại kháng sinh Số gà được điều trị (con) Số ngày khỏi trung bình Kết quả điều trị Số gà khỏi bệnh (con) Tỷ lệ (%) Bio-Amox 50: 1g/ 5-6lít nước uống hoặc 0.20-0,03g/kg thể trọng. 20 3-5 16 80% Tetracyclin HCL: 0,125 gam/lít
nước uống hoặc 0,01-0,04 gam/gà 20 5-7 13 65%
Erymar: 1g/1,5lít nước hoặc 0,1-
0,2g/ kgthể trọng 20 5-7 11 65%
Kết quả bảng 4.10 cho thấy: trong tổng số 20 con được điều trị bằng kháng sinh Bio-Amox 50 thành phần chứa Amoxicillin, sau 3-5 ngày điều trị, có 16 con khỏi, chiếm 80%, 4 con chết chiếm tỷ lệ 20%.
Với kháng sinh Tetracyclin HCL thàng phần chứa Tetracyclin, qua điều trị thì có 13 con khỏi bệnh sau 5-7 ngày chiếm 65%, còn 7 con chết chiếm tỷ lệ 35%.
Khi sử dụng kháng sinh Erymar thành phần chứa Erythromycin điều trị, sau 5-7 ngày có 11 con khỏi bệnh đạt tỷ lệ 55%, 9 con chết chiếm tỷ lệ 45%.
Điều này có thể được giải thích như sau: đây là bệnh phức hợp trên gà, các biểu hiện triệu chứng lâm sàng dễ chẩn đoán nhầm với các bệnh truyền nhiễm khác: bệnh viêm phế quản truyền nhiễm, bệnh viêm thanh khí quản truyền nhiễm…Mặt khác, khi nghi ngờ bệnh do vi khuẩn ORT gây ra; thời gian nuôi cấy và phân lập lâu (thời gian nuôi cấy 3-5 ngày, thời gian tăng sinh 1-2 ngày…). Do vậy, để tìm được kháng sinh điều trị thông qua phản ứng khuếch tán trên thạch cần ít nhất 13 ngày. Do đó, khi dùng kháng sinh điều trị thì bệnh của con vật đã trở nên trầm trọng, sức đề kháng yếu nên tỷ lệ chết là tương đối cao.
4.3.3. Biện pháp phòng trị
4.3.3.1. Biện pháp phịng
Qua q trình thực hiện đề tại huyện Ba Vì, Hà Nội chúng tơi nhận thấy đối với các hộ chăn nuôi quy mô lớn và các hộ chăn ni lâu năm thì tỷ lệ nhiễm bệnh do ORT thấp hơn so với các hộ chăn nuôi nhỏ lẻ và mới chăn nuôi. Nguyên nhân là do quy trình phịng bệnh và ý thức phịng bệnh cho đàn gà của các hộ
chăn ni. Để có thể phịng bệnh cho gà, bà con cần chuẩn bị thức ăn tốt, nước sạch, nên chọn con giống có khả năng chống đỡ với bệnh tật cao. Giữ gìn vệ sinh chuồng ni, phát quang quanh khu chuồng nuôi. Chú ý thực hiện tốt quy trình thú y về vệ sinh phòng bệnh. Hiện nay trên thị trường Việt Nam chưa có vaccine phịng bệnh do ORT trên gà do đó việc phịng bệnh phải áp dụng các giải pháp tổng hợp mới cho kết quả tốt. Cụ thể như sau:
- Chăn nuôi vệ sinh sạch sẽ: chuồng gà ấm về mùa đơng, thống về mùa hè, nền chuồng phải ln khơ ráo, tránh gió lùa. Dọn vệ sinh thường xuyên khu vực chăn nuôi, máng ăn, máng uống đảm bảo sạch sẽ, sát trùng chuồng trại thường xuyên. Do vi khuẩn ORT rất nhạy cảm với các hóa chất sát trùng nên định kỳ bằng các thuốc sát trùng: Iodin, Benkocid, Omecide…hạn chế khí độc chuồng nuôi H2S, NH3, CO2, SO2… Hạn chế tối đa các yếu tốt stress có hại: Chăm sóc ni dưỡng gà tốt đặc biệt là vào các thời điểm chuyển mùa nhất là khi thời tiết chuyển từ ấm áp sang lạnh khô bởi vi khuẩn ORT tồn tại lâu ở nhiệt độ càng thấp, mặt khác khi thời tiết chuyển mùa cơ thể gà suy yếu là cơ hội tốt cho sự bùng phát của các loại dịch bệnh, không được để gà quá đói hoặc khát quá, đảm bảo ổn định chất lượng nguồn thức ăn, nước uống, mật độ nuôi phù hợp theo đúng lứa tuổi, giống gà. Khống chế ảnh hưởng của thời tiết như: chắn gió lùa, che mưa, giảm độ nóng vào mùa hè bằng việc xây chuồng 2 mái, có hệ thống phun nước chống nóng lên mái.. .
- Thực hiện chăn nuôi cùng vào cùng ra, nhập gà từ cơ sở giống có uy tín, đảm bảo.
- Thực hiện tiêm phòng đầy đủ các loại vacxin phòng các bệnh khác cho gà, tăng cường sức đề kháng cho gà bằng các thuốc bổ như: B.comlex, điện giải, giải độc gan, điện giải thảo dược …
- Phòng bệnh bằng kháng sinh là một biện pháp khá hiệu quả tuy nhiên chúng tôi khuyến cáo các hộ nông dân không nên sử dụng bởi nếu các hộ không sử dụng đúng liều lượng và thời gian theo hướng dẫn của nhà sản xuất thì có thể gây hiện tượng tồn dư kháng sinh ảnh hưởng xấu đến sức khỏe của người tiêu dùng và đặc biệt còn gây hiện tượng kháng thuốc của các dòng vi khuẩn ảnh hưởng rất xấu đến công tác điều trị bệnh sau này. Mặt khác, theo quy định của Bộ NN& PTNN từ ngày 1/1/2018 không được sử dụng kháng sinh để trộn vào thức ăn phòng bệnh cho động vật. Người chăn ni có thể sử dụng vi khuẩn hữu
ích probiotic đây là những vi sinh vật sống hữu ích được đưa trực tiếp vào cơ thể qua đường miệng, khi cung cấp với số lượng đầy đủ thì nó có hiệu quả sức khỏe tốt cho vật ni giúp con vật phát triển tốt và có sức đề kháng cao.
Người chăn ni cũng có thể dùng thảo dược cũng có tác dụng phòng bệnh tốt, sử dụng những chất liệu được tổng hợp từ một số loại cây để ức chế vi khuẩn lên men thối, ức chế vi khuẩn gây bệnh. Ví dụ: tỏi khơ nghiền bổ sung vào thức ăn giúp hạn chế bệnh đường hơ hấp mãn tính cho gà.
4.3.3.2. Biện pháp điều trị
Từ kết quả xác định tính mẫn cảm với kháng sinh của chủng vi khuẩn ORT phân lập được và kết quả sử dụng một số kháng sinh điều trị bệnh do ORT trên gà như trên chúng tôi đưa ra một số khuyến cáo người chăn ni là trong q trình điều trị bệnh cho gà mắc bệnh do ORT như sau:
- Thơng thường thì bệnh do ORT trên gà hay ghép với các bệnh khác. Nó có thể là ngun nhân chính cũng có thể là bệnh kế phát sau các bệnh khác (mà chủ yếu là kế phát). Bởi vậy, nguyên tắc trong điều trị bệnh do ORT là ưu tiên bệnh nào chết nhiều thì điều trị trước.
Ví dụ: Nếu đàn gà mắc ILT trước và sau đó kế phát thêm ORT thì ta nên làm lại vaccin ILT (nhỏ thẳng mũi, nếu cho uống thì uống với liều gấp đơi) rồi ngày hôm sau mới điều trị bệnh do ORT.
- Trước khi sử dụng những loại kháng sinh có độ mẫn cảm với vi khuẩn ORT để điều trị bệnh, thì người chăn ni cần hạ sốt cho gà, sau đó nâng cao sức đề kháng cho gà bằng một số thuốc như hỗ trợ long đờm bởi khi gà bị bệnh do ORT thì khí quản quản và nhánh phế quản gốc bị bịt kín bởi cục mủ hình ống làm gà rất khó thở việc bổ sung các chất như long đờm giúp cho khí quản dãn ra đặc biệt nên sử dụng các chất long đờm có chứa tinh dầu bạc hà giúp cho gà dễ thở hơn là rất cần thiết, ngoài ra có thể bổ sung thêm bổ gan, men tiêu hóa sống, vitamin và điện giải… giúp nâng cao hiệu quả hiệu quả điều trị bệnh. Trong điều trị bệnh do ORT, việc chăm sóc, bổ sung các vitamin, khống chất, giữ cho khí hậu chuồng ni, mơi trường xung quanh được thơng thống, sạch sẽ là rất cần thiết, giúp cơng tác điều trị bệnh có hiệu quả cao. Ngun tắc điều trị trong đàn gà mới thấy một số con bị bệnh do ORT thì phải chữa cho cả đàn bởi ORT có thể lây lan qua tiếp xúc từ con ốm sang con khỏe, qua máng ăn máng uống, hay qua khơng khí. Ngồi uống cho cả đàn cần phải tiêm trực tiếp cho những con bị nặng.
Tuy nhiên chúng tôi cũng khuyến cáo nên loại bỏ những gà bị bệnh nặng đặc biệt là nhóm gà đẻ.
- Do bệnh xảy ra chậm nên mỗi liệu trình cần điều trị cần kéo dài trong khoảng thời gian 5-7 ngày nhằm tiêu diệt triệt để mầm bệnh.
Lưu ý: sau khi điều trị tỉ lệ chết ngừng ngay nhưng sau 3 ngày vẫn cịn tình trạng vẩy mỏ, khẹc trong vài ngày nữa.
Như vậy, nếu thấy đàn gà có các triệu chứng hơ hấp như khó thở, ho, khẹc, rướn cổ thở; thở kiểu đớp khí; mổ khám thấy phổi viêm có mủ, bã đậu hình ống trong phổi và 2 phế quản chính thì có thể gần như chắc chắn đó là bệnh do ORT trên gà. Điều trị bệnh do ORT ngồi việc sử dụng kháng sinh cịn cần đặc biệt chú trọng đến việc bổ trợ sức khỏe cho toàn đàn.
PHẦN 5. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
5.1. KẾT LUẬN
Từ kết quả nghiên cứu này có thể đưa ra một số kết luận sau:
Một số đặc điểm bệnh lý của gà thả vườn Ba Vì mắc bệnh do ORT:
Chẩn đoán vi khuẩn ORT bằng kĩ thuật PCR : Xác định được 45/58 mẫu dương tính (77,59%) với vi khuẩn ORT bằng kỹ thuật PCR.
Triệu chứng lâm sàng của đàn gà mắc bệnh do ORT: Ủ rũ, mệt mỏi, xã cánh, khó thở, bỏ ăn hoặc giảm ăn 100%; sốt, chảy dịch mũi, dịch miệng, giảm đẻ, trứng biến dạng, giảm tăng trọng từ 77,78-89,29% số gà theo dõi.
Những biến đổi bệnh lý đại thể của gà mắc bệnh do ORT: Xác định được bệnh tích đại thể ở các cơ quan phủ tạng có tỷ lệ cao: Phổi viêm 100%; khí quản có dịch nhày, túi khí có fibrin 93,33%; xuất huyết khí quản 80%; phổi viêm hóa mủ 77,78% và một số bệnh tích khác có tỷ lệ thấp hơn (ở thận; gan, lách ...).
Một số đặc điểm dịch tễ cuả gà thả vườn Ba Vì mắc bệnh do ORT:
Điều tra tình hình mắc bệnh do ORT trên đàn gà theo lứa tuổi: Gà mắc bệnh theo lứa tuổi, nặng nhất ở ≤ 6 tuần tuổi (53,1%), đến gà 7-20 tuần tuổi (51,43%) và cuối cùng là >20 tuần tuổi (44,23%). Tỷ lệ chết tương ứng: 32,95%; 16% và 12,82%.
Điều tra tình hình mắc bệnh do ORT trên đàn gà theo mùa vụ: Gà mắc bệnh theo mùa vụ, nặng nhất Đông-Xuân (54,37%), đến Thu-Đông(49,79%) và cuối cùng là Xuân-Hè (39,56%). Tỷ lệ chết tương ứng: 24,33%, 22,55% và 17,58%.
Điều tra tình hình mắc bệnh do ORT trên đàn gà theo truyền thống chăn