Sau khi khuyếch đại ADN của Azospirillum bằng kỹ thuật PCR, sau đó tiếp tục điện di sản phẩm PCR và chụp hình gel. Kết quả điện di sản phẩm PCR và chụp hình gel cho thấy các dòng Azospirillum sp. 6T1 và Azospirillum
sp. T7 có kích thước ADN ở vị trí băng (band) 400bp phù hợp với đối chứng dương A. lipoferum; các dòng Azospirillum sp. 25HR và Azospirillum sp. 7R có kích thước ADN ở vị trí băng (band) 650bp phù hợp với đối chứng dương
A. brasilene (Hình 4.4 và Hình 4.5). Như vậy, các dòng Azospirillum sp. 6T1 và Azospirillum sp. T7 này thuộc loài A. lipoferum; dòng Azospirillum sp.
76
25HR và Azospirillum sp. 7R thuộc loài A. brasilene. Điều này phù hợp với vị trí băng của gen nifH cố định đạm khi được khuyếch đại với cặp mồi chuyên biệt của vi khuẩn A. lipoferum và A. brasilene. Tương tự, khi sử dụng kỹ thuật PCR để định danh các dòng vi khuẩn A. lipoferum và A. brasilense, tác giả Krieg và Döbereiner (1984), Okon và Labandera-Gonzalez (1994) và Bashan
et al. (2004) đã phân lập, định danh được loài A. lipoferum và A. brasilense. Như vậy, những dòng còn lại có kích thước ADN ở vị trí băng không tương ứng với hai cặp mồi I và II nêu trên, điều này chứng tỏ chúng không thuộc vào hai loài A. lipoferum và A. brasilense mà có thể thuộc vào những loài Azospirillum khác.
Chú thích:
Giếng 1: Dòng T7 Giếng 2: Dòng 6T1 Giếng 3: Đối chứng âm
Giếng 4: Đối chứng dương A. lipoferum Giếng 5: Thang chuẩn 100bp.
Hình 4.4: Phổ diện điện di các dòng vi khuẩn Azospirillum với cặp mồi chuyên biệt Azospirillum lipoferum
1 2 3 4 5 6 7 8 9 1011 1213 14151617
Chú thích:
Giếng 1: Đối chứng âm.
Giếng 2: Đối chứng dương A. brasilene. Giếng 3: Dòng H1R10. Giếng 4: Dòng 25HR. Giếng 5: Dòng H1T10. Giếng 6: Dòng 7R. Giếng 7: Dòng 4R. Giếng 8: Dòng 30T. Giếng 9: Dòng CT10.
Giếng 10: Thang chuẩn 100bp.
Giếng 11: Đối chứng dương A. lipoferum. Giếng 12: Dòng H1R10. Giếng 13: Dòng 25HR. Giếng 14: Dòng H1T10. Giếng 15: Dòng 7R. Giếng 16: Dòng 4R. Giếng 17: Dòng 30T.
Hình 4.5: Phổ diện điện di các dòng vi khuẩn Azospirillum với cặp mồi chuyên biệt Azospirillum brasilense.