Địa điểm: tại cỏc xó/thị trấn của huyện Phổ Yờn, tỉnh Thỏi Nguyờn. Địa
bàn này được chọn do cú đội ngũ cỏn bộ y tế mạnh, cú trỡnh độ chuyờn mụn và cú mạng lưới y tế cơ sở tốt, cỏch Hà Nội khụng xa giỳp cho việc giỏm sỏt cỏc hoạt can thiệp được thuận lợi và cú hiệu quả.
Đối tượng: -Trẻ từ 6-12 thỏng tuổi
- Mẹ hoặc người chăm súc trẻ
Cỡ mẫu: Áp dụng cụng thức tớnh cỡ mẫu của Hassard [105].
2 2 2 ( ) 2 Z Z n d α + β δ =
Đõy là cụng thức để tớnh cỡ mẫu cho nghiờn cứu can thiệp được tớnh toỏn dựa trờn 2 biến số chủ yếu mà nghiờn cứu mong muốn tỡm hiểu là sự thay đổi số ngày bị ARI và số ngày bị tiờu chảy của trẻ trong thời gian 6 thỏng can thiệp.
- Cỡ mẫu tớnh theo số ngày trung bỡnh bị ARI: Ước lượng sự khỏc biệt thay đổi số ngày trung bỡnh bị ARI giữa cỏc nhúm can thiệp so với nhúm đối chứng (d) là 0,22 ngày, SD (δ ) được ước lượng là 0,28 ngày (theo kết quả nghiờn cứu của Weizman) [162], với e = 0,05; lực mẫu 90%. Cỡ mẫu cần cho mỗi nhúm nghiờn cứu sẽ là: 2 2 2 (1,96 0,84) .0, 28 2 25 0, 22 n= + =
- Cỡ mẫu tớnh theo số ngày trung bỡnh bị tiờu chảy: Ước lượng sự khỏc biệt thay đổi số ngày trung bỡnh bị tiờu chảy giữa cỏc nhúm can thiệp so với nhúm đối chứng (d) là 1,2 ngày, SD (δ ) được ước lượng là 2,3 ngày (theo kết quả nghiờn cứu của Shornikova) [147], với e = 0,05; lực mẫu 90%. Cỡ mẫu cần cho mỗi nhúm nghiờn cứu sẽ là: 2 2 2 (1,96 0,84) .2,3 2 57 1, 2 n = + =
Để thoả món cả 2 tiờu chớ trờn thỡ cỡ mẫu cần là 57 trẻ/nhúm. Tỷ lệ bỏ cuộc ước tớnh là 15% trong 6 thỏng nghiờn cứu. Như vậy cỡ mẫu cần thiết cho mỗi nhúm can thiệp là 65 trẻ. Tổng số trẻ tham gia nghiờn cứu can thiệp sẽ là:
65 trẻ/nhúm x 4 nhúm = 260 trẻ.
Cỡ mẫu xột nghiệm mẫu phõn: 80 mẫu phõn của trẻ được thu thập tại 3 thời điểm ngay từ đầu, sau 3 và 6 thỏng can thiệp.
2.2.2.2.Phương phỏp chọn mẫu:
Tiờu chuẩn lựa chọn đối tượng tham gia nghiờn cứu:
- Trẻ 5 - 6 thỏng tuổi, mẹ khụng cú sữa hoặc khụng đủ sữa và đó ăn thờm.
- Trẻ 5 - 6 thỏng tuổi, khụng được bỳ mẹ vỡ một lớ do nào đú.
- Cỏc bà mẹ và thành viờn gia đỡnh phải viết bản cam kết tự nguyện tham gia và tuõn thủ cỏc yờu cầu đặt ra của nghiờn cứu.
Tiờu chuẩn loại bỏ đối tượng:
- Trẻ mắc cỏc bệnh bẩm sinh, Trẻ đang mắc bệnh tại thời điểm điều tra
- Trẻ cú cõn nặng sơ sinh thấp dưới 2500 gam - Trẻ bị suy dinh dưỡng nặng
- Trẻ dị ứng với sữa bũ
- Trẻ đang sử dụng cỏc sản phẩm cú tăng cường prebiotic và probiotic - Mẹ và thành viờn gia đỡnh khụng đồng ý tham gia
Cỏch chọn mẫu:
- Trong số 322 trẻ đó tham gia trong điều tra ban đầu, chọn ra được 260 trẻ thoả món cỏc tiờu chớ của nghiờn cứu can thiệp và gia đỡnh tự nguyện đồng ý tham gia để đưa vào nghiờn cứu can thiệp.
Cỏch chia nhúm nghiờn cứu:
- 260 trẻ được lựa chọn ở trờn cũng sẽ được đỏnh mó số theo danh sỏch từ 1 đến 260 và sẽ được nhận cỏc gúi sữa bổ sung cú đỏnh mó số tương ứng trong suốt 6 thỏng thực hiện can thiệp.
- Những người tham gia nghiờn cứu và cỏc bà mẹ của trẻ đều khụng biết trẻ thuộc nhúm nào trong 4 nhúm can thiệp sau:
• Nhúm chứng: Sữa khụng được bổ sung prebiotic hoặc synbiotic
• Nhúm prebiotic: Sữa được bổ sung 0,8g/ngày prebiotic (GOS/FOS)
• Nhúm synbiotic1: Sữa được bổ sung 0,8g/ngày prebiotic (GOS/FOS) và 2,6 x 109 CFU/ngày hỗn hợp 2 probiotic (CRL431/BB12)
• Nhúm synbiotic 2: Sữa được bổ sung 1,6g/ngày prebiotic (GOS/FOS) và 2,6 x 109 CFU/ngày hỗn hợp 2 probiotic (CRL431/BB12)
Cỏch chọn mẫu phõn
80 trẻ được lựa chọn ngẫu nhiờn ngay từ khi bắt đầu nghiờn cứu, mỗi nhúm 20 trẻ để thu thập mẫu phõn cho xột nghiệm vi sinh và cỏc trẻ được chọn này được tiếp tục lấy mẫu phõn tại thời điểm sau 3 và 6 thỏng can thiệp.